猪流行性腹泻灭活疫苗的研究

用猪流行性腹泻(PED)沪毒株研制氢氧化铝灭活疫苗.接种途径为后海穴位。以0.1ml/头主动免疫接种3日龄仔猪,保护率为77.28%;以0.5ml/头主动免疫接种3～22日龄仔猪,保护率为85%;以3ml/头被动免疫接种妊娠母猪,其所产3日龄仔猪的保护率为97.06%。接种疫苗后14天开始产生免疫力。免疫期可达6个月.疫苗在室温(19～26℃)保存226天仍保持较好的免疫原性.     

猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻病毒抗原成份分析

采用聚乙二醇沉淀法结合蔗糖梯度密度离心法纯化了猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED)两种病毒.SDS-PAGE 分析表明,TGEV 有六种蛋白成份,依次为 VP_1(33KD)、VP_2(41KD)、VP_3(58KD)、VP_4(60KD)、VP_5(142KD)和 VP_6(200KD);PEDV亦有六种蛋白成份.为VP_1(33KD)、VP_2(40KD)、VP_3(53KD)、VP_4(62KD)、VP_5(163KD)和VP_6(190KD).两种病毒的结构蛋白间的差异主要表现在 VP_5上.Westen-Blot 分析证明,TGEV 与 PEDV 在VP_2和 VP_4处存在抗原活性交叉反应,其它结构蛋白则无,VP_1和 VP_2为基质蛋白,VP_3和 VP_4为核蛋白,VP_5和 VP_6为纤突蛋白,病毒纤突蛋白可诱生中和抗体.因此认为,TGEV 和 PEDV 在 VP_5结构蛋白上表现出来的差异很可能是导致两种病毒间无血清学交叉反应的分子基础.两种病毒在 VP_2和 VP_4处有抗原活性交叉反应,这可能由于两种病毒的基质蛋白和核蛋白在生物进化中有一定亲缘关系。     

鸡传染性法氏囊病野毒株的分离鉴定

从患传染性法氏囊病(IBD)病鸡中分离出一株IBD病毒(IBDV)。该病毒是一株IBDV超强毒株,可使10周龄健康鸡100%发病,83.7％死亡。死亡鸡具有TBD的典型病变。     

IBD超强毒的致病力试验

经 IBD 超强毒 HBD-1(vvIBDV-HBD-1)接种,4、6和8周龄 SPF 鸡或普通健康鸡可100%发病和死亡;可使10周龄普通健康鸡100%发病,85.7%死亡.剖检死亡鸡可见到与野外 IBD 病例相同的病理变化。IBD 疫苗及单克隆抗体均能提供对 vvIBDV-HBD-1攻击的保护。     

应用免疫荧光法诊断猪流行性腹泻的研究

应用直接免疫荧光法对猪流行性腹泻病毒(PEDV)人工感染仔猪的检出阳性率为91.4%(42/46),电镜观察阳性率为67.4%(31/46);对自然腹泻猪的检出阳性率为47.8%(11/23).对人工感染仔猪二十种组织器官冷冻切片的检测表明,PEDV 感染为肠道局部感染,应用肠粘膜涂片和冷冻切片对人工感染猪和自然腹泻猪检出率相同.应用间接免疫荧光法对 PED 阳性猪场血清的检出阳性率为89%(89/100);对屠宰场猪血清的检出阳性率为25.2%(51/202).PED 血清于4℃和20℃保存一个月后,用间接免疫荧光法俭测,其抗体效价分别降低2个或3个滴度;-20℃冻存10个月,未见抗体效价下降.对用间接免疫荧光法检出的 PED 阳性的52头份猪血清进行猪传染性胃肠炎中和试验,阳性率为21.2%,首次证明我国存在 PED 与 TGE 的混合感染.