自动化工作站批量提取烤后烟叶 DNA 方法的建立与应用

为建立高效、快速、准确的烤后烟叶 DNA 提取方法,采用 BioMek NXP自动化工作站与国产DNA 磁珠法提取试剂盒相结合,建立了自动化批量提取烤后烟叶基因组 DNA（作为 PCR 模板）的方法,以获取高质量的烤后烟叶 DNA 满足 PCR 检测需求。结果表明：水浴时间30 min、样本量70～80 mg、80％乙醇洗涤4次能获得 OD260／OD280为1．7～1．9,浓度大于100 ng／μL 的烤后烟叶基因组 DNA,合格率达95．8％。经 PCR 定性扩增烟草硝酸还原酶基因（NR）,该方法所提的 DNA 溶液中无 PCR 反应抑制物残留,可直接用于 PCR 定性分析。烟叶粉末经预处理,取上清液上机后约110 min 可完成96份样品的 DNA 提取工作。     

复仇者的同与异:希思克利夫和仇虎──《呼啸山庄》和《原野》中男主人公之比较

希思克利夫和仇虎分别是英国女作家艾米莉?勃朗特的长篇小说《呼啸山庄》和中国剧作家曹禺的三幕话剧《原野》中的男主人公。本文在细读文本的基础上,对比分析两部作品男主人公的复仇故事、复仇目标和复仇心理以及复仇性质,指出希思克利夫的复仇虽然反映了身处社会下层的被侮辱、被损害者的反抗,但主要是出于个人恩怨;仇虎的复仇则超越了个人的恩怨,具有明显的阶级抗争意识。     

甲基磺酸乙酯（EMS）对萝卜早期发育性状的诱变效应

甲基磺酸乙酯（EMS）诱变育种有着诱变频率高、突变性状多及破坏性小等优点被广泛用于多种作物诱发突变育种。本研究利用不同浓度的EMS对不同品种的萝卜种子进行浸种处理后，发现EMS对萝卜的种子发芽率、萝卜苗根部长度及田间性状等指标上的诱变效应。研究结果表明随着EMS浓度（0．2％～2％）的增加，种子发芽率急剧降低且萝b苗期根长明显变短，整体呈显著的抑制生长作用。不同品种间对EMS的敏感度依次顺序为短叶-13〉夏抗40〉春白11-58〉双红一号。以半致死浓度为EMS浓度选择标准，确定了EMS处理不同品种萝卜间的适宜浓度为0．4％～0．6％。通过田间性状调查发现0．5％EMS处理短叶13萝卜种子下播大田后，相比对照处理品种表现子叶卷曲及撕裂、真叶增厚及黄化等情况，进一步表明EMS对短叶13萝卜存在的诱变效应。本研究确定了化学诱变剂EMS对萝卜诱变的半致死剂量，初步确认EMS对萝卜早期生长发育性状的诱变效应，将为后期的萝卜诱变育种研究提供研究材料和参考。     

烟草早期胚胎细胞观察方法研究

【目的】分析整体透明法和酶解分离法在烟草早期胚胎观察中的应用效果,为烟草细胞发育研究提供参考。【方法】分别采用整体透明法和酶解分离法对烟草早期胚胎细胞进行连续观察,分析两种方法的优缺点。【结果】采用整体透明法观察烟草胚胎,均可清晰观察到烟草的2-细胞原胚、4-细胞原胚至未分化的球形胚,而观察的早期球形胚基部胚柄不够清晰,且后期发育的胚胎不易观察。酶解分离法能够观察到烟草整个发育阶段的胚胎,即烟草2-细胞原胚、开始分化的球形胚、心形胚;但经二次酶解分离,从2-细胞原胚到16-细胞早期球形胚时期的胚胎细胞均存在质壁分离现象,而晚期胚胎未出现此现象。整体透明法具有操作简便、所需材料较少、具有原位地形学观察等优点,能够保持胚胎组织的原位性。酶解分离法耗时较短,但其胚胎细胞缺乏原位性,部分存在质壁分离现象,可获得独立的不包含母体组织的胚胎细胞。【结论】在烟草胚胎发育时期,可根据对不同时期胚胎研究的需要,合理选择适宜的观察方法;或结合整体透明观察法与酶解分离法对早期胚胎进行观察,提高烟草胚胎发生的连续观察效果。     

铁皮石斛分子生物学研究进展

铁皮石斛在“九大仙草”中名列魁首，具有增强免疫力、抗衰老、抗风湿、降血糖血脂等功效，其分子生物学领域的研究受到了广泛关注。开展对铁皮石斛的研究，不仅具有重要的科学意义，还具有重要的生态、经济价值。本文从铁皮石斛基因组学、转录组学、基因克隆与功能、转基因研究等方面对铁皮石斛的分子生物学研究进行综述，为加快分子生物学技术在铁皮石斛研究中的应用提供参考。     

基于全基因组鉴定与分析金钗石斛GRAS基因家族

【目的】探明金钗石斛(Dendrobium nobile)GRAS基因家族的结构与功能，为研究GRAS家族在金钗石斛生长发育过程中的功能提供参考。【方法】采用全基因组鉴定及分析技术对金钗石斛GRAS家族成员进行鉴定，并进行生物信息学和基因表达模式分析。【结果】金钗石斛基因组中有53个GRAS基因(DnGRAS1～DnGRAS53),大部分GRAS基因不含有内含子，仅DnGRAS1、DnGRAS5、DnGRAS9、DnGRAS10、DnGRAS19、DnGRAS37 6个GRAS基因有内含子，分布在PAT1、LISCL、SHR、SCR 4个亚族当中；金钗石斛GRAS基因不均匀的分布在染色体上，普遍存在于基因密度较高的区域，并未出现染色体内的串联重复现象，其中，仅有16对GRAS基因具有共线性，具有高度同源性；GRAS基因含有赤霉素响应、低温响应、生长素响应、防御与应激响应等与生长发育相关的顺式作用元件。DnGRAS21和DnGRAS39基因在根中表达最高，在茎、叶、花中也有不同程度表达。【结论】GRAS家族基因在根部表达量较高。推测GRAS家族基因可能在根中起重要的调控作用，从而影响金钗...