金龟子绿僵菌fluG基因的敲除及对产孢的影响

丝状真菌的fluG基因参与调控分生孢子的生成,然而在昆虫病原真菌金龟子绿僵菌中fluG的作用鲜有研究报道。本研究利用DNA同源重组方法,构建敲除fluG的金龟子绿僵菌突变株,分析突变株的产孢特性。以苯菌灵抗性基因ben作为筛选标记,fluG基因侧翼序列作为同源臂,构建了打靶载体pDHt/sk-fluG-Ben。利用PEG介导将打靶载体转化金龟子绿僵菌的原生质体,获得了苯菌灵抗性转化子。根据靶基因和标记基因检验,确定获得了敲除fluG的金龟子绿僵菌突变株。表型分析显示,fluG突变株继代培养5代仍保持苯菌灵抗性,菌落呈疏松毛絮状,生长相较野生型明显缓慢,不能或者仅能产生极少量分生孢子。说明fluG基因的敲除影响了菌株生长发育,并阻止了分生孢子形成,是金龟子绿僵菌产孢调节的重要基因。本研究为阐述金龟子绿僵菌产孢调控机制提供依据。     

超声波法提取乌饭树叶槲皮素的工艺研究

[目的]优化从安吉乌饭树叶中提取黄酮类色素槲皮素的超声波辅助提取工艺。[方法]采用超声波辅助提取法从乌饭树叶中提取黄酮类色素槲皮素,以槲皮素提取率为评价指标,以紫外分光光度法为测定手段,在单因素试验的基础上,通过正交试验L9(34)对提取工艺进行优选。[结果]乌饭树叶中槲皮素的最佳工艺提取条件为:超声功率320 W,乙醇浓度50%,固液比1∶20 g/ml,提取时间30 min,此时槲皮素的提取率可达4.46%。[结论]超声波法提取乌饭树叶中的槲皮素,操作简单,提取率高,是一种工业化生产较理想的提取工艺。