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为构建猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)诊断DNA微阵列,应用RT—PCR从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)C14—2分离株和欧洲型弱毒疫苗株VP046扩增并克隆获得戋洲型重组质粒C14P9(基因号:AY775132)、PRRS—PS9(基因号:AY775134)、Ulb(基因号:AY775135)、Y11(基因号:AY775133)、Y12(基因号:AY775136)和欧洲型基因重组质粒E6和E8。PCR法制备的靶基因和探针纯化后,质量浓度分别为300~600mg/L和200-400mg/L。芯片杂交动力学研究表明,杂堑信号强度随靶基因和探针浓度的增加而增强,最佳靶基因质量浓度为200mg/L,探针适宜范围为3~3000μg/L,系统灵敏性为3μg/L。靶基因杂交特异性研究表明,除个别靶基因在某一温度下存在交叉反应和杂交信号弱外,大多数靶基因在40~56℃下杂交信号强。采用AY775133、AY775134、E6和E8靶基因构建PRRS诊断DNA微阵列在40℃下预杂交1h、48℃湿盒避光杂交6h后经洗涤和扫读分析,杂交信号强、斑点明显、特异性高,按SNR≥1.5为标准能够区分PRRSV蔓洲型和欧洲型。应用PRRS诊断DNA微阵列检测了AMERVAC-PRRS、PRRSV弱毒疫苗、C14—2株、SCU株和临床样本,能正确区分PRRSV基因型。研究结果表明构建的PRRS诊断DNA微阵列可用于PRRS临床诊断和基因分型。 相似文献
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集约化养猪的水平取决于现代科学技术的发展。在集约化养猪的发展历史上.人们积累了不少成功的经验.集约化程度和水平日益提高,但也存在一些误区.主要表现在以下几个方面: 相似文献
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用反转录-聚合酶链反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型毒株的基因序列设计了一对特异性引物P1/P2,扩增的片段为550bp,根据欧洲型毒株设计了一对特异性检测引物P3/P4,扩增的片段为433bp,建立PRRSV的RT-PCR的检测与血清型鉴别方法。特异性试验表明,这2对引物均不能扩增其他常见的繁殖障碍相关病毒的RNA或DNA。敏感性试验表明,这2对引物可以分别到检测10-5TCID50和10-4TCID50的病毒含量。利用该方法对重庆、四川某些猪场中临床上疑似为PRRS的20份送检组织样品进行检测,只有引物P1/P2能扩增出与预期大小相符的RT-PCR产物;其中有15份样品呈PRRSV阳性结果,阳性率为75%,说明送检的样品感染的PRRSV为美洲型。试验结果表明该方法快速检测病料组织中PRRSV是可行的,是临床上对PRRS进行快速诊断和分子流行病学调查的实用方法。 相似文献
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注意事项: 1.每天打扫清洁卫生1~2次,保持圈舍清洁卫生. 2.不用或慎用肉骨粉、米糠、鱼粉、酒糟等质量难以控制的原料;禁止饲喂霉烂变质的饲料. 3.保持环境安静. 4.冬天注意防寒保暖,防止贼风侵袭;夏天注意防暑降温,可安装风扇或洒水降温. 5.饲料可湿拌生喂,要保持清洁饮水. 参考配方:规模化养猪实用技术要点(八):瘦肉型商品猪饲养管理日程@张凤鸣$重庆市养猪科学研究院! 重庆荣昌 402460
@郭宗义$重庆市养猪科学研究院! 重庆荣昌 402460
@林保忠$重庆市养猪科学研究院! 重庆荣昌 402460
@王金勇$重庆市养猪科学研究… 相似文献
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