珍稀植物青檀天然群体种子表型变异分析

为了搞清山东青檀的表型变异程度及变异规律,采用方差分析、相关分析、聚类分析等分析方法,对青檀(Pteroceltis tatarinowii)5个天然群体种子表型性状进行了比较分析。结果表明,山东青檀种子具有丰富的表型变异,其变异主要来源于群体内的变异;各性状群体间表型分化系数为7.9%～59.70%,平均值为39.10%;所有性状的变异系数平均值为22.74%,各群体的表型变异程度有青檀寺(25.86%)佛峪(25.80%)莲台山(23.60%)曲阜(22.12%)灵岩寺(16.31%);各表型性状间大多呈显著或极显著的相关关系;5个青檀群体被聚合成2组,其地理变异规律遵循随机变异模式。     

四倍体刺槐茎段遗传转化体系优化的研究

利用携带pCAMBIA2300-beta质粒的根癌农杆菌GV3101对四倍体刺槐的茎段进行遗传转化,并从As用法、菌液的活化及低温预培养3方面对四倍体刺槐转化效率的影响进行研究,发现用As溶液对外植体伤口处进行浸泡处理可明显提高抗性芽的获得率,得到的转基因株系经PCR检测为阳性。     

pCAMBIA2300-betA-BADH双价基因植物表达载体的构建

将载体pCAMBIA2300-35s-OCS进行改造,增加了酶切位点Sac Ⅰ,之后,PCR扩增编码胆碱脱氢酶(CDH)的基因并用Sma Ⅰ和Xba Ⅰ将其与改造后的pCAMBIA2300-35s-OCS连接,得到单价植物表达栽体p2300-gz-betA.再通过Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、Sac Ⅰ等酶切位点将编码甜菜碱醛脱氧酶(BADH)的基因及其启动子和终止序列连接到栽体p2300-gz-betA上,最终得到pCAMBIA2300-betA-BADH双价植物表达载体,并将其导入根癌农杆菌GV3101和LBA4404.betA和BADH是编码甜菜碱合成途径的两个关键酶的基因(CDH和BADH),也是近年来研究较多的耐盐基因,其双价植物表达栽体应用于遗传转化后,有望进一步提高转基因植物的耐盐性.     

刺榆组培快繁体系建立

通过初步建立刺榆的组培快繁体系,发现6-苄氨基嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)、硝酸铵3种物质对提高刺榆的平均出芽数均有促进作用,IBA可促进刺榆外植体分化,硝酸铵可提高芽的平均高度,并促使组培苗生长旺盛.刺榆外植体最佳启动培养基为DKW培养基+6-BA0.2mg/L+IBA0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.0g/L,可有效提高平均出芽数.     

尾穗苋凝集素（ACA）基因植物表达载体的构建

尾穗苋凝集素（Amaranthus caudatusagglutin in,ACA）是一种存在于尾穗苋种子中的贮藏蛋白,属苋菜凝集素家族,对同翅目害虫如蚜虫、褐飞虱、叶蝉等有明显的致死作用。植物表达载体pCAMB IA2300-35S-OCS带有35S启动子及终止序列、卡那霉素（Kan）抗性基因NPTⅡ。载体pGEMT-ACA含有ACA基因,通过PCR扩增出ACA基因。把植物表达载体pCAMB IA2300-35S-OCS和扩增后的ACA基因用KpnⅠ和SalⅠ双酶切后经连接酶连接,得到植物表达载体pCAMB IA2300-ACA。将该载体分别导入农杆菌GV3101和LBA4404进行保存。     

红枫叶片花色素及花色苷HPLC定量分析

利用高效液相色谱法定量分析了红枫鲜叶片中Cy3G、Pn3G、Mv、Cy、Pn和Cy3G5G等6种色素。其中Cy3G和色素1是红枫鲜叶片中两种重要色素,其相对含量均超过检测到色素总含量的25%以上,分别占总含量的38.48%和27.3%,鲜叶片中实际含量分别为2.502mg/g和1.775mg/g。除色素1外,较大含量的色素还有色素2(保留时间为18.343min)和色素3(保留时间为17.463min),分别占总含量的6.32%和5.59%,它们可能在红枫叶片呈色过程中起一定作用。未知色素的结构和含量需要进一步鉴定分析。     

山东珍稀濒危树种种子形态特征研究

本研究利用种子扫描仪和显微镜对19种山东省珍稀濒危树种种子的形态特征进行研究,并进行剪切试验观察种子饱满程度。结果显示,山东珍稀濒危树种种子的形状主要有卵形、椭圆形、肾形、球形、三棱形等,颜色主要以褐色居多。大部分种子比较饱满,少部分种子空瘪、虫蛀较多。形态特征显示不同地区的珍稀濒危树种种子存在一定的差异,具有分布规律。     

不同外源激素对北京花楸不定芽分化及其生根的影响

为建立北京花楸组织培养高效繁殖技术体系,本试验以新抽生枝条的顶部带芽茎段为材料,探索了基于MS培养基的不同外源激素配比对北京花楸不定芽分化及生根的影响。结果表明,6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)是影响北京花楸不定芽增殖的主要因素,吲哚丁酸(IBA)是影响根分化的主要因素。北京花楸的最佳芽增殖培养基为MS+1.25 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.25 mg/L IBA+30.0 g/L蔗糖+7.0 g/L琼脂粉(pH值为5.8),可使平均出芽数和平均有效出芽数(芽高≥0.7cm)达到26.50个和5.0个以上。北京花楸的最佳生根培养基为MS+1.25 mg/L IBA+30.0 g/L蔗糖+7.0 g/L琼脂粉(pH值为5.8),可使生根率达93.33%。建立的炼苗方式可使移栽成活率达100%。     

磷脂酰肌醇合成酶PIS基因植物表达载体的构建

磷脂酰肌醇(PI)是真核细胞中主要的磷脂组分,磷脂酰肌醇合成酶(PIS)是磷脂酰肌醇合成途径中的关键酶,它的功能是催化myo-肌醇和CDP-DG反应产生磷脂酰肌醇。将玉米PIS基因与载体pCAMBIA2300-35s连接,得到植物表达载体pCAMBIA2300-35s-PIS,该载体带有CaMV35s启动子、PIS基因、终止序列及一个CaMV35s启动子启动的NPTⅡ抗性筛选基因。将构建好的PIS植物表达载体转入农杆菌中,用于将来国槐等木本植物的转化。     

pCAMBIA2300-betA-BADH双价基因植物表达载体的构建

摘要：本实验以载体pCAMBIA2300-35s-OCS为基础通过分子克隆手段,将甜菜碱合成途径的两个关键酶基因,即编码胆碱脱氢酶（CDH）的betA基因和编码甜菜碱醛脱氧酶（BADH）的BADH基因及启动子和终止序列构建在同一植物表达载体上,得到pCAMBIA2300-betA-BADH双价植物表达载体。并将其导入根癌农杆菌GV3101和LBA4404,进一步用于双子叶植物的遗传转化。