公猪试情对母猪发情征兆的影响

评述了公猪试情和公猪与母猪接触的不同时机对断奶母猪发情的启动及发情征兆的影响。有证据表明公猪试情能影响母猪LH的释放,卵泡发育的启动和断奶后的定时发情。公猪与母猪接触的不同时机和频度对诱发母猪发情的效果有显著的差异。     

山楂叶黄酮对产蛋后期种鸡蛋壳品质的影响

山楂叶黄酮（HF）是山楂叶提取物,具有抗氧化、抗炎和降血脂的作用。本试验旨在研究日粮HF对产蛋后期种母鸡蛋壳品质的影响。选取体重相近的60周龄健康种母鸡（栖岭草鸡）270只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复15只鸡。对照组（CON）饲喂玉米-豆粕型基础日粮（BD）,低剂量组（LHF）饲喂BD+30 mg·kg^-1 HF日粮,高剂量组（HHF）饲喂BD+60 mg·kg^-1 HF日粮。试验预饲2周,正式饲喂8周,最后,采集种蛋测定蛋壳品质,采集血样测定钙和磷含量,采集壳腺组织观察组织形态学、细胞凋亡和抗氧化蛋白的变化。结果显示：1）与CON组相比,HF处理显著提高了蛋壳厚度和蛋壳强度（P<0.05）,对蛋黄颜色、蛋白高度、哈氏单位和壳腺的器官指数没有显著影响（P>0.05）。2）与CON组相比,HF处理显著提高了血清钙的含量（P<0.05）,显著上调了壳腺部CaBP-D28K、OPN和OC-116基因mRNA的表达水平（P<0.05）,HHF组壳腺部Ca²⁺ATP酶的活性显著提高（P<0.05）。3）组织学切片分析表明,HF处理显著降低了壳腺细胞的凋亡率（P<0.05）,并显著提高了壳腺部绒毛的长度和腺体的密度（P<0.05）。4）与CON组相比,HF处理组壳腺部MDA的含量显著降低（P<0.05）,HHF处理显著提高了GSH-Px酶的活性（P<0.05）。5）HHF组壳腺部KEAP1、p-NFκB/NFκB和Bax/Bcl2蛋白表达水平较CON组显著降低（P<0.05）;Nrf2、HO-1和PCNA蛋白的表达量则显著提高（P<0.05）。综上,日粮中添加60 mg·kg^-1的HF通过激活Nrf2/HO-1信号通路增强壳腺的抗氧化能力,改善细胞凋亡进程和钙离子转运能力,从而提高产蛋后期种鸡的蛋壳品质。     

甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成及增殖的影响

[目的]本试验旨在探究甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成功能以及增殖的影响。[方法]首先采用免疫组化法鉴定甲状腺素受体(TRα/β)在猪卵巢组织的表达情况,随后体外培养猪卵巢原代颗粒细胞,选取低(10-8mol·L~(-1))、中(10-7mol·L~(-1))、高(10-6mol·L~(-1))3种浓度的甲状腺素(T4)孵育24 h,采用酶联免疫法检测细胞培养液中孕酮(P4)和雌二醇(E2)水平,并采用蛋白印迹法检测颗粒细胞内激素合成相关酶蛋白(3β-HSD、CYP19)的表达情况。采用MTT法检测各浓度甲状腺素对细胞活力的影响,利用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫荧光染色验证不同浓度甲状腺素对颗粒细胞增殖的影响。[结果]免疫组化结果显示:TRα/β在猪卵巢不同发育阶段卵泡的颗粒细胞、膜细胞中有广泛表达,在卵母细胞的胞质中也有分布,在闭锁卵泡中也见明显表达。猪卵巢原代颗粒细胞经甲状腺素处理后,细胞培养液中的孕酮和雌激素水平都显著低于空白对照组(P0.05),并且各剂量处理组间孕酮呈现出剂量依赖性降低趋势;雌激素在低浓度和高浓度甲状腺素处理组较中浓度处理组高。蛋白免疫印迹结果显示:与对照组相比,3β-HSD和CYP19蛋白在较高浓度甲状腺素(10-7和10-6mol·L~(-1))处理组的表达量均显著降低(P0.05);而在低浓度甲状腺素(10-8mol·L~(-1))处理组,CYP19蛋白表达量显著降低(P0.05),但3β-HSD蛋白表达无显著差异。此外,MTT细胞毒性和增殖试剂盒检测结果显示:不同浓度甲状腺素处理并不影响细胞活力,这与PCNA免疫荧光强度统计结果一致,进一步证实了甲状腺素对原代颗粒细胞增殖没有影响。[结论]甲状腺素能够作用于卵巢颗粒细胞,干扰类固醇激素的合成,其作用机制可能是通过改变激素合成相关蛋白3β-HSD和CYP19的表达来完成的。而甲状腺素对颗粒细胞激素合成的干扰效应并不影响细胞增殖状态。     

酶免疫测定法检测粪便孕酮进行母猪早期妊娠诊断的研究

粪便中孕酮含量是判断母猪卵巢机能状态的重要指标,应用粪样孕酮酶免疫法可以对母猪进行早孕诊断。由实验结果可知,配种后母猪粪便中孕酮的含量超过150 ng/g粪样时,就可确认其妊娠;小于150 ng/g时,可确认其空怀。对164头配种后21～25 d的母猪进行了检测,早孕诊断的准确率为95.9%(138/146),空怀诊断的准确率为72%(13/18)。母猪粪便孕酮酶免疫法进行早期妊娠诊断有较高的临床适用性,对提高母猪繁殖率和猪场经济效益具有重要意义。     

前列腺素F2α调控母猪生殖的机制和应用思考

前列腺素F2α(PGF2α)是母猪黄体功能、子宫收缩、排卵和胚胎附着等方面的一个重要调节因子,对刺激子宫收缩和排空因分娩或感染产生的残余物有作用。在生产力较低的季节,如炎热夏天热应激条件下的母猪在人工授精过程中应用PGF2α已证明能够提高繁殖能力。PGF2α有诸多用于同期发情和诱导分娩的报道,激素类的应用是有严格条件限制的,激素滥用报废了很多母猪,在当前我国现场人员实际水平下,不宜提倡使用PGF2α这类生殖激素。     

母猪健康和闭锁卵巢有腔卵泡的转录组测序比较分析

[目的]本文旨在通过对猪卵泡颗粒细胞进行转录组测序了解卵泡闭锁相关基因的表达谱并确定闭锁卵泡的潜在分子标记物。[方法]通过HE染色对卵泡及颗粒细胞进行形态学观察；抽取健康卵泡和晚期闭锁卵泡的颗粒细胞，进行转录组测序分析，最后采用实时荧光定量PCR检测差异表达基因的相对表达水平。[结果]转录组数据表明，与闭锁卵泡颗粒细胞相比，健康卵泡颗粒细胞中有771个差异基因，其中204个为上调基因，567个为下调基因；GO功能富集分析显示，差异基因显著富集到320个生物进程中，主要与细胞增殖和血管生成有关；KEGG通路分析表明，差异基因富集到48条信号通路中，主要参与氧化应激、激素合成和能量代谢等方面的信号通路；实时荧光定量PCR结果表明，CYP1B1、PDE10A、NUPR1、NOX4、LDLR、LHCGR和CYP19A1表达趋势与测序结果一致。[结论]氧化应激、血管生成、能量代谢以及激素合成等多方面因素综合调控猪卵巢中颗粒细胞的凋亡，继而影响卵泡闭锁现象的产生。