雄性不育基因对棉花的遗传转化

利用TA29、A6、A9三启动子功能区与barnase基因融合构建的不育基因以农杆菌介导法对棉花下胚轴进行了遗传转化,通过胚状体途径获得了转基因再生植株.利用150 mg·L-1高浓度卡那霉素(Km)对转化初期筛选出的再生苗进行再次筛选,提高了转化株的选出率.通过PCR检测和Southern dot blot分析从转基因胚状体再生植株中获得了带有barnase不育基因的120株转基因植株.进行转基因植株生物学性状检测和观察表明,所获得的转基因植株对溴苯腈表现出了明显的抗性,并从不育基因转化植株中筛选出了具有明显不育特征的雄性不育株.     

草莓果实特异表达基因annfaf在E.coli中的表达及抗血清的制备

将草莓(Fragaria ananassa Duch．)果实中特异表达的膜联蛋白基因annfaf的cDNA连接重组到pET-30a质粒中，构建了融合和非融合蛋白表达载体。annfaf基因转化大肠杆菌(E.coli)后以包含体形式得到了高效表达，同时研究了annfaf基因表达的影响因素。实验结果表明，最佳培养温度是37℃，培养时间为4h，当培养液中加入利福霉素时可明显提高表达量中目的蛋白的含量。SDS—PAGE检测表明该蛋白分子量为35kD，与目的蛋白相同。以表达的蛋白作抗原免疫家兔，制备了抗Annfaf蛋白的抗血清。ELISA检测及Western印迹表明，制备的抗血清可与其免疫抗原发生特异的免疫学反应，且具有较高的效价。该实验结果为进一步研究Annfaf蛋白在草莓果实细胞中的定位及其生理功能奠定了基础。     

NPTII标记转基因棉花再生株的延其筛选

新霉素磷酸转移酶(Neomycin Phosphotransferase Ⅱ,NPTⅡ)基因是迄今植物遗传转化中应用最为广泛的选择标记.该基因编码新霉素磷酸转移酶亦称氨基糖苷-3＇-磷酸转移酶(aminoglycoside-3'-phosphotransferase Ⅱ),其编码产物可使氨基糖苷类抗生素(aminoglycoside angibi-otics)如卡那霉素(kanamycin,Km)、新霉素(neomycin)、G418等磷酸化而失活.卡那霉素等氨基糖苷类抗生素能与植物细胞叶绿体和线粒体中的核糖体30S小亚基相结合,影响70S起始复合物的形成,干扰叶绿体及线粒体的蛋白质合成,从而导致植物细胞死亡.     

草莓果实特异表达基因annfaf 在E. coli 中的表达及抗血清的制备

摘要：将草莓?穴Fragaria ananassa Duch. ?雪果实中特异表达的膜联蛋白基因annfaf的cDNA连接重组到pET-30a质粒中，构建了融合和非融合蛋白表达载体。annfaf 基因转化大肠杆菌(E. coli )后以包含体形式得到了高效表达，同时研究了annfaf基因表达的影响因素。实验结果表明, 最佳培养温度是37 ℃ ，培养时间为4 h，当培养液中加入利福霉素时可明显提高表达量中目的蛋白的含量。SDS-PAGE检测表明该蛋白分子量为35 kD，与目的蛋白相同。以表达的蛋白作抗原免疫家兔，制备了抗Annfaf蛋白的抗血清。ELISA检测及Western印迹表明，制备的抗血清可与其免疫抗原发生特异的免疫学反应，且具有较高的效价。该实验结果为进一步研究Annfaf蛋白在草莓果实细胞中的定位及其生理功能奠定了基础。     

核桃举肢蛾的观察与防治

核桃举肢蛾又核桃黑,在我省汾阳、孝义、左权等核桃产区均有发生,而且有逐年加重的趋势。为此,我们于1987年开始,在左权县拐儿镇对该虫进行了调查和防治。核桃举肢蛾一年发生一代,以老熟幼虫在树冠下的土石块中结茧越冬,也有在干基部皮缝中越冬的。越冬幼虫化蛹期为6月上旬,蛹期7天左右。成虫羽化盛期在6月中     

拟南芥花药特异启动子启动的Barnase基因在烟草中的表达

为探明植物基因工程雄性不育温度敏感性的影响因子，以拟南芥（Arabidopsis thaliana)WS生态型基因组DNA为模板，PCR扩增后分别得到0.78kb的A6和0.3kb的A9基因5'旁侧区DNA片段。将其分别与核糖核酸酶Barnase基因融合，导入含有抗溴苯腈（Bxn)基因的植物双元表达载体构建成pWPA6N和pWPA9N，并经根癌农杆菌（Agrobactrium turmefaciens)LBA4404介导获得转基因植株。生物学观察表明，转基因植株表明出了明显的转化不育性状，如花丝变短，花药瘦小等，说明A6，A9两5'启动子片段都在烟草（Nicotiana abacum)花药中定位启动了Barnase的表达，另经高温敏感性测试均可见育性恢复现象,这初步表明雄性不育植株的高温不稳定性由启动子造成的可能性较小。     

草莓annfaf基因反义融合表达载体构建及转基因植株的获得

 【目的】建立研究草莓果实膜联蛋白基因annfaf功能体系。【方法】利用反义基因技术将从草莓成熟果实中分离克隆的annfaf基因定向克隆至植物中间表达载体pROKⅡ，构建了annfaf反义融合基因植物表达载体pRRJ4，通过根癌农杆菌EHA105将其导入草莓基因组。对获得的抗性植株进行PCR和Southern检测分析。【结果】表明该反义基因已整合到草莓基因组中。【结论】可进一步筛选annfaf基因表达缺陷型植株，用于探讨annfaf在非跃变型果实草莓成熟中的调控作用，为培育草莓新品种提供中间材料。     

梨花药、子房培养研究简报

本文报道了梨花药及子房培养的试验结果,获得了较高的愈伤组织诱导率(85％),得到了子房培养中的分化芽,并对不同材料的激素反应进行了分析。     

肉灌制品卫生管理的措施

哈尔滨市对肉灌制品卫生管理是在对前些年进行详细的调查的基础上针对存在的主要问题,采取了相应严格管理的措施。经过几年的努力取得了比较满意的效果。肉灌制品合格率由原来的27.3％,提高到85％。 1 肉灌制品卫生管理存在的主要问题 1.1 肉灌制品加工中存在的问题 有些厂家工艺流程不合理。厂房狭小,设备落后,从业人员学法、守法的意识淡薄。 肉源管理混乱,来源广泛,使用未经兽医检疫的肉或兽医检疫不合格的肉加工肉灌制品的现象时有发生,使病害肉流入市场。 使用添加剂时未严格执行国家标准,硝的使用量控制不严:有的滥用色素,如胭脂红,柠檬黄等。使用乳化剂     

植物寄生线虫分子生物学和抗线虫基因工程策略的研究进展(综述)

植物生物技术的发展以及植物和寄生线虫之间相互作用机制研究的逐步深入,为利用基因工程方法防治线虫病毒提供了许多新的策略。一于奶部的栖居型线虫会 导根部产生特异性取食结构,会在此完成发育、繁殖等生活史。同时被线虫感染的根部几天后取食位点细胞编码同线虫取食相关的酶或蛋白基因被激活,而其它基因表达则被抑制甚至关闭。本文对有关抗线虫基因的克隆,利用基因工程手段获取抗筢破坏线虫侵入、取食和繁殖等生活史中的几个