DNA分子标记检测家蚕苏菊、明虎品种和纯度的研究

利用单粒卵微量DNA抽提法,从江苏省家蚕主要品种苏菊、明虎及其一代杂交种蚕卵快速提取出基因组DNA,用筛选出的 RAPD随机引物S77稳定扩增出苏菊、明虎的DNA特异性片段RS和RM,克隆和测序后大小分别为1694bp和1303bp,使用Blastn程序在NCBI 数据库检索发现,Rs的nt30-429与一个家蚕WGS(whole genome shotgun sequence)(dbj|BAAB01119085．1,contis504766)的nt472-874有92％的同源性,其中存在11个空缺位点(Gaps);RM的nt1070-1301与另一个家蚕WGS(dbj|BAAB01141578．1,contig554782)的nt262-31有91％的碱基相同,其中存在2个Gaps。进一步根据RS和RM序列合成SCAR标记引物PS-1(FP:5’ttccccccagtacgcaataac3’,RP:5’ ttccccccagacgtcacgtact3’)和PM-1(FP:5’ttcccccagtgatggaatttacg3’,RP:5’ttccccccagtccaatgttaca3’),能够准确、快速地鉴别所标记的苏菊、明虎及其F1蚕品种。     

不同倍数体桑品种秋季叶质试验

对四倍体、三倍体和二倍体桑品质进行生物学鉴定,用方差分析的方法比较7个桑品种在蚁蚕绝食生存率、茧质方面的差异。结果表明:(1)蚁蚕绝食100小时后的生存率经统计分析,不同倍数体之间有显著差异;(2)不同倍数体桑品种饲养成绩以三倍体桑的全茧量、茧层量最高。     

家蚕滞育生物种蛋白质酯酶A4研究进展

生物钟普遍存在于生物体内，协调肌体的功能。与光感知型昆虫生物钟依赖视叶或脑驱动不同，家蚕的滞育生物钟依赖酯酶A4（EA4）感知低温、盐酸刺激等信息，从而启动基因，开发胚胎发育。EA4由His到Tyr的155个氨基酸残基构成，在22位Asn处有糖基结合，EA4的测时功能与自身的结构有关，受多肽抑制因子（PIN）调控。PIN是蚕卵内的一种由Ser到Asn的38个氨基酸残基的多肽，从卵特异蛋白质（ESP）加工而来。     

不同施肥配比对桑产量和质量的影响

植物营养诊断综合法（Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎｄ　Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｓｙｓｔｅｍ，简称 ＤＲＩＳ法）在指导多年生木本植物施肥取得了成功，本实验试图通过研究不同肥料配比对桑园桑叶产量和质量的影响，以便为以后建立桑园综合诊断施肥法（ＤＲＩＳ法）打下基础，以改变桑园施肥模式一直在仿效水稻、小麦等禾本科作物的现状，从而更科学地指导蚕桑生产。在本试验条件下，磷肥用量以６００克处理的产叶量为最高，其对桑叶的产量构成的影响，主要通过影响桑树条数、新梢重、叶梢比、单片桑叶重量等因素来实现，而且这个时候桑叶的品质亦较好；钾肥用量以２１０克处理的桑叶产量为最高，对产量构成的影响与磷肥有所区别，钾对单片桑叶重基本上没有影响，主要影响条数、新梢重及叶梢比；对叶质的影响主要是可溶性总糖。     

家蚕单粒卵DNA的快速制备方法研究

研究了含量甚微的家蚕单粒卵DNA的抽提方法。将蚕卵催青至转青,以增加蚕卵的DNA含量。在Eppendorf管内用牙签刺破 蚕卵,再用酚、氯仿速提法抽提,能够在1h左右制备出符合RAPD需要的DNA模板,每粒卵能够提取到100ng左右的DNA,制备量接近常规方 法。     

桑褐刺蛾的发生与防治

通过对危害桑树、果树和园林树木的褐刺蛾的分布与危害、形态特征、生物学特性、桑褐刺蛾幼虫致病物质成分的分析以及褐刺蛾质型多角体病毒研究总结,提出了刺蛾类害虫发生与防治的措施,表明铲除越冬茧、摘除虫叶、灯光诱杀是据其生物学特性制定的有效农业防治措施。生物治虫、天敌保护是防除刺蛾的必然趋势。喷雾法、打孔注药法构成了化学防治的核心内容。以化学防治为主体,农业防治和生物防治为配合的防治技术是目前行之有效的综合治理措施。     

