河南省四种猪病的血清学监测与分析

河南农业大学牧医工程学院疫病检测中心实验室从河南省88个规模化猪场采取血清样品1095份,采用5套试剂盒检测了猪瘟(HC)、猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)、猪Ⅱ型圆环病毒病(PCV-Ⅱ)4种引起猪繁殖障碍综合征的传染病。其中对24个场进行猪瘟抗原检测,并对包括这24个场在内的64个猪场病例的血清样品618份进行猪瘟、猪繁殖与呼吸障碍综合征、伪狂犬病及圆环病毒病的抗体检测。结果表明,猪瘟抗原检出率是27.8%,抗体检测阳性保护率达81.3%;使用猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗的猪场血清阳性率是85.7%,未使用此疫苗的猪场,阳性率高达69.5%;使用伪狂犬病毒基因缺失苗的猪场抗体阳性率33.8%;圆环病毒抗体阳性率高达73.5%。同时HC、PRRS、PR及PCV-Ⅱ的混合感染也较严重,阳性率分别为18.1%、35.7%、44.7%、78.5%,圆环病毒的阳性率最高。     

猪圆环病毒2型(PCV2)河南分离株进化分析及ORF2基因的表达

根据GenBank中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus2,PCV2)的核苷酸序列设计2对引物,使用扩增全基因的引物对来源于河南省焦作、开封和滑县的3株PCV 2型JZ株、KF株和HX株的ORF2基因进行扩增,扩增片段克隆到pMD18 T上,获得重组质粒pMD18-T-ORF2,并对其进行测序,测序结果登录在GenBank上,登录号分别为EF028202、EF064149和EF467928.序列分析表明,PCV2河南分离株ORF2基因与其它PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为92.4%～99.6%,氨基酸序列同源性为90.6%～97.9%,进化分析表明,河南分离株处于同一分支,与欧洲株亲缘关系较近.应用另一对引物从重组质粒pMD18-T-ORF2中PCR扩增出587 bp不包含核定位信号序列的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET-32a-ORF2,经IPTG诱导表达了ORF2基因编码的结构蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting检测,表达的重组蛋白分子量约为40 kD,可被PCV2阳性血清识别,说明PCV2 ORF2基因得到成功表达.     

浅谈影响母猪繁殖性能的原因

母猪的繁殖性能是衡量母猪经济价值的重要指标,关系着猪场的经济效益。影响母猪繁殖性能的因素众多,包括品种、营养、胎次、疾病、季节等。在实际生产中应综合考虑,借鉴先进的技术和经验,努力提升母猪的繁殖性能,为猪场创造更多的效益,推动养猪业健康快速发展。     

微生物表面展示技术的发展及应用

微生物表面展示技术是利用基因工程手段实现外源肽段(或蛋白质结构域)以融合蛋白形式在微生物表面进行展示的新型基因工程技术,被展示的多肽或蛋白质可以保持相对独立的空间结构和生物活性.其重要特征和优点是靶蛋白与其编码DNA处于同一个病毒或细胞中,可以通过序列测定确定DNA序列并进一步推导外源蛋白氨基酸组成,从而实现了基因型和表现型的统一.自1985年Smith等人创建噬菌体表面展示技术以来,微生物表面展示技术在许多研究领域一直被寄予厚望,经过20多年的研究和发展,已经得到广泛应用.本文就微生物表面展示技术的发展及其应用状况做一简要介绍.     

一例鸡大肠杆菌病的诊治

鸡大肠杆菌病是临床常见多发病,也常为其他传染病并发或继发。近年来由于抗菌药的滥用,该病在临床上已经产生多重耐药性和超强耐药性,造成药效下降甚至消失,给养禽业带来较大的经济损失。2006年3月18日,笔者接诊一例鸡大肠杆菌病,现将治疗方案简述如下。1流行病学调查郑州南郊某养殖户,该户养艾维茵鸡4000只,从10日龄左右开始发病,一直接连不断死亡,开始死亡速度较慢,主要症状是张嘴喘气,精神萎靡。曾在18日龄感染法氏囊病,通过注射高免卵黄控制了疾病蔓延和发展。剩余的3000只鸡在20日龄时受到寒风侵袭,第2天便出现典型的呼吸道症状:咳嗽、…     

猪圆环病毒2型河南分离株进化分析及ORF2基因的表达

根据GenBank中猪2型圆环病毒的核苷酸序列,设计两对引物,对来源于河南省不同地市的4株PCV2细胞培养物进行鉴定,并扩增出ORF2基因,克隆到pMD18－T载体上,获得重组质粒pMD18-T-ORF2,并对其进行测序,结果表明所克隆的ORF2基因与其它PCV2 ORF2基因核苷酸同源性在92.4%～99.6%之间,氨基酸同源性在90.6％～97.9％之间。同时采用PCR从重组质粒pMD18-T-ORF2中扩增出587bp的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET-32a-ORF2,经诱导表达了ORF2基因编码的结构蛋白,表达的重组蛋白为融合蛋白,分子量为40kD,经Western-Blot检测,重组蛋白可被PCV2阳性血清识别。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒地方株的分离与鉴定

从河南省某猪场发病仔猪体内分离到1株病毒,该病毒能在 Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变 (CPE),在 Vero、PK-15细胞上不出现CPE.该病毒能被猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清特异性地中和,用 PCR反应能扩增出 720 bp的特异性片段.分离病毒回归 30日龄仔猪可出现高热和呼吸道症状.初步鉴定该分离株为猪繁殖与呼吸综合征病毒.     

河南省猪圆环病毒病流行病学调查及病原鉴定

猪圆环病毒Ⅱ型（Porcine circovirus type 2，PCV2）是近年来新发现的猪的一种致病病原，主要引起断奶猪多系统衰竭综合征（ Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS）。自1991年在加拿大首次报道以来，世界上许多国家和地区相继报道此病的发生和流行，我国在2001年报道了此病的发生，并做了分离鉴定。为了了解河南省的流行情况，本研究室应用ELISA法进行了血清学检测，并用PCR法做了病原分离鉴定。     

检测猪伪狂犬病毒和猪Ⅱ型圆环病毒复合PCR方法的建立及其应用

猪伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudo rabies Virus,PRV)引起的猪的一种以发 热及脑脊髓炎为主要症状的急性传染病.猪Ⅱ型圆环病毒( PCV-2)是由Allan等[1] 首次从病料中分离获得,该病毒可引发猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS) [2] 、 猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、新生仔猪先天性脑震颤(CT)、增生性坏死性肺炎(PNP)以及怀孕母猪的繁殖障碍等.