一株纤维降解菌β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达及酶学性质分析

试验对1株娄彻氏链霉菌(B5)的β-葡萄糖苷酶(高活性纤维降解酶)基因进行克隆,通过构建高效表达的载体实现基因表达,对所得表达产物的酶学性质进行测定分析,为饲用纤维素酶的开发利用提供参考。通过PCR扩增B5的Egl基因的完整CDS序列,构建pET-32a-egl表达载体,转化到BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞。试验成功构建了高产β-葡萄糖苷酶的基因工程大肠杆菌,实现了β-葡萄糖苷酶的分泌表达,其分子量约4.1×10-4 U,酶学特性分析表明,在40℃、pH值8、底物浓度为3.0×10~(-2) mol/L时,酶活力最高,为1 085 U/mL。     

奶牛瘤胃微生物及其代谢物与乳脂合成关键酶基因对乳脂率的影响

乳脂肪对于人类的健康有着重要的生理作用,乳脂率的高低决定牛乳的品质、风味和营养价值,所以乳脂率对牛乳品质十分关键。奶牛乳脂率的高低受到多种因素的影响,如何提高奶牛乳脂率一直是行业研究的热点。大量研究表明,瘤胃微生物及其代谢产物与乳脂合成关键酶基因对奶牛乳脂率的高低具有重要调控作用。文章就瘤胃微生物及其代谢物与乳脂合成关键酶基因如何影响奶牛乳脂率的研究进行综述,为进一步探索乳脂合成机制,进而改善奶牛乳脂率提供新的思路。     

一株纤维素降解菌的筛选、鉴定及对饲料粗纤维降解效果的研究

通过筛选高活性纤维素酶产生菌,为微生物纤维素酶制剂的开发提供理论依据。采用刚果红染色法从绵羊粪便中分离筛选纤维素降解菌,用DNS法测定酶活力,根据酶活力复筛后,分离得到一株能够产生高活力纤维素酶和β-葡萄糖苷酶的目的菌B5。通过形态学观察和16S rDNA序列测定,对B5菌株进行种属鉴定;应用B5菌株对四种纤维性饲料进行消化降解实验,探究菌株B5降解饲料粗纤维的特性。形态学观察确定B5菌落符合放线菌的特征;分子学鉴定其16S rDNA序列全长1 585 bp,在进化关系上与链霉菌属(Streptomyces sp.)聚成一簇,同源性高达99%。鉴定B5菌株属于链霉菌属成员。B5菌株对饲料粗纤维降解效率与酶活力显著相关,对饲料粗纤维降解效率与饲料中纤维素含量相关性不明显。     

洗涤温度对饲料粗纤维测定结果的影响

GB/T 6434—1994仲裁法中对粗纤维含量的测定中规定两次过滤都用沸蒸馏水进行洗涤,然而实际工作中过高的温度持续操作是很不方便的。若改用室温蒸馏水洗涤,对测定结果是否有影响?可否采用室温的试液洗涤?本实验通过用室温蒸馏水洗涤及国标规定的沸蒸馏水洗涤,分别测定饲料原料及饲料产品中的粗纤维含量。结果证明两种洗涤温度对样品中的粗纤维含量的影响差异不显著(P>0.05);可采用室温蒸馏水进行洗涤,方便操作,简化程序。GB/T 6434—1994虽已不用,而改用GB/T 6434—2006,但在洗涤试剂的温度上未作改动,故此对比实验对新标准仍有探讨价值。     

不同贮存条件对富含PUFA鸡蛋品质的影响

为了解不同贮存温度和时间对富含多不饱和脂肪酸(PUFA)鸡蛋品质的影响,收集饲喂6种日粮的41周龄海兰褐蛋鸡所产蛋,每组40枚,随机均分为2份,分别放置于室温和4 ℃冰箱,在保存0、15、30、60和90 d时各取4枚测定鸡蛋失重率、比重和蛋黄丙二醛(MDA)含量。结果表明:与对照组相比,富含PUFA鸡蛋在贮存过程中失重率、比重和蛋黄MDA含量无显著差异( P >0.05);鸡蛋室温与4 ℃贮存相比3个指标差异极显著( P <0.01),室温贮存失重率是4 ℃贮存的3倍左右,且失重率与贮存时间呈显著正相关;鸡蛋室温贮存比重下降大于4 ℃贮存,且比重与贮存时间呈显著负相关;室温贮存蛋黄MDA含量均高于4 ℃贮存( P <0.05),各组蛋黄MDA含量随贮存时间延长呈显著正相关增加趋势。研究揭示,富含PUFA鸡蛋在储存过程中失重率、比重和蛋黄MDA含量变化与普通鸡蛋无差异;鸡蛋室温贮存15 d或4 ℃贮存30 d仍为鲜蛋,4 ℃贮存优于室温贮存。     

