FKBP38条件性基因敲除胚胎干细胞株的建立

[目的]通过电转的方法,建立FKBP38细胞株.[方法]对自制的MEF细胞进行MMC处理,从而得到Feeder细胞,并在Feeder细胞上培养ES细胞.[结果]通过电转的方法,将FKBP38载体转入ES细胞中,经G418,Ganc筛选克隆和PCR检测,得到FKBP38阳性克隆.[结论] FKBP38 CKO胚胎干细胞株构建完成.     

猪圆环病毒Cap蛋白羧基端特异性单克隆抗体的制备

利用IPTG诱导表达含有猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白羧基端421-37nt的重组大肠杆菌pGEX-PCV421-37,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)粗分离,免疫BALB/c小鼠,利用PCV2感染PK15细胞筛选PCV2特异性单克隆抗体.共获得5株,腹水的IFA效价范围为1:1 600～1:8 000;除单抗26H5-A3为IgG1亚型外,32A8-G5、33G10-F4、12B5-G3和14E12-A6全部为IgM型;全部轻链都属κ型.     

免疫缺陷小鼠奇异变形杆菌的分离鉴定与药物治疗

从有腹泻症状的免疫缺陷小鼠体内分离出1株病原菌.对该分离菌株进行生化鉴定、16S rDNA测序和迁徙行为观察.经迁徙行为观察发现,该菌在1.5％LB上呈现弥漫性生长,在0.5％、1.0％的LB平板上的未见迁徙现象.该菌在DHL平板上的菌落特点与沙门氏菌相似,通过沙门氏菌手工生化鉴定、ATB细菌鉴定及16S rDNA分子测序比对证实该菌为奇异变形杆菌.通过药敏试验发现,该菌株对喹诺酮类药物敏感,抑菌圈直径为18～20 mm,而对多数药物中度敏感或不敏感.给腹泻小鼠饲喂喹诺酮类药物后,腹泻症状明显改善,发病率明显下降.该研究结果为奇异变形杆菌引起的免疫缺陷小鼠腹泻疾病的诊断和治疗提供了参考.