蝉棒束孢交配型基因MAT的群体分布特征

【目的】探明药用真菌蝉棒束孢Isaria cicadae的交配型基因MAT的群体分布特征及其对蝉花 有性生殖的影响，为提高蝉花的生殖率提供参考。【方法】从全国7省12市采集的100份蝉花标本中分离培养菌种，经形态观察、显微鉴定和ITS序列分析，获得各蝉花的无性型菌株；从各菌株DNA中克隆并分析MAT1-1-1和MAT1-2-1序列的结构和分布特征。【结果】在100株菌株中，13株菌株仅有1MAT1-1-1，79株菌株仅有MAT1-2-1，8株菌株兼有2个序列。2MAT1-1-1（缺HMG ɑ-box）极少与1MAT1-1-1共存，常与MAT1-2-1伴存，但FJDH7和FJDH9菌株同时存在1MAT1-1-1、2MAT1-1-1和MAT1-2-1序列。聚类分析未发现MAT基因的地域分布相关性。【结论】群体中不同蝉棒束孢菌株的MAT基因有4种可能，兼有3种序列菌株的检出率极低，推测与蝉花有性生殖概率极低的现状有关。     

红曲霉过表达orf5基因对洛伐他汀含量的影响

为研究红曲霉过表达orf5基因对洛伐他汀含量的影响，丰富洛伐他汀代谢调控机制。用ATMT和REMI法将gus-orf5融合基因转化红曲霉，并对ATMT法的共培养条件和REMI法的内切酶进行优化筛选，对获得的潮霉素抗性菌株进行GUS染色和PCR鉴定，并检测阳性菌株的洛伐他汀含量变化。结果筛选出20μg/mL潮霉素的培养基作为转基因红曲霉的抗性筛选浓度，补充1/10 LB的Co-IM共培养基有利于ATMT法转化，在REMI法中Xba I介导的转化效果较好。用ATMT和REMI法均获得抗性菌落，经PCR检测表明orf5和hyg基因均已导入红曲霉，GUS染色呈蓝色。过表达菌株的洛伐他汀含量比对照明显提高，高达36.89%。红曲霉过表达orf5有利于增加洛伐他汀的积累，为深入研究红曲霉orf5基因的功能提供参考。