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利用PCR技术从弓形虫RH株基因组中扩增出SAGⅠ部分基因片段,亚克隆入表达载体pGEX-KG,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳显示表达的重组蛋白的分子量为56ku。免疫印记分析显示此表达产物能被猪抗弓形虫阳性血清所识别,表明该重组蛋白具有免疫反应活性。为进一步进行弓形虫病的免疫预防和诊断研究奠定了基础。 相似文献
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柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)是一种严重危害养鸡业健康发展的高致病性原虫,致密颗粒蛋白(dense granule proteins, GRAs)是顶复合器门原虫胞内寄生重要功能蛋白,具有较高的免疫学应用价值,然而目前尚未有关于球虫致密颗粒蛋白的确切报道。为发掘柔嫩艾美耳球虫GRAs并研究其功能,采用生物信息学、分子生物学、免疫学等技术从E.tenella北京株中鉴定到2种假定致密颗粒蛋白(hypothetical dense granule protein, hEtGRA)hEtGRA12、hEtGRA9,并用纯化后的蛋白分别免疫小鼠制备多克隆抗体,用ELISA、Western blot方法检测2种蛋白的抗原性。分子克隆结果表明,hEtGRA12、hEtGRA9基因编码区长度分别为1 188、1 110 bp,分别编码395、369个氨基酸,与其他顶复合器门原虫致密颗粒蛋白GRA12、GRA9物种间相似性分别为28.8%~39.6%、27.5%~29.5%;SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rhEtGRA12、rhEtGRA9条带大小分别为63.6、67.0 ku;... 相似文献
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利用RP-HPLC指纹图谱技术评价中草药添加剂的质量研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为寻求控制一种新的防控猪高热综合征中草药饲料添加剂质量的有效方法,本研究采用反相高效液相色谱指纹图谱技术评价中草药添加剂质量,并对其主要成分定量分析方法进行探讨。液相色谱的条件为:Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)和Agilent保护柱,柱温25℃,流速1 mL/min,以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为280 nm。通过对黄芩苷、橙皮苷、甘草苷对照品和12批次中草药饲料添加剂RP-HPLC指纹图谱的分析,建立了该中草药添加剂RP-HPLC指纹图谱,获得包括有甘草苷、橙皮苷和黄芩苷等相对稳定的15个共有特征峰。定量分析表明每克中草药添加剂样品中平均含量黄芩苷为(8.488±1.084)mg,橙皮苷为(6.321±0.379)mg,甘草苷(0.218±0.157)mg。本研究建立的定性和定量检测方法可用于新的中草药添加剂的质量检测。 相似文献
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[目的]探究泾河流域生态系统服务权衡/协同关系的尺度异质性,阐明权衡/协同关系在子流域尺度发生变化的主要原因,为黄土高原地区的生态保护和高质量发展提供科学参考。[方法]利用SWAT模型、CASA模型、InVEST模型等量化粮食供给、土壤保持、产水、固碳、生境质量5种生态系统服务,并采用空间相关性统计方法从全流域和子流域两个尺度上进行生态系统服务及两两之间权衡/协同关系的尺度异质性研究。[结果](1)泾河流域粮食供给服务在流域东南部较强;土壤保持服务在流域北部、中部较弱,在西南部、东南部较强;产水服务在流域西部、南部以及东南部较强,在北部、东北部及东部地区较弱;固碳服务流域南部强于北部,东部强于西部;生境质量以中值区和高值区为主,其高值区主要分布在流域东部、东南部及西部,低值区主要分布在建设用地。(2)从全流域尺度来看,粮食产量和土壤保持、产水量、NPP和生境质量以权衡关系为主;土壤保持和产水量、NPP和生境质量以协同关系为主;产水量和NPP是协同关系为主,和生境质量是权衡关系为主;NPP和生境质量是以协同关系为主。(3)泾河流域生态系统服务之间的权衡/协同关系在部分子流域发生改变,土地... 相似文献
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注射缓释中草药防治兔球虫病的试验结果表明,兔粪便中球虫卵囊的减卵率随中草药缓释剂注射剂量的增加而增加,注射中草药缓释剂2.0 ml/只的第3组平均减卵率超过了口服药物的第5组(饲料中含0.0125%氯羟吡啶或地克珠利0.003%)和第6组(饲料中含1%中草药散剂),而不用抗球虫药的第4组球虫卵囊比试验前增加了(232.8±72.3)%。第3组兔的平均增重(1.48±0.14)kg分别比第1组(注射中草药缓释剂1.0 ml/只)、第2组(注射中草药缓释剂1.5 ml/只)和第4~6组提高了17.5%,11.3%,102.7%,13.0%和13.8%;料重比(2.34)分别下降了33.7%,22.3%,58.7%,19.9%和21.2%。第1~6组兔死亡率分别为16.7%,0,0,16.7%,8.3%和58.3%。2.0 ml/只中草药缓释剂组的经济效益分别比口服西药组和口服中草药散剂组提高62.5%和83.7%,而不用抗球虫药组每养一只兔要亏损6.31元。以治疗量3倍的大剂量中草药缓释剂注射兔,没发现兔有中毒症状、局部炎症或组织病变。说明供试中草药缓释剂对兔是安全的。 相似文献
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为了得到重组的日本血吸虫22.6 ku膜相关蛋白,研究设计了1对引物,以日本血吸虫mRNA为模板,用RT-PCR方法克隆了576 bp的22.6 ku膜相关蛋白基因片段,测序结果表明,该片段与已公布的Sj22.6基因序列(U75510)同源性达到99%。将该基因片段插入原核表达载体pGEX-KG构建了原核表达质粒pGEX-Sj22.6,在大肠杆菌BL21 codn plus中表达获得了约48 ku的融合蛋白,经Western-blot检测,该重组蛋白具有良好的免疫原性。 相似文献
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48只经粪检球虫卵囊阳性的仔兔均分为4组,第1组兔注射中草药缓释剂,饲喂无抗球虫药饲料;第2组兔拌料口服氯羟吡啶或地克珠利;第3组拌料口服中草药散剂;第4组兔不用任何抗球虫药为对照组。2个月内定期粪检球虫卵囊,结果用药组平均减卵率分别为96.8±2.3%、90.2±3.5%和93.2±3.2%,对照组球虫卵囊比试验前增加了232.8±72.3%。试验期间各组兔的平均增重分别为1.48±0.14 kg、1.31±0.11 kg、1.30±0.14 kg和0.73±0.06 kg;料重比为2.34、2.92、2.97和5.67;死亡率分别为0、16.7%、8.3%和58.3%;用药组的经济效益分别为18.13元/只、11.16元/只和9.87元/只,对照组每只亏损6.31元。试验期2个月,各组兔的球虫病防治成本分别为0.14元/只、0.19元/只、2.20元/只和0元/只;使用中草药缓释剂防治兔球虫病比口服中草药散剂可节省中草药原料用量90%以上。 相似文献