一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定

本实验对患病鲤鱼进行病毒分离及鉴定,将表现典型锦锂疱疹病毒(KHV)病症状的鲤鱼肾细胞与单层框镜鲤鱼鳍细胞(KFC)共培养,5d～6d后出现典型的KHV细胞病变,即细胞体积增大并出现空泡化;在电镜下观察到典型的KHV病毒粒子;并应用PCR方法扩增获得KHV ORF25基因的849bp基因片段,连接至pMD18-T载体中,经酶切鉴定后序列分析表明,与GenBank登录的3株KHV同源性均为99.9%,命名为KHV-cj.基因进化比较显示,与KHV-J株关系较近.将病毒培养物(10-6.75TCID50)腹腔注射接种实验鱼可使其100%发病,并且症状和病理变化与自然感染KHV的鱼一致,死亡率为75%.表明本研究在国内首次分离到KHV.     

大豆巢式关联作图(NAM)群体构建及花色和种皮色遗传分析

巢式关联作图(Nested Association Mapping, NAM)群体在作物学遗传与育种研究中具有广泛的应用。本研究在前期大豆种质资源评价基础上,利用35份不同地区来源的代表性种质与中豆41 (公共母本)杂交,构建了一套大豆NAM群体。PCA和聚类分析发现,不同亲本组合的RIL群体基本聚在一起,显示出清晰的遗传结构。利用该NAM群体亲本间花色和种皮色具有显著差异的RIL群体进行全基因组关联分析,定位到1个主要位点qFC13-1与花色显著关联,该位点与W1位点重合;定位到12个位点与种皮色显著相关,其中9个位点为3种以上方法共定位,3个位点为2种方法共定位,包括4个已知位点和8个新位点。研究结果表明,构建的NAM群体适于进行大豆相关性状遗传分析,为大豆复杂性状的遗传解析和育种实践提供了良好的基础材料。     

羊传染性脓疱病的流行及诊治

本文主要对羊传染性脓疤病在我国的流行病学、临床症状、病理变化、诊断和防治等方面进行了概述,以便对该病的诊断和防治提供参考。     

鱼类白介素及其受体的研究

近年来,白介素作为鱼类重要的免疫细胞因子,已进行了广泛研究,相继获得鲤(Cyprinus carpio)和小斑点猫鲨(Scyliorhinus canicula)的IL-1β全长基因及虹鳟(Oncorhynchus mykiss)的IL-1β受体基因、河鲀(Takifugu rubripes)IL-4和斑马鱼(Danio rerio)IL-4基因及其受体、鲤IL-10基因。本文综述了IL-1β、IL-4、IL-10基因的克隆与表达等最新资料。     

鲤疱疹病毒3型研究进展

正鲤鱼是人类最廉价的优质蛋白获取源之一,提升鲤鱼产量可以在一定程度上解决全球粮食问题。锦鲤色彩艳丽、身姿矫健,是观赏鱼中的佼佼者,备受世界宠物爱好者的喜爱。锦鲤疱疹病毒病(Koi herpesvirus disease,KHVD)是会使鲤鱼、锦鲤及其变种大量死亡的疾病,大面积暴发该病时死亡率为80%~100%,因其较高的发病率和死亡率广受世界关注。一、病原体锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV)又称为鲤科疱疹病毒3型(Cy HV-3),是KHVD的致病源。KHV来     

犬瘟热病毒疫苗株H蛋白基因片段的克隆与表达及表达产物抗原性的初步鉴定

根据发表的犬瘟热病毒（CDV）参考株Ondetstepoort的序列设计一对引物,以CDV感染的Vero细胞总RNA为模板,经RT-PCR扩增得到549bpDNA片段,将该片段以正确的阅读框架定向克隆于pGEX-4T-1中,然后将重组质粒转化宿主菌Rosetta^TM,在37℃、1．0mmol／LIPTG诱导下外源基因获得良好表达。经SDS．PAGE鉴定,表达的融合蛋白约46ku,与预期值一致。Westernblot试验显示,CDV免疫的小鼠血清可特异的识别该重组蛋白,表明该重组蛋白具有一定的免疫原性。     

怎样贮存草木灰

<正> 草木灰是好的速效钾肥。但是,近几年来广大农民只注重在责任田里施用氮磷肥,忽视施用钾肥,把草木灰浪费掉,或是不能很好的贮存起来。为了提高作物产量,要充分利用草木灰,增加钾肥来源。因此,在保存草木灰时,要注意以下几点:     

锦鲤疱疹病毒-CJ株ORF136基因的原核表达及免疫原性研究

为了研究能有效预防锦鲤疱疹病毒的疫苗,本文研究克隆了锦鲤疱疹病毒ORF136基因,并构建重组质粒PET32a-ORF136,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测获得含his标签大小为36.4kDa的蛋白条带。蛋白纯化后免疫鲤鱼,不同天数采血收集血清用间接ELASA检测抗体水平。结果显示：用10ug/尾、20ug/尾和40ug/尾的蛋白免疫后均可检测到KHV的抗体,用PET32a-ORF136表达的蛋白20ug/尾和40ug/尾的蛋白免疫后的抗体水平比10ug/尾剂量蛋白免疫后的抗体水平高但差异不显著（p＞0.05）。     

一例冰下低温爆发的锦鲤疱疹病毒病的鉴定

2013年4月初低温下,吉林省白山地区某网箱养殖场鲤（Cyprinus carpioL．）大量死亡,病死鲤无明显临床病变。采用PCR扩增技术检测了这些病鱼,结果表明,该低温爆发的疾病为锦鲤疱疹病毒病（KHVD）。这种病常爆发在水温为18-28℃的春秋季,冰下爆发还未有报道。本次锦鲤疱疹病毒病的鉴定,对于锦鲤疱疹病毒感染鲤温度条件的变化和疾病的预防提供了参考。