大豆TST基因的生物信息学及表达模式分析

TST为典型膜结合蛋白,具有高度保守序列,广泛存在于植物组织和细胞中。文章根据NCBI网站、Phytozomes数据库和MEGA软件分析大豆基因组中TST同源基因生物信息,发现大豆相关数据库中有8个大豆TST相关基因拷贝,其中5个TST基因与拟南芥和甜菜亲缘关系较近;通过实时荧光定量PCR分析大豆TST基因时空表达模式,确定GmTST2.1基因发挥拷贝作用;克隆GmTST2.1基因并分析其生物信息发现,GmTST2.1蛋白质由734个氨基酸组成,PI为5.1不稳定疏水性蛋白质,二级结构主要由α-螺旋、无规则卷曲和片层结构组成,有典型N端跨膜结构域-中间胞质区-C端跨膜区结构域特征。研究分析GmTST基因生物信息学和表达模式,为进一步验证GmTST基因生物学功能提供借鉴和理论基础。     

基于职业标准的课程体系改革研究

国务院印发《国家职业教育改革实施方案》(国发[2019]4号),鼓励学生获得学历同时积极获得各种职业技能水平证书。基于此,从黑龙江能源职业学院机电工程系实际出发,探讨了职业标准融入课程体系的改革,以及“1+X证书”制度的推行,从而实现了职业标准与高职教育的有效对接。     

应用SSH技术鉴定枳抗CTV相关基因

应用SSH 技术构建了CTV诱导的枳的正向和反向cDNA文库,经菌液PCR检测,从两个文库中分别随机 挑选了100个阳性克隆测序,共获得169条表达序列标签(ESTs).用每条EST序列对应的克里曼丁基因组预测转 录序列进行GO 功能注释,去除在两个文库中均有出现的ESTs后,共得到与已知基因具有较高相似度,涉及39个 特异性表达基因的EST83条,并对4个特异性表达基因进行了实时定量PCR验证.结果表明:CTV侵染之后,枳 启动了相关抗逆防御机制来减少伤害,木质素代谢、RNA干扰、赤霉素、生长素以及光敏色素调控可能在抗CTV 中发挥了一定作用.     

柑橘和拟南芥 RIN4基因的过表达载体构建及其对沙田柚的 DNA 转化

用逆转承 cDNA 聚合酶链式扩增（RT‐PCR）方法,分别从克里曼丁橘和拟南芥中克隆出 RIN4基因,连接到表达载体 pFGC5941,构建了柑橘 CcRIN4和拟南芥 A tRIN4基因的过表达载体,并成功转入 EHA105农杆菌。通过农杆菌介导法将过表达载体转入沙田柚,获得柑橘和拟南芥 RIN4基因的转基因沙田柚植株各6株。     

全国防爆电器职业教育集团化办学的探索与实践

本文从学校集团化办学的视角,全面阐述了全国防爆电器职业教育集团的办学实践与经验,并反思了该职教集团办学过程中存在的困境与难题。     

高寒地区基于职业教育发展现状与深化产教融合的探讨

受益于政策的重视和产业升级,职业教育对经济发展的促进作用显得更为重要。义务教育结束后的两次教育分轨中选择了职业教育的学生绝对占据着我国受教育人口中的大多数,接受职业教育培养的人才将成为市场经济中的主要劳动力,重视职业教育人才素质教育的培养,注重校企合作深化产教融合的重要性,是职业教育中需要深思的题目。     

‘伏令夏橙’原位转化体系的建立及优化

以‘伏令夏橙’实生苗为材料进行原位转化体系建立及优化。首先，研究侵染部位对原位转化效率的影响：使用带有PBI121载体的农杆菌分别侵染5周龄‘伏令夏橙’实生苗上胚轴切口、顶芽切口（保留/去除真叶）2次，共培养3 d后进行抗性筛选及暗处理，7周后提取叶片DNA用于转基因植株PCR鉴定；之后，以上胚轴切口作为侵染部位进一步研究苗龄对原位转化效率的影响。研究结果表明，5周龄上胚轴切口再生率为93.10%，转化率为20.68%；保留/去除真叶后侵染顶芽时，再生率分别为81.74%和94.55%，转化率分别为19.09%和17.82%；4周龄和6周龄上胚轴切口再生率为94.59%和91.50%，转化率为25.42%和19.36%。可见利用农杆菌介导的遗传转化法原位转化4周龄‘伏令夏橙’的上胚轴切口可获得较高的转化效率。原位转化操作简单、周期短、转化率高，在甜橙遗传育种研究中具有重要的应用价值。     

枳感染柑橘衰退病病毒后的应答基因分析

 枳（Poncirus trifoliata L.）高抗柑橘衰退病病毒（Citrus tristeza virus,CTV）,但相关抗性机理仍不为人所知。以嫁接健康枝条的无毒枳作为对照,用Affymetrix柑橘基因芯片分析了感染CTV后枳叶片中基因的表达变化情况。结果共检测到表达量差异倍数≥ 2的基因295个,其中216个表达上调,79个表达下调。BLAST2GO分析发现,差异表达的基因中与抗逆反应相关的基因最多,乙烯、茉莉酸、赤霉素、脱落酸、生长素、水杨酸等植物激素代谢和调节相关基因为数不少,一些编码细胞壁形成或组分相关蛋白的基因差异表达明显。本研究可为揭示枳抗CTV的机理提供了转录组学线索。     

包裹型邮件智能分拣系统设计

采用条形码识别技术和单片机控制技术,设计了一款包裹型邮件智能分拣系统,该分拣系统快速、灵活、准确,操作维护简单方便。在设计过程中,应用了机械设计、单片机控制、接口技术、数据采集与处理的理论。该系统的应用将有效降低人工成本和提高生产率,为邮政快递中的分拣业务提供有力保障。     

应用抑制性差减杂交技术筛选锦橙CTV应答基因

【目的】探讨易感柑橘衰退病病毒（Citrus tristeza virus,CTV）品种锦橙CTV应答分子机理,筛选和分析CTV应答基因。【方法】以嫁接CTV强毒株TRL514的锦橙阳性材料叶片为试验方（Tester）,用嫁接无毒枝条的CTV阴性锦橙叶片为驱动方（Driver）,构建CTV侵染的锦橙的正向差减文库。【结果】随机挑选850个阳性克隆测序,其中742条测序成功,去除载体片段和接头序列后得到有效EST 692条。将所有EST序列对应到柑橘的预测基因组转录物,共涉及137个柑橘基因。应用BLAST2GO对这些特异性表达的基因进行功能归类和KEGG分析。结果表明,受CTV侵染的影响,锦橙能量代谢相关基因上调明显,与光合器官碳固定、氮代谢、淀粉和蔗糖代谢等途径相关的EST出现频率较高。另外,与抗逆防御以及苯基丙氨酸合成、类苯基丙烷代谢、类胡萝卜素合成等与植物防御素类物质合成密切相关的代谢途径相关基因较多。【结论】由于CTV的侵染,CTV易感品种锦橙基础代谢改变明显,须通过增强能量代谢和提高自身防御能力来维持自身生长和发育。