降低猪应激的几项工作

1 通风 猪在恶劣的空气环境中常会发生肺炎。户外饲养的猪很少发生肺炎，这是因为大量的新鲜空气起了作用。由于每栋猪舍的大小、饲养密度各不相同，所需的气流类型也不相同。搞好通风，要做到能随意控制风扇和通风口。要防止贼风，因为贼风更易引起应激。除了考虑整栋猪舍的通风状况外，还要考虑局部风的强度，高速的局部气流可使猪感到寒冷而引起应激。风速标准是，猪身水平处的风速不应超过每秒0.3米。     

夏季肉鸭的饲养管理

夏季气候炎热，在一些鸭养殖场、养殖户中，经常发生鸭只中暑和热应激导致昏厥的现象。原因多为气温过高，鸭子没有汗腺，丰厚羽毛覆盖鸭体，散热受到限制；在防暑降温条件差的情况下，造成鸭只体温居高不下；高温、高湿的饲养环境不利于鸭粪分解，造成鸭舍氨气等有害气体含量过高，严重危害鸭的健康和生长。因此，在夏季应做好以下几项工作。     

拟南芥Alpha-dioxygenase2(AtDOX2)在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定

为了获得具有生物活性的拟南芥(Arabidopsis thaliana)alpha-dioxygenase2(AtDOX2),将其对应基因AtDOX2编码区克隆到酵母表达载体pPIC9k中,获得重组表达载体pPIC9k-AtDOX2,将线性化的重组载体电击转化入毕赤酵母(Pichia pastoris)表达菌株GS115,经G418筛选、PCR鉴定和甲醇诱导时间优化,获得重组AtDOX2的高效表达菌株GS115/pPIC9k-AtDOX2。SDS-PAGE分析结果显示,0.5%甲醇诱导96h重组蛋白表达量最高,其表达量占胞外总蛋白的15%。重组AtDOX2的表观分子量约为70kD,经Ni-NTA柱亲和层析可获得纯度大于80%的重组蛋白。2,2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)(ABTS)法测定结果表明重组蛋白具有过氧化物酶活性,且其活性受Ca2+和Mg2+激活,受EDTA、咪唑和Mn2+抑制;2,4-二硝基苯肼(2,4-DNP)法测定结果显示,重组AtDOX2具有双加氧酶活性,Ca2+对其双加氧酶活性也有激活作用。结果说明利用酵母表达系统获得...     

范式酵母Wss1金属蛋白酶的原核表达与理化性质

【目的】建立范式酵母(Vanderwaltozyma polyspora)Wss1(VpWss1)金属蛋白酶的原核表达纯化系统,对该蛋白酶的均一性和自切活性进行初步分析,为VpWss1的晶体制备及结构解析奠定基础。【方法】构建VpWss1基因的融合表达载体,将其转化入E.coli 2566菌株中进行诱导表达,利用Ni-NTA亲和柱和SP阳离子交换柱对融合蛋白进行纯化。通过动态激光散射仪(DLS)和Superdex 200分子筛对该蛋白酶的均一性和聚集状态进行分析,同时与不同类型和长度的DNA底物孵育,分析野生型和突变型SUMO VpWss1蛋白的自切活性。【结果】表达纯化的目的蛋白SUMO VpWss1/SUMO VpWss1~(E96Q)为可溶性蛋白,分子质量约为50ku,纯度95%。野生型SUMO VpWss1蛋白均一性较差,呈现多种状态,但突变型SUMO VpWss1~(E96Q)蛋白的均一性较好,其主要单一状态(Mass)的含量达到93.2%。在不同类型和长度DNA下,野生型SUMO VpWss1均可发生自切,且随DNA长度的延长呈现出先增强后减弱的趋势,而突变型SUMO VpWss1~(E96Q)的自切活性显著减弱。【结论】成功表达纯化了金属蛋白酶SUMO VpWss1及其突变体SUMO VpWss1~(E96Q),明晰了两者的均一性和自切活性。     

