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编码鸡CD8α链无信号肽基因片段的克隆与表达 总被引:2,自引:0,他引:2
应用RT-PCR技术,通过自行设计的1对引物以ConA诱导的鸡胸腺淋巴细胞RNA为模板,扩增出编码鸡CD8α链的无信号肽基因片段,大小为651 bp.该片段经酶切初步鉴定后,被插入pMD18-T载体进行测序,发现与已发表的鸡CD8α链基因序列的同源性达98%.进一步将该片段插入原核表达质粒,构建pGEX-4T-1-CD8α,并转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导培养并提取表达蛋白质.在SDS-PAGE电泳图谱中可见大小约为50 000的蛋白带,表明所克隆的编码鸡CD8α链无信号肽基因片段在原核细胞中得到表达. 相似文献
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目的 为较全面了解凤台县山羊感染球虫的种类,进行了本调查。方法 采用饱和盐水漂浮、重铬酸钾培养等方法,对凤台县112头山羊粪样进行了检查。结果 山羊球虫感染率为94.64%(106/112)。共查获10种艾美耳球虫,即雅氏艾美耳球虫(Eimerianinakohlyakimovae);阿氏艾美耳球虫(E.arloingi);浮氏艾美耳球虫(E.fau-rei);小型艾美耳球虫(E.parva);阿撒他艾美耳球虫(E.ahsata);槌型艾美耳球虫(E.crandallis);颗粒艾美耳球虫(E.granulosa);克氏艾美耳球虫(E.christenseni);苍白艾美耳球虫(E.pallida)和山羊艾美耳球虫(E.caprina)。结论 当地山羊感染的艾美耳球虫的优势种为雅氏艾美耳、阿氏艾美耳、浮氏艾美耳和小型艾美耳球虫,在4个调查点这几种球虫所占的感染比例最大,分布广泛。 相似文献
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鸡γ-干扰素基因的克隆与原核表达 总被引:11,自引:2,他引:9
应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过一对自行设计的引物,从经ConA诱导活化的鸡脾淋巴细胞的RNA中扩增出一特异性基因片段,其大小约为500 bp.该片段经酶切和测序鉴定为鸡IFN-γ基因.将其插入原核表达载体pGEX-4T-1, 并导入大肠杆菌BL21细胞中,经IPTG诱导培养,获得分子量约为43 000的蛋白带,表明所克隆的CHIFN-γ基因在原核细胞中得到表达. 相似文献
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通过PCR扩增和一代测序技术获得麦鱼(Rhinogobius sp.)线粒体基因组全序列,并对其序列结构进行了分析。结果表明:1)麦鱼线粒体基因组全长16 511 bp,其碱基G+C的含量为47.7%,A+T的含量为52.3%,呈现AT偏好性;2)共含有蛋白质编码基因13个,rRNA基因2个,tRNA基因22个和D-loop区,除ND6、tRNA-Gln、tRNA-Tyr、tRNA-Ala、tRNA-Asn、tRNA-Cys、tRNA-Ser、tRNA-Glu、tRNA-Pro基因在L链上编码之外,其他基因均在H链上进行编码;3)基于线粒体基因组全序列和Cytb基因,分别构建了鰕虎鱼类中部分属的进化树,其表明麦鱼与波氏吻鰕虎鱼、褐吻鰕虎鱼、子陵吻鰕虎鱼聚在一个分支上,均属于吻鰕虎鱼属,并且其与波氏吻鰕虎鱼的亲缘关系最近。 相似文献
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