进境澳大利亚油菜籽中茎基溃疡病菌的检测

 41 fungal isolates with similar morphological characteristics to Leptosphaeria maculans were obtained by the deep-freezing filter paper method from 2100 seeds of Brassica napus imported from Australia.The isolate 8129-5 showed a slower growth on PDA at 20℃with growth rate of 2.8 mm/day.The colonies on PDA at 20℃ had an irregular or regular margin with white or grayish white compact aerial mycelium.No diffusible pigment was produced on PDA at 31℃ or in liquid Czapek-Dox media at 20℃.PCR detection showed that the isolate 8129-5 could be amplified by L.maculans-specific primers LmacF/LmacR and got expected product of 331 bp.The sequence analysis revealed that the ITS sequence of isolate 8129-5 had 99.8% identity with L.maculans.Pathogenicity of the isolate 8129-5 was confirmed on cotyledons of rape seed by artificial inoculation compared with typical symptom of L.maculans.Based on the morphological characteristics, PCR detection and the result of pathogenicity test, the isolate 8129-5 was identified as L.maculans.     

免疫捕获PCR检测进境苹果果实中梨火疫病菌

利用梨火疫病菌抗体和PCR技术建立了梨火疫病菌免疫捕获PCR方法,检测苹果模拟样品的灵敏度达到了1.5×102cfu/reaction。与直接PCR进行比较,免疫捕获PCR方法检测苹果模拟样品的灵敏度提高了10倍以上,而且省去了DNA提取等步骤。利用该方法成功从进境苹果样品中检测到梨火疫病菌,产物测序结果表明,产物序列和梨火疫病菌的相应序列高度一致。试验结果表明,免疫捕获PCR法能除去样品中的大部分PCR反应抑制物质,可以有效检测进境苹果中梨火疫病菌,在口岸水果检疫中具有一定的应用潜力和推广价值。     

蜂毒溶血肽（melittin）基因的克隆及序列分析

本项研究已克隆在λｇｔ１１载体上的编码蜂毒溶血肽２６个氨基酸的基因经酶切后，亚克隆到大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ的质粒ｐＵＣ １８的ＥｃｏＲＩ和ＰｓＩ位点上，构建成重组质粒ｐＵＭ１８，然后转化感受态的大肠杆菌ＪＭ１０１之中。经对转化子中重组ｐＵＭ１８上蜂窝溶血肽基因的ＰＣＲ扩增检测和序列分析，表明克隆成功。     

吴淞口岸出境货物木质包装熏蒸监管问题及对策

出入境货物的熏蒸监管 ,是目前口岸检验检疫工作一项重要任务。自美国、加拿大对我出口货物的木包装实施新的检疫措施以来 ,吴淞口岸出境货物木包装的熏蒸业务量急剧上升 ,对其监督管理也就成为我们工作的重点。1　出境货物木包装的熏蒸及其监管概况吴淞口岸木质包装的熏蒸分为木质包装单独熏蒸和木包装与货物一起熏蒸两种情况 ,目前仍以后者为多 ,而前者有上升趋势。熏蒸处理的方式主要有集装箱熏蒸、帐幕熏蒸、整仓密闭熏蒸等 ,其中又以集装箱熏蒸为主。从数量上看 ,在 1 998年美国、加拿大等国对我出口货物木包装提出新的检疫要求以前 ,…     

利用小RNA深度测序技术从新疆葡萄上检出8种病毒

正Kreuze et al(.2009)发现病毒特异的小RNA(small RNA,sRNA)为多拷贝的重叠序列,推测可通过深度测序技术获得病毒的大量sRNA序列,经拼接和比对分析后能高效鉴定病毒种类。目前,利用sRNA深度测序技术已在作物和昆虫上发现多种病毒(Liu et al.,2011;He et al.,2015)。2013年本课题组在葡萄病害调查过程中发现,伊犁州部分地区的葡萄在种植4~5年后,叶片黄化、变小,整个植株矮化,座果     

应加强入境船舶的植物检疫

口岸检验检疫部门对来自动植物病虫害疫区的国际航行船舶的厨房、配餐间、储藏室、食品舱等植物产品存放、使用的场所和部位实施现场检疫,这是目前国际航行船舶入境检验检疫(简称船检)业务的一个重要方面.     

进境风信子种球中菊基腐病菌的鉴定

从荷兰进境风信子种球带有典型软腐症状的样品上分离到1株细菌分离物5093-1,对该分离物进行菌落形态特征观察、致病性测定、过敏性反应测定、16S序列分析和Biolog测试。结果表明:该分离物人工接种风信子种苗、马铃薯薯块和蝴蝶兰均能引起腐烂反应,也能引起烟草过敏性坏死反应,16S序列和菊基腐病菌的序列相似性为99.6%,Biolog测试结果为菊基腐病菌。根据试验结果将分离物5093-1鉴定为菊基腐病菌。     

集装箱溴甲烷熏蒸散气速率的初步研究

集装箱溴甲烷熏蒸散气速率的试验研究表明：集装箱熏蒸后残余溴甲烷的浓度和散气时间、货物的吸附、集装箱内货物的容量有关,与温度、天气状况以及不同规格集装箱关系不显著;通过自然散气8h和3周左右的航行时间就能到达残留低于5ppm（20mg/m3）的要求,但对于装载溴甲烷气体强吸附性的货物、用塑料袋包裹的货物或集装箱装载量过满的货物,应延长散气时间或采取机械协助通风来控制残余气体浓度.     

美国进境樱桃果实中梨火疫病菌的检测

为了筛选快速、灵敏的梨火疫病菌检测方法,利用常规PCR、套式PCR和实时荧光PCR方法分别对美国进境的326批樱桃果实中梨火疫病菌进行检测。结果显示,3种PCR方法的检出率不同,不同引物或探针的检出率也存在差异。在常规PCR中,引物Ams3/Ams4c、P29A/P29B和PEANT1/PEANT2的检出率分别为35.28%、24.85%和16.87%;单管套式PCR和套式PCR的检出率分别为23.01%和50.61%;4种实时荧光PCR的检出率分别为17.48%(探针PA)、32.21%(探针Ams)、29.14%(探针ITS)和23.93%(SYBR GreenⅠ)。在所有试验方法中由引物P29A/P29B和PEANT1/PEANT2组成的套式PCR的检出率最高。检测结果证实了进境樱桃果实中存在梨火疫病菌DNA,套式PCR和常规PCR(引物Ams3/4c)可用于进境樱桃样品中梨火疫病菌的常规检测。