绵羊卵巢组织石蜡切片制作条件优化研究

为观察绵羊正常卵巢组织的形态结构，采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin ，HE）染色法制作绵羊卵巢组织石蜡切片。结果显示，在切片制作过程中存在的问题主要包括染色不均、染色对比不明显、过度染色、染色过浅和切片出现斑点等。在试验过程中可通过充分分化、蓝化、充分水洗等因素的控制来提高切片的染色效果，该方法可为动物卵巢及卵泡染色切片制作提供技术指导。     

不同分离方法对绵羊睾丸间质细胞纯度的影响

旨在探寻一种分离纯度较高的绵羊睾丸间质细胞的分离方法。试验比较了3种不同的分离方法对绵羊睾丸间质细胞纯度的影响。结果表明,机械分离结合细胞筛过滤法,不仅操作简便,而且分离出的间质细胞纯度高于90%。     

不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34~(cdc2)表达的差异

旨在探究不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2的表达情况。本试验选取发育正常、体重相似的5~6d荷斯坦哺乳公犊18头,随机分为3组,每组6头,饲喂相同的基础日粮,分别在30(断奶)、60和90d时从各组分别随机抽取2头,采集其睾丸备用;通过qRT-PCR技术检测不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达规律,免疫组化技术对睾丸CyclinB1和p34cdc2进行定位分析。结果表明:90d时CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达量显著高于30与60d(P0.05),但30与60d两种基因mRNA表达量均差异不显著(P0.05);p34cdc2蛋白在不同日龄犊牛表达差异显著(P0.05);CyclinB1蛋白在60、90d的表达量显著高于30d(P0.05),但60和90d差异不显著(P0.05)。综上表明,CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白在睾丸的表达量随着犊牛日龄的增加而增加,且不同的日龄CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白表达量存在一定的差异。     

黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因表达的影响

为探讨黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响,本试验通过向大鼠睾丸间质细胞的体外培养体系中添加终浓度为20μg/m L的黄芪提取液,利用荧光定量PCR技术研究黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达量的影响。结果:添加终浓度为20μg/m L黄芪提取液的实验组与不添加黄芪提取液的对照组相比,间质细胞内Bax基因表达量显著降低(P0.01),Bcl-2基因表达量无显著差异,Bax/Bcl-2比值显著下降(P0.05)。结论:黄芪在一定程度上能够通过抑制凋亡基因Bax的转录,抑制大鼠睾丸间质细胞凋亡。     

一种简便的机械法分离绵羊睾丸间质细胞的研究

本文旨在探寻一种取代酶消化法分离绵羊睾丸间质细胞的简便新方法。首先将绵羊睾丸被膜剥离,然后将睾丸切块,采用机械震荡的方法使间质细胞自动脱落,然后用差异贴壁法进一步纯化间质细胞。试验结果表明,该方法分离绵羊睾丸间质细胞省时省力,睾丸间质细胞存活率与纯度都较高。     

蛋鸡卵巢CHST11基因CDS序列分析

根据NCBI上已公布其他物种CHST11基因的mRNA序列设计蛋鸡特异性引物,应用RT-PCR方法从其卵巢卵泡中扩增出CHST11的CDS全序列。结果表明:CHST11基因编码产物为不稳定的疏水蛋白,经过BLAST比对发现,和其他物种的CHST11序列相比,同源性高。生物信息学软件分析表明,CHST11蛋白不具有信号肽,在10~40位氨基酸处存在1个跨膜螺旋结构区,其序列预测显示存在13个O糖基化位点。CHST11基因可能参与卵巢肿瘤和卵巢癌的调控,同时也可能与卵泡发育有关。