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1.
【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104(WT)为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系(ZmIBH1-1-OE);通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理(20% PEG6000),进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因(differentially expressed genes,DEGs);结合DAP-seq(DNA affinity purification sequencing)分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV(integrative genomics viewer)分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T3代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T4代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标(超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性)均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology(GO)功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。 相似文献
2.
为探明长江中游玉米籽粒机械直收适宜品种与配套农艺措施,2018—2019年选用不同玉米品种,测定不同机收时间下玉米关键农艺性状、产量及机收质量指标。结果表明,收获时间对春玉米机收产量与机收质量均有显著影响。延迟1周收获后籽粒容重显著增加,机收产量显著提高,2年平均提高9.72%;而延迟2周收获则有降低机收产量的趋势。2年收获时杂质率总体≤3%,而机收籽粒破碎率与损失率均>5%,是该区域春玉米籽粒机收面临的主要问题。籽粒厚度、籽粒含水率和百粒重是影响机收籽粒破碎率的关键性状,三者与机收籽粒破碎率均呈显著的倒二次曲线关系;玉米的倒伏率、穗位高和重心高度是影响机收损失率的关键性状,倒伏率与机收损失率呈显著正相关,而穗位高和重心高度与机收损失率均呈显著的二次曲线关系。延迟收获能显著降低籽粒含水量,从而降低籽粒破碎率,但继续延迟收获有增加倒伏的风险。综上,长江中游春玉米成熟后适时延迟7~10 d收获,可有效降低籽粒含水量与机收籽粒破碎率,提高玉米籽粒机收产量。 相似文献
3.
目前非洲猪瘟疫情在全国诸多省份均有发生,至今国内外尚无有效疫苗以及兽药,因此非洲猪瘟的预防、控制以及生物安全管理尤为重要。 相似文献
4.
2003年1月9日 ,农业部副部长齐景发在全国农业工作会议畜牧饲料专业会议上作了讲话。他肯定了2002年的工作 ,认为是畜牧饲料工作大丰收的一年。他认为2003年的畜牧饲料工作是光荣而且艰巨的。他要求各级畜牧饲料部门要紧紧围绕行业增效、农民增收的发展目标 ,按照十六大精神 ,努力做到与时俱进 ,发展要有新思路 ,改革要有新突破 ,开放要有新局面 ,各项工作要有新举措。畜牧、兽医、饲料、草原 ,每项工作都举足轻重 ,各项工作都不能一般化。对优势畜产品区域布局工作、动物防疫工作、畜产品安全工作、草原法贯彻工作、职能转变和队伍建设工作… 相似文献
5.
2002年 ,河北省共立案查处兽药违法案件261起 ,没收假劣兽药和禁用兽药上万件 ,案值400多万元 ,取缔无证经营兽药摊点122个 ,撤销兽药经营许可证67个、兽药生产许可证11个。全年省、市两级抽检兽药产品4898个批次 ,兽药残留监测2237批次 ,产品合格率比2001年提高了11 5个百分点。其主要做法是 :一、明确指导思想以《兽药管理条例》等法规、规章为依据 ,以科学的监督检验手段为依托 ,以保护畜牧业发展和动物产品安全为目的 ,以查处违禁药品 ,打击生产经营和使用假劣兽药、无证生产为重点 ,强化监督职能 ,建立健康、有序的兽药市场秩序。二、… 相似文献
6.
7.
随着社会主义市场经济发展,渔业生产已由数量增长型向质量效益型转变,不能再走以牺牲环境、危害人类健康为代价的劣夺性渔业之路,已成为人们的共识。在渔业数量型发展阶段,多品种集约化养殖所引起的水生生物病害问题已超出人们的想象,以致于发展到难以控制的局面,甚至发展到了“养什么病什么、病什么就死什么”的地步,几乎所有的养殖品种都受到病害的困扰。诸如淡水养殖品种甲鳖的白底板病、河蟹颤抖病、鳗鱼的狂游症、罗氏沼虾的白体病、牛蛙的红腿病, 相似文献
8.
根据不断对有关知识的学习,特别是对《蜜蜂杂志》这一良师益友多年的学习、钻研,使我提高了蜂胶对蜂巢环保作用的认识。我们试验用人工补给蜂胶的办法,一年多来蜂场蜜蜂发病率有了明显的下降,减少用药开支,增加了经济收入。其做法是:把收集来的原料蜂胶,经冷冻后粉碎,与明胶(食品添加剂,门市有售,价格也低)按1∶2的比例进行乳化,制成无醇蜂胶液,对10~15倍的水稀释,每月结合检查蜂群,用手提喷雾器对巢箱内壁四周、框梁、副盖、覆布均匀喷洒2~3次;病群可多次。对蜂胶气味,蜜蜂很兴奋,非常乐意接受。这样,可帮助蜂巢整体构筑更加完善的环保屏… 相似文献
9.
红松阔叶混交林是长白植物区系顶级群落,由于长期受到人为采伐等非自然因素的干扰,现存量极少,代之形成了大面积红松、落叶松纯林和生产力低下的杂木林。红松人工纯林由于树种单一,导致林分的土壤肥力逐年下降。近年来,通过营造阔叶红松混交林、人工诱导阔叶红松林等措施,培育了大面积红松阔叶混交林,其中色赤杨与红松混交林是较为成功的一种混交林分,现将草河口地区红松与色赤杨混交林改土效果总结如下。 相似文献
10.
拖拉机是大家非常熟悉的农用机械,我国也是拖拉机的使用大国.然而近几年来.拖拉机使用故障频繁发生,严重影响了拖拉机的寿命,阻碍了农村经济的发展为使拖拉机经常处于良好的技术状态,必须设法防止和减少故障的发生.除坚持按照使用说明书的规定维护保养外,在农闲时期的保养与维护也是预防拖拉机发生故障的重要措施之一. 相似文献