HPLC法同时测定和评价“黔中金荞麦”中4种成分含量

“黔中金荞麦”是贵州省农业科学院畜牧兽医研究所选育的优质牧草（品种登记号：2019581）。为建立同时测定该药材中表儿茶素、原花青素B2、芦丁和槲皮素的检测方法,考察其含量多样性。采用高效液相色谱法建立检测方法,测定并分析其含量与野生金荞麦的差异。结果得出检测方法为：C18柱（250×4.6 mm,5 μm）,乙腈-0.4%磷酸水梯度洗脱,进样量10 μL,流速0.7 mL/min,检测波长254 nm,温度30 ℃;原花青素B2、表儿茶素、芦丁和槲皮素分别在5～85 μg/mL（r2=0.9998）、5～80 μg/mL（r2=0.9998）、0.5～8 μg/mL（r2=0.9996）、0.125~2.0 μg/mL（r2=0.9999）范围内呈现良好线性关系,加样回收率高;黔西和麦坪的“黔中金荞麦”4种成分总含量高达1189.70μg/g、1108.01μg/g,其中原花青素B2、芦丁和槲皮素含量最高,丹寨野生金荞麦表儿茶素含量最高。试验结果说明本法准确可靠,适合“黔中金荞麦”的内控质量监测,“黔中金荞麦”中活性物质含量高且质量稳定,优于野生金荞麦。因此本试验为该药材的开发应用提供了理论基础。     

牛源化脓隐秘杆菌的分离鉴定与黔中金荞麦体外抑菌试验

为分离致病性牛源化脓隐秘杆菌并探究黔中金荞麦对该菌的体外抑制作用,本试验对采集于贵州省凯里市某养殖场疑似患牛呼吸道综合征的病死牛肺组织进行细菌分离、形态学观察、生理生化鉴定、分子生物学鉴定、药敏试验和致病性试验,并运用打孔法探究黔中金荞麦提取物对分离菌株的体外抑制效果。结果显示,分离菌株为革兰阳性短棒状杆菌,结合生理生化和PCR鉴定结果,确定该菌为化脓隐秘杆菌,系统进化树分析也显示,分离菌株与化脓隐秘杆菌的模式菌株处于同一分支;该分离菌株可致10只小鼠于24 h内全部死亡;其对头孢他啶、利福平、青霉素等7种抗菌药敏感,对环丙沙星中介,对克林霉素、左氧氟沙星、庆大霉素等8种抗菌药耐药;黔中金荞麦不同组织部位、不同处理方法的提取物对该分离菌株均具有一定抑制效果,其中地下部分70%乙醇超声30 min提取物的抑菌效果最好,抑菌圈直径为(28.13±0.25) mm,与头孢喹肟的抑菌效果相当。本试验首次从贵州地区分离到致病性牛源化脓隐秘杆菌,黔中金荞麦对该菌具有良好的体外抑制效果。本试验结果可为该肉牛养殖场疫病防控以及牛化脓隐秘杆菌感染的治疗和预防提供参考依据。     

贵州金荞麦块根中表儿茶素含量的测定及分析

为了解贵阳地区不同生长年限的黔中金荞麦和贵州不同产地的野生金荞麦块根中表儿茶素含量,利用高效液相色谱法进行检测分析.结果:2年生黔中金荞麦的表儿茶素含量为349.48μg/g,达到《中华人民共和国药典》要求;贵州不同产地的野生金荞麦表儿茶素含量差异较大,丹寨县的野生金荞麦表儿茶素含量最高,达到590.89μg/g,可作...     

黔中金荞麦活性物质提取工艺优化及提取物抑菌活性研究

为优化贵州地区优质牧草黔中金荞麦活性物质的提取工艺，并探究提取物抑菌活性，试验通过回流法、超声法、水煮法及鲜样榨汁法对黔中金荞麦地上部分和地下部分进行提取，通过打孔法检测各提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果，确定提取方法；利用高效液相色谱法(HPLC)检测提取物中的有效物质含量，对溶液浓度、料液比、提取温度进行优化，设置正交试验确定最优提取工艺。以微量肉汤二倍稀释法检测在最佳提取条件下提取的黔中金荞麦提取物对3种细菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明：黔中金荞麦地下部分的70%乙醇超声提取物对3种细菌均有抑制作用，对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好，抑菌圈直径为24.2 mm。最佳提取工艺为乙醇浓度50%,提取温度60℃,料液比1∶40。提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的MIC介于31.25～62.5 mg/mL之间，MBC介于为62.5～500 mg/mL之间；对金黄色葡萄球菌的抑制效果较好，MIC和MBC分别为31.25 mg/mL和62.5 mg/mL。说明黔中金荞麦地下部分醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用...