SCAR分子标记方法检测家蚕品种和纯度的研究

 【目的】家蚕（Bombyx mori L.）品种和纯度的鉴别，普遍依靠幼虫斑纹或茧形等形态鉴别方法，该方法易受环境影响，结果时效性和准确性差。【方法】筛选RAPD随机引物，稳定扩增出亲本品种的DNA特异性片段，转换成SCAR标记。 【结果】利用微量DNA抽提法，从家蚕主要品种苏5、苏6及其F1孵化前日卵快速提取单粒卵基因组DNA，筛选出RAPD随机引物S42，稳定扩增出苏5和苏6两个亲本品种的DNA特异性片段R5和R6，克隆和测序确认其大小分别为255bp和343bp。Blastn分析显示，R5的nt7～192与家蚕的一个非长末端逆转录转座子（AB002270.1）的nt183～368片段碱基序列有高达91%的相似性，无缺口序列。R6的nt5～340与家蚕的一个WGS（BAAB01113163.1）的nt675～337有91%的一致性，其中存在13个碱基的缺口序列。将2个亲本的RAPD标记转换成SCAR标记，分别利用合成的S42-255-2（P5-2）和S42-343-2（P6-2）SCAR标记引物，能够准确、快速地鉴别所标记的苏5和苏6及其F1蚕品种。【结论】SCAR分子标记方法能够检测家蚕品种和纯度。     

不同施肥配比对桑产量的质量的影响

植物营养诊断综合法（Diagnosis and Recommendation Integrated System，简称DRIS法）在指导多年生木本植物施肥取得了成功，本实验试图通过研究不同肥料配比对桑园桑叶产量和质量的影响，以便为以后建立桑园综合诊断施肥法（DRIS法）打下基础，以改变桑园施肥模式一直在仿效水稻、小麦等禾本科作物的现状，从而更科学地指导蚕桑生产。在本试验条件下，磷肥用量以600克处理的产叶量为最高，其对桑叶的产量构成的影响，主要通过影响桑树条数、新梢重、叶梢比、单片桑叶重量等因素来实现，而且这个时候桑叶的品质亦较好；钾肥用量以210克处理的桑叶产量为最高，对产量构成的影响与磷肥有所区别。钾对单片桑叶重基本上没有影响，主要影响条数、新梢重及叶梢比；对叶质的影响主要是可溶性总糖。     

家蚕越年种良卵率调查方法研究

改变良卵率的静态调查方法 ,运用动态调查蚕种的不良卵发生率 ,并借助破坏性检测方法 ,增大蚕种场批间的不良卵发生率差异 ,提高了检测方法的准确性和检测结果的代表性。使用这种方法 ,能够准确地检测因蚕期营养和产卵环境等造成的下一代蚕种质量差异 ,特别是强健性差异 ;经检测生产上的 8个品种 145场批的蚕种 ,结果与多项指标检测结果一致     

环境激素阿特拉津对家蚕卵巢培养细胞(BmN)凋亡的影响

为探讨利用鳞翅目昆虫对环境激素进行生物学评价和监测的方法,用2,3-二苯基溴化四唑(MTT)、4’,6二乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染色和单细胞凝胶电泳(SCGE)、流色细胞仪检测(FCM)等技术,分析检测了环境激素阿特拉津(AT)对体外培养家蚕卵巢细胞(BmN)细胞增殖和凋亡的影响。结果显示：AT浓度超过0．0625mmol/L,显著抑制了BmN培养细胞48h的存活率(p＜0．001),LC_(50)为0．0703mmol/L;0．0625～0．5000mmol/L AT处理24h后,BmN细胞核出现明显的凋亡现象;0．5000mmol/L的AT处理48h后,BmN细胞DNA链发生断裂。AT对BmN细胞增殖和凋亡的影响有明显的时间-剂量效应。长期处于AT污染的环境中对鳞翅目昆虫可能有严重的细胞毒性。