金龟子绿僵菌fluG基因的敲除及对产孢的影响

丝状真菌的fluG基因参与调控分生孢子的生成，然而在昆虫病原真菌金龟子绿僵菌中fluG的作用鲜有研究报道。本研究利用DNA同源重组方法，构建敲除fluG的金龟子绿僵菌突变株，分析突变株的产孢特性。以苯菌灵抗性基因ben作为筛选标记，fluG基因侧翼序列作为同源臂，构建了打靶载体pDHt/sk-fluG-Ben。利用PEG介导将打靶载体转化金龟子绿僵菌的原生质体，获得了苯菌灵抗性转化子。根据靶基因和标记基因检验，确定获得了敲除fluG的金龟子绿僵菌突变株。表型分析显示，fluG突变株继代培养5代仍保持苯菌灵抗性，菌落呈疏松毛絮状，生长相较野生型明显缓慢，不能或者仅能产生极少量分生孢子。说明fluG基因的敲除影响了菌株生长发育，并阻止了分生孢子形成，是金龟子绿僵菌产孢调节的重要基因。本研究为阐述金龟子绿僵菌产孢调控机制提供依据。