编码鸡CD8α链无信号肽基因片段的克隆与表达 |
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作者姓名: | 谢国化 鲍鸣 仲大莲 余为一 李槿年 |
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作者单位: | 安徽农业大学动物科技学院,合肥,230036;中国科学技术大学生命科学学院,合肥,230026 |
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摘 要: | 应用RT-PCR技术,通过自行设计的1对引物以ConA诱导的鸡胸腺淋巴细胞RNA为模板,扩增出编码鸡CD8α链的无信号肽基因片段,大小为651 bp.该片段经酶切初步鉴定后,被插入pMD18-T载体进行测序,发现与已发表的鸡CD8α链基因序列的同源性达98%.进一步将该片段插入原核表达质粒,构建pGEX-4T-1-CD8α,并转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导培养并提取表达蛋白质.在SDS-PAGE电泳图谱中可见大小约为50 000的蛋白带,表明所克隆的编码鸡CD8α链无信号肽基因片段在原核细胞中得到表达.
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关 键 词: | CD8α 鸡 克隆 原核表达 |
文章编号: | 1672-352X(2006)01-0056-05 |
收稿时间: | 2005-10-06 |
修稿时间: | 2005-10-06 |
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