纤维蛋白原的5种提取方法比较研究

为了确定纤维蛋白原的最佳提取方案。本研究主要采用反复冷沉淀法、经典冷沉淀法、冷乙醇法、硫酸铵沉淀法和聚乙二醇沉淀法对猪抗凝全血进行纤维蛋白原的提取;以单次血液处理量、制备流程耗时、纤维蛋白原的浓度,是否需要添加化学试剂和所得纤维蛋白原的纯度为考察指标,确定纤维蛋白原的最佳提取方案。结果表明：反复冷沉淀法与经典冷沉淀法相比可以明显提高提取的纤维蛋白原浓度,与化学法相比,全程均采用物理方法,无需添加任何化学制剂,不存在化学制剂回收问题,纤维蛋白原纯度较高,提取的纤维蛋白原浓度符合外用纤维蛋白原质量标准。对结果综合分析可知,反复冷沉淀法是最佳的纤维蛋白原的提取方法。     

纤维蛋白胶复合物促进犬骨折愈合的临床学观察

为了探索纤维蛋白胶(FG)联合人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和妥布霉素的复合物对犬骨折愈合的影响,建立了犬胫骨骨折模型,将FG复合物应用于实验组和空白对照组的胫骨骨折处,在术后2、4、8、12、16周,测定骨折处周围软组织充血水肿消除时间、利用X射线影像学评价骨折愈合程度、测定骨折愈合部位的骨密度(BMD)及骨密度比率、骨痂体积,测定胫骨生物力学强度并进行统计和分析。实验组和对照组比较:术部红、肿、热消失时间显著缩短,术后各时间点的X射线影像学评分更高,术后各时间点骨痂更大,术后16周术部骨骼能承受的最大载荷和最大位移显著增大。结果表明FG联合rhBMP-2、bFGF与妥布霉素应用于骨折部位,可促进骨折愈合过程中软组织的生成,缩短骨折愈合的时间,提高骨生物力学强度。     

豆状带绦虫抗原的SDS-PAGE及Western-blot分析

为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶段的虫体中分离出5~12条主要蛋白区带,分子质量为25~114ku.以第7周自然感染家兔血清对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在42、57、63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.以家兔阳性血清中提取出来的IgG免疫球蛋白对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.说明63ku蛋白带可作为预防兔豆状囊尾蚴病的候选疫苗抗原.试验初步阐明了豆状带绦虫7种不同抗原的部分生化特性,为对该抗原的进一步深入研究奠定了基础.     

纤维蛋白粘合剂对犬皮肤切口透明质酸和羟脯氨酸含量的影响

为探讨自制纤维蛋白粘合剂的作用机理,将其应用于犬皮肤切口,并以常规手术缝合切口为对照进行体内粘接效果对比试验。选取健康犬20只,随机分为缝线组与粘合剂组,分别采用丝线和自制纤维蛋白粘合剂闭合皮肤切口,测定皮肤切口中的透明质酸（HA）和羟脯氨酸（HYP）含量。结果表明,愈合过程中,粘合剂组HA含量在术后2d呈一过性升高,HYP含量在术后2d后持续升高,8d含量达到最高值,与缝线组比较差异显著（P〈0．05）。     

纤维蛋白胶应用于犬自体网状皮片移植效果的观察

为探究纤维蛋白胶(fibrin glue,FG)应用于犬自体网状皮片移植术中的效果,选取15只犬作为试验动物,于两前肢建立3 cm×4 cm的全层皮肤缺损模型,以胸背部作为供皮区,将纤维蛋白胶应用于网状皮片移植术中,以单纯网状皮片移植为对照,于术后第3、5、7、14、28天随机选取3只进行大体观察和移植皮片局部观察,并制备石蜡切片进行组织学观察。皮片局部观察结果显示,试验组红肿、渗出较对照组轻微,炎性反应期短;术后28 d,所有皮片生长良好,试验组线性瘢痕较对照组轻。组织学观察结果显示,试验组较对照组炎性细胞的浸润期短,胶原纤维排列规则,皮肤附属结构完整。结果表明,纤维蛋白胶可缩短创面炎性反应期,增强局部组织修复能力,减少瘢痕的过度增生,可使成活后的移植皮片结构和功能更接近正常皮肤。     

学分制模式下动物医学专业实践教学模式初探

动物医学是一门实践性很强的专业,实践教学在整个人才培养方案中占有极大的比重。本文通过对在不完全学分制模式和经费有限的情况下,针对动物医学专业实践教学的特点,对实践教学存在的问题进行了分析;并从修订教学计划、建立实践教学监控体系、改革实验教学模式、改革实践教学内容和教学方法、全面建立本科生导师制等方面进行了探讨,以提高动物医学专业人才的培养质量,满足社会对复合型人才的需求。     

