光敏生物素标记EDSV-DNA探针检测鸡减蛋综合症(EDS)的研究

应用光敏生物素标记EDSV－DNA与pUC19重组质粒DNA做探针，检测人工发病减蛋综合症蛋鸡的粪便、蛋、输卵管样品，以新城疫病毒（NDV）、传染性囊病病毒（IBDV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、包涵体肝炎病毒（IBHV）作对照。实验结果显示：探针能特异地检出EDS病鸡粪便、输卵管、蛋清样品中的病毒，与NDV、IBDV、IBV及IBHV均呈阴性反应。探针灵敏度达10pgEDSV-DNA。     

兔病毒性出血症母源抗体的测定

应用 PPA-ELISA 间接法检测处于不同情况下的(?)肉兔17只及其仔兔43只.结果,接种兔病毒性出血症灭活苗、产仔后3天的母兔9只,其 OD 值 (?)=0.9733,所生仔兔24只的 OD 值 (?)=0.9283(P>0.05):接种上记疫苗、产仔后30天的母兔5只,其 OD 值 (?)=1.144,所产仔兔10只的 OD 值 (?)=0.10(P<0.05);接种上记疫苗、处于孕期28～29天的母兔3只,其 OD 值 (?)=1.0167,其剖腹产仔兔9只的 OD 直 (?)=0.6544(P<0.05).结果表明,仔兔通过胎盘和母乳共同获得母源抗体,抗体效价与母兔相当;母源抗体在30天内迅速降至阴性水平.     

鸡产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针制备

鸡产蛋下降综合征（EDS－76）病毒由鸭胚培养增殖，60％饱和度的（NH4）2SO4沉淀，经差速离心和蔗糖垫超速离心提纯病毒。蛋白酶K和SDS消化后，苯酚抽提、乙醇沉淀分离EDS－76病毒DNA。用HindⅢ、BamHI、PstI、EcoRI进行病毒DNA酶切图谱分析。EDS－76病毒DNA经PstI限制酸酶切与pUC19质粒载体连接，转化了JPA101大肠杆菌细胞，筛选带有插入片段的白色菌落，并将筛选的克隆进杆快速酶切鉴定;用光敏生物素标记制成探针。结果表明：所选克隆只与EDS-76病毒DNA杂交，克隆片段的为3kb，标记探针能检出10pg的EDS－76病毒DNA。     

用PPA-ELISA间接法检测兔病毒性出血症(RHDV)肝脏抗原及血清抗体的研究

在应用PPA—ELISA间接法检测兔病毒性出血症血清抗体的基础上,将标准阳性血清用肝脏抗原进行吸收,以标准阳性血清OD值的变化来判定有无肝脏抗原。本试验共检测血清171份,肝脏57份。试验结果表明,本方法简便、特异性强、灵敏度高、结果便于判定。     

Dot—ELISA间接法检测鸡新城疫病毒（NDV）的研究

常规方法分离纯化鸡ＩｇＧ,免疫羊制备羊抗鸡ＩｇＧ二抗,以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记制备酶标记物的工作浓度为１：１０００;选用硝酸纤维素（ＮＣ）膜作固相载体,建立检测ＮＤＶ抗原的斑点间接酶联免疫吸附试验诊断方法。检测ＮＤＶ鸡胚毒４０份,阳性检出率１００％;人工感染非免疫鸡的气管组织、肺组织各４７份,检出率为９３．６％;人工感染ＳＰＦ鸡气管组织、肺组织各４０份,检出率１００％。与传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）、传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）无交叉反应。试验显示该方法简便、特异、快速、结果直观,便于生产应用