奶牛子宫内膜炎的防治

子宫内膜炎是奶牛生产中的常见病。一旦发生,奶牛配种困难或长期不孕,导致养殖效率低,甚至提前淘汰。抓好子宫内膜炎的预防和治疗,对促进奶业增效、奶农增收意义重大。     

小麦WPBF与高分子量谷蛋白基因上游Prolamin-Like box的特异结合

【目的】克隆普通小麦胚乳特异表达转录因子基因WPBF,对其原核表达条件进行优化,并验证其编码蛋白和小麦高分子量谷蛋白亚基基因（HMW-GS）上游Prolamin-Like box的结合特性,为小麦HMW-GS表达调控机制的阐明奠定基础。【方法】利用RT-PCR扩增得到WPBF编码区,将其连接到pET-21a-MBP载体中,并分别在E.coli T7 Express和Origami B（DE3）菌株中诱导表达。依次利用Amylose和Ni-NTA亲和层析柱纯化重组蛋白,最后通过凝胶迁移阻滞试验（EMSA）对重组蛋白的DNA结合特性进行分析。【结果】在33℃的Origami B（DE3）菌株中表达含MBP和His双标签的重组WPBF大部分以可溶性形式存在,其表达量占细菌总蛋白的48.0%。重组WPBF和含HMW-GS上游Prolamin-Like box的两类DNA探针能发生特异结合,但重组WPBF和含“TGCAAAG”基序DNA探针的结合强度高于其和含“TGCAAG”基序DNA探针的结合。【结论】建立了优化的WPBF原核表达系统,并获得具有生物活性的重组蛋白;重组WPBF能与HMW-GS启动子来源的两种Prolamin-Like box特异性结合, 但结合能力存在差异。     

奶牛流产的病因及预防

流产是由于胎儿或者母体的生理过程发生扰乱,或它们之间的正常关系受到破坏,而使怀孕中断。一般认为,妊娠奶牛有3%～5%的流产率是正常的现象。但任何一头     

营养物质对羊繁殖性能的影响与营养性不育的诊治

1 营养物质对羊繁殖性能的影响 1．1 碳水化合物 碳水化合物是动物日粮的主要成分。母羊发情前后如果日粮能量水平高,可增加其排卵率,对妊娠早期胚胎的存活无不良影响。如果母羊增重过快或消耗的能量过多,会使受胎间隔延长。为了提高繁殖性能,对产后母羊应供应较高的能量,以避免失重过多,但摄入的能量应该逐渐增加,否则会引起肥胖。     

小麦胁迫响应转录因子基因TaSNAC1的克隆与表达分析

胁迫响应NAC转录因子参与植物非生物胁迫过程,过表达水稻(Oryza sativa)SNAC1可显著提高植株耐旱、耐冷和抗盐性。本研究同源克隆了小麦(Tricum aestivum)TaSNAC1基因(GenBank登录号No.JN621240),分析了其表达产物的亚细胞定位,并利用实时定量RT-PCR分析了其在不同组织、PEG和NaCl胁迫下的表达。该基因包含一个内含子,编码329个氨基酸残基的蛋白产物。TaSNAC1与其他禾本科植物SNAC1蛋白高度相似,其与大麦(Hordeum vulgare)、二穗短柄草(Brachypodium distachyon)、水稻、玉米(Zea mays)和高粱(Sorghum bicolor)SNAC1序列相似性依次为97.3%、86.3%、81.1%、79.1%和79.2%。TaSNAC1可能以二聚体形式存在,包含核定位信号和典型的NAM结构域,100~107位的"WKATGXDK100-107"核心基序处于一段β折叠中,其弯曲产生的凹面可能直接参与DNA结合。瞬时转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)叶肉细胞原生质体的实验表明,TaSNAC1特异定位于细胞核中。盐胁迫条件下,叶和根中TaSNAC1的表达量均升高,且表达模式相似,但根中响应更显著;PEG胁迫下,根中TaSNAC1对胁迫的响应较快且幅度较大,而叶中响应较慢且幅度较小。研究结果提示,TaSNAC1参与小麦的非生物胁迫响应过程,在耐旱、抗盐遗传改良中具有潜在应用价值。     

上流式厌氧污泥床(UASB)处理皂素废水的研究

采用上流式厌氧污泥床(UASB)进行了常温条件下皂素废水的处理研究。结果表明,UASB处理工艺以消化污泥为接种污泥,进水化学需氧量(COD)浓度为4000～6000mg/L,有机负荷为13～25kg/(m3·d),水力停留时间(HRT)为5～7h时,COD去除率可达到70%以上,同时最大产气率为0.34m3/kg,甲烷含量为60%左右,取得了较好的试验效果。