β-TCP与EGF复合物对犬胫骨骨缺损修复作用的研究

为研究β-磷酸三钙(β-TCP)与表皮生长因子(EGF)复合物对犬胫骨骨缺损的修复作用,在30只试验犬双侧后肢建立犬胫骨骨缺损模型,右侧为试验组,左侧为对照组。试验组填充β-TCP与EGF复合物,对照组不填充任何材料。分别于术后第1、2、4、6、8、12周随机选取5只犬,进行X线拍摄、组织学观察、骨钙素(OC)和骨特异性碱性磷酸酶(BSAP)检测。结果表明:试验组较对照组骨痂形成早,骨基质和胶原纤维沉淀量多,骨小梁形成与改建快,先达到骨改建期。前6周,与对照组相比,试验组OC和BSAP水平显著升高。这一研究提示β-TCP与EGF复合物在骨缺损修复早期可为细胞因子建立良好的生长环境,促进细胞增殖、黏附、趋化、分化以及骨末端血管生长和形成,从而有效促进犬胫骨骨缺损的修复。     

纤维蛋白粘合剂在犬小肠端端吻合术中对吻合口Hyp、VEGF与bFGF含量的影响

为探讨纤维蛋白粘合剂(FG)在犬小肠端端吻合术中对吻合口处羟脯氨酸(Hyp)、血管内皮生长因子(VEGF)与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量的影响,将30只试验犬随机分为试验组和对照组两组,试验组采用简易缝合配合纤维蛋白粘合剂,对照组采用常规手术肠线缝合;分别于术后第3、5、7、14和28天每组随机选取3只测定吻合口处Hyp、VEGF与bFGF的含量。术后试验组Hyp含量在第5天显著高于对照组(P0.05),bFGF的含量在第3天、第5天、第7天显著高于对照组(P0.05),VEGF含量在第3天和第5天高于对照组(P0.01),在第14天和第28天显著低于对照组(P0.01)。结果表明,应用简易缝合配合纤维蛋白粘合剂吻合肠管,可促进吻合口处小肠组织内羟脯氨酸、血管内皮因子和碱性成纤维细胞生长因子的分泌,从而加速吻合口的愈合。     

关于动物医学专业临床实践教学模式的探讨

猪传染性胃肠炎是一种急性胃肠道传染病,其病原为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)。该病临床症状主要表现为病猪呕吐伴有严重的腹泻,直至脱水死亡。不同品种与年龄段的猪只都有易感性,对成年猪的危害性相对较小,但是对于2周龄内的哺乳仔猪具有较大的危害性,其死亡率高达100%,严重影响养猪业的健康发展。主要对猪传染性胃肠炎的诊断与防治措施进行了简要阐述,旨在提高养殖户对该病的防范,最大程度上避免因此病发生而造成严重的经济损失。     

辛伐他汀通过激活p38MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖的研究

为研究辛伐他汀通过激活p38MAPK信号通路对小鼠胚胎成骨前体细胞(MC3T3-E1)增殖的影响,将试验分为2个部分:①将辛伐他汀作用于MC3T3-E1细胞,设置不同的辛伐他汀浓度和作用时间,采用pNPP、CCK8方法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性并得到辛伐他汀对MC3T3-E1细胞增殖作用的最适浓度和最佳培养时间.②设3个试验组,即空白对照组、辛伐他汀组、辛伐他汀+p38抑制剂组,在辛伐他汀最适浓度和最佳培养时间的条件下,采用CCK8、pNPP、ELISA、Western blot方法检测各组细胞活力、碱性磷酸酶活性、分泌Ⅰ型胶原蛋白(COL-I)含量以及p-p38表达水平.结果表明:与空白对照组相比,当辛伐他汀浓度为10-5 mol·L-1、培养时间为36 h时,MC3T3-E1细胞的增殖作用较为明显;空白对照组与辛伐他汀组相比,后者ALP活性和p-p38蛋白表达水平明显增高,Ⅰ型胶原蛋白分泌增多;辛伐他汀组与辛伐他汀+p38抑制剂组相比,后者ALP活性和p-p38蛋白表达水平明显降低,Ⅰ型胶原蛋白分泌减少.综合而言,辛伐他汀可通过激活p38MAPK信号通路促进MC3T3-E1的增殖,提高ALP活性和增加COL-I分泌.