不同月龄红河黄牛血液生化和免疫指标分析

为明确放养条件下红河黄牛的营养和免疫状况，选取60头红河黄牛，公母各半，按性别和年龄（12、36和60月龄）分成6个组，颈静脉采血分离血清，测定生化和免疫指标。结果显示：①相同性别的黄牛血清总蛋白（TP）和球蛋白（GLOB）含量12月龄显著低于60月龄（P<0.05），母牛碱性磷酸酶（ALP）活性和血糖（GLU）含量12月龄显著高于60月龄（P<0.05），其他血清生化指标在不同月龄间均无显著差异（P>0.05）。公、母牛血清TP和GLOB含量均随月龄增加而升高，而ALP活性随月龄增加而降低。不同月龄母牛血清TP、白蛋白（ALB）、GLOB含量和谷丙转氨酶（ALT）活性均高于公牛（P<0.05）；而ALP活性和GLU含量公牛高于母牛（P<0.05）。②除母牛血清IL-8在12和36月龄间存在显著差异（P<0.05）外，相同性别的黄牛血清白细胞介素（IL）-2、IL-8、IL-10、免疫球蛋白（Ig） A、IgG、IgM、γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量在3个月龄间均无显著差异（P>0.05）。不同月龄母牛IL-2、IgA、IgG、IgM、IFN-γ和TNF-α含量均高于公牛（P<0.05）。综合以上结果，红河黄牛公、母牛随月龄增加，血清TP和GLOB含量显著增加，而ALP活性降低；母牛血清生化和免疫指标总体高于公牛。     

中缅边境猪群感染猪链球菌2型的病原特性初探

2016年10月中旬,在中缅边境多个猪场暴发以呼吸困难、关节肿胀、部分仔猪拉黄水样粪便,后期伴有神经症状、败血症而死为特征的传染病。为查明病因,对采集自病死猪只的全血、肺组织、脓包及脓汁于血琼脂上划线培养,对所获溶血性菌落采用革兰染色、生化试验、药敏试验和基于慢性病例血清的凝集试验做初步鉴定;随后用细菌16S rRNA基因通用引物扩增该菌株DNA片段,并对PCR扩增产物进行TA克隆及测序分析。结果发现,该菌株为革兰阳性球菌;葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、水杨苷、棉实糖利用试验呈阳性,山梨醇、七叶苷、马尿酸盐、甘露醇、65g/L NaCl、肌醇和触酶试验均呈阴性;对头孢噻肟、头孢哌酮、恩诺沙星和复方新诺明具有较高敏感性,对青霉素、阿莫西林、庆大霉素、环丙沙星等具有中度敏感性,但对四环素、多西环素、卡那霉素、新霉素、氟苯尼考、阿米卡星、林可霉素等药物具有较强耐药性;凝集试验呈阳性且血清抗体效价为1∶256;PCR扩增出约1 500bp的单一条带,其核酸序列与猪链球菌(Streptococcus suis)第1核酸序列型(ST1)同源性最高(达99%),据此判定为猪链球菌2型。鉴于被调查猪群曾接种猪链球菌2型灭活疫苗,试验结果表明,当地猪群发生多重耐药性猪链球菌2型的跨境传播与感染,提示应加强对该菌抗原性、致病性及耐药性改变的监测及严格控制猪群的跨境流动。     

对云南省不同来源生鲜乳品质的比较分析

本试验旨在通过对不同来源生鲜乳的相关指标进行测定和比较分析,评价其品质,为地方奶牛养殖业的发展提供参考依据.采集2017-2020年云南省养殖专业合作社、乳品公司养殖场、收购站和机械化挤奶站4种来源的生鲜乳共661个样品,采用国家标准方法测定其相关指标,用SPSS 22.0统计软件做单因素方差分析.结果显示,2017-...     

利用DHI数据分析季节和胎次对陆良县奶牛乳品质的影响

试验旨在利用DHI数据分析季节和胎次对乳品质的影响,从而科学有效地指导奶牛养殖企业的饲养管理。试验收集整理陆良新希望雪兰奶牛养殖有限公司2019年—2021年荷斯坦奶牛的DHI测定数据,应用Excel 2010进行数据处理,SPSS 22.0进行方差分析,对奶牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖、总固体含量、体细胞数和尿素氮进行统计和比较分析。结果表明：季节对奶牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖、总固体含量和尿素氮均具有显著影响（P<0.05）,对乳蛋白率和乳糖的影响存在部分差异显著（P<0.05）。奶牛产奶量在夏秋季节较高;乳脂率和乳蛋白率均在冬季最高;乳糖在春夏季节较高;总固体在夏冬季节较高;尿素氮在冬春季节较高。胎次对奶牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖、总固体含量和尿素氮均具有显著影响（P<0.05）。奶牛产奶量在3～5胎次较高;乳蛋白率、乳糖和总固体含量均在1、2胎次较高;乳脂率在2、3胎次时较高;尿素氮在2、4胎次时较高。季节和胎次的交互作用对奶牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖、总固体含量、体细胞数和尿素氮均具有显著影响（P<0.05）。奶牛产奶量在夏秋季节...