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研究猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白的抗原性,为开发PCV2的检测方法奠定基础。以PCV2CAU0673毒株的DNA为模板,扩增获得702bp的目的片段,扩增产物克隆入pET30a(+)原核表达载体,构建pET30a-PCV2-ORF2重组质粒,转入大肠埃希菌BL21(DE3);在37℃以1mmol/L IPTG诱导表达6h;采用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白,并用不同浓度的尿素对纯化蛋白进行复性。SDSPAGE分析表明,该ORF2编码基因在大肠埃希菌中得到表达,蛋白大小约为34ku;Western blot检测结果表明,该重组Cap蛋白与PCV2阳性血清发生特异性反应,与NA-PRRSV和PPV1血清不发生交叉反应。成功构建了PCV2-ORF2原核表达载体,实现了在大肠埃希菌中的表达,纯化后的复性蛋白具有较好的反应原性,为猪圆环病毒2型检测方法建立或试剂盒的开发奠定了基础。 相似文献
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马小元 《农业工程技术:农产品加工》2001,(6):28
精米细面的营养成分不如普通米、标准粉及粗粮那样种类齐全,尤其是 B族维生素和无机盐。为了提高面包的营养价值,可在小麦粉中加入一定量的玉米粉和大豆粉。其制作技术如下: 一、配方 小麦粉 100(以小麦粉 100公斤计 ),糖 5~ 6,玉米粉 25,食盐 2,大豆粉 5,表面活性剂 0 25~ 0 5,酵母 0 8~ 1 5。 二、生产工艺流程 原料处理→第一次调制面团→第一次发酵→第二次调制面团→第二次发酵→第三次调制面团→第三次发酵→切块→搓圆→中间醒发→整形→装模 (或放盘 )→最后醒发→焙烤→冷却→包装→成品 三… 相似文献
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