红曲霉过表达orf5基因对洛伐他汀含量的影响

为研究红曲霉过表达orf5基因对洛伐他汀含量的影响，丰富洛伐他汀代谢调控机制。用ATMT和REMI法将gus-orf5融合基因转化红曲霉，并对ATMT法的共培养条件和REMI法的内切酶进行优化筛选，对获得的潮霉素抗性菌株进行GUS染色和PCR鉴定，并检测阳性菌株的洛伐他汀含量变化。结果筛选出20μg/mL潮霉素的培养基作为转基因红曲霉的抗性筛选浓度，补充1/10 LB的Co-IM共培养基有利于ATMT法转化，在REMI法中Xba I介导的转化效果较好。用ATMT和REMI法均获得抗性菌落，经PCR检测表明orf5和hyg基因均已导入红曲霉，GUS染色呈蓝色。过表达菌株的洛伐他汀含量比对照明显提高，高达36.89%。红曲霉过表达orf5有利于增加洛伐他汀的积累，为深入研究红曲霉orf5基因的功能提供参考。