被膜态与浮游态猪源乳杆菌上清液抑菌活性比较分析

试验旨在比较分析猪源约氏乳杆菌L-76和嗜淀粉乳杆菌L-102被膜态和浮游态下其上清液对病原菌的抑菌活性。采用结晶紫染色法测定L-76和L-102的生物被膜形成能力,研究其被膜态和浮游态乳杆菌上清液及上清液与不同影响因素作用后的抑菌活性,并利用扫描电镜观察其两种状态下的上清液对指示菌形态的影响。结果显示,L-76、L-102乳酸菌具有较强的生物被膜形成能力,被膜态和浮游态乳杆菌L-76、L-102具有良好的抑菌活性,其上清液经蛋白酶作用后,被膜态L-76和L-102上清液的抑菌圈直径比浮游态明显变小;经过氧化氢酶和不同温度作用后,两种状态的乳杆菌上清液的抑菌活性无明显变化（P>0.05）,但在pH 3.0作用下,两种状态的乳杆菌上清液的抑菌效果最好;扫描电镜结果显示,被膜态乳杆菌上清液对金黄色葡萄球菌的形态影响略大。综上所述,两种状态下乳酸杆菌上清液中均含有抑菌物质,且被膜态乳酸杆菌上清液中的抑菌物质含量略多或活性略高。     

2株猪源乳酸杆菌的抗逆性和生长特性分析

为分析猪源嗜淀粉乳杆菌L-102(Lactobacillus amylovoms)和约氏乳杆菌L-76(Lactobacillus johnso-nii)的抗逆性和生长特性,为乳酸菌进一步的体外研究提供理论依据.分别对L-102、L-76乳酸杆菌的耐酸碱、耐胆盐、耐胰蛋白酶、黏附性、抑菌性、产酸能力、生长能力及对小鼠致病性进行了测定和分析.结果 表明:乳酸杆菌L-102和L-76对pH 2～11的酸碱环境具有抵抗能力,可耐受生长介质中含0.1％～0.2％的胆盐和1％的胰蛋白酶;对IPEC-J2细胞有一定的黏附作用;能抑制大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的生长;L-102和L-76乳酸杆菌的产酸在pH 4.1～4.3;培养4h后进入生长对数期;经50℃和60℃高温作用5～15 min,其活菌数可达到107 CFU/mL;通过腹腔注射和灌胃小鼠发现,小鼠无死亡.表明嗜淀粉乳杆菌L-102和约氏乳杆菌L-76具有潜在的益生菌特性,有望发展成为用于养猪行业的饲用益生乳酸菌.     

猪源生物被膜乳酸菌的筛选、鉴定与体外益生特性评价

将分离自健康猪新鲜粪便的乳酸菌进行功能性和安全性评价,旨在筛选出有利于猪健康生长的优良乳酸菌菌株。结果显示,共分离到2株对猪源大肠杆菌等病原菌具有抑制作用的乳酸菌菌株,并从中成功筛选出1株生物被膜形成能力较强的分离菌株L-8。经鉴定,分离菌株L-8为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii),具有一定的产酸能力,能够耐受胃内pH值4.0～10.0和肠道1%胰蛋白酶环境,对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)具有一定的黏附性,其生存能力和生长性能均较好。此外,分离菌株L-8对小鼠无致病性,具有安全性。综上,分离菌株L-8具有作为猪用益生菌的潜在益生特性和开发前景。