SSR技术在玉米种子纯度鉴定上的应用(上)

在对玉米种子纯度检测方法进行了广泛的调研与比较后,选定SSR方法进行优化研究,建立了新的玉米单株幼苗DNA提取方法,优化了操作系统,验证了技术的成熟性,筛选出了8对核心引物,用于192个杂交玉米组合的纯度检测工作,探索出了一套玉米种子纯度快速检测新方法.     

利用SSR技术快速准确鉴定杂交玉米种子纯度

利用一种快速、廉价的DNA提取方法,提取了两个玉米杂交种及其亲本的DNA用于SSR分子标记分析。分析结果显示,10对被分析的引物中有4对在两个杂交种双亲之间显示出多态性,可以用于相应的杂交种纯度分析。另外,分别利用同工酶技术和SSR分子标记技术同时分析了来自这两个杂交种的种子样品的纯度,分析发现,对于一个杂交种,两种方法都能可以鉴定,并且两者检测的结果是一致的,但是对于另外一个杂交种,由于其父母本非常接近,同工酶不能将其区分。因此,这些结果显示SSR分子标记技术可以很好地用于杂交玉米种子的纯度鉴定,即使是这个杂交种是来自两个非常接近的自交系的。     

玉米样品中转基因玉米Bt176含量检测

根据其检测特异性,转基因产品检测技术可分为筛选、基因、构建和转化体特异性检测四类.由于转化体特异性检测方法的具有高度特异性,目前,一些发达国家对于转基因产品检测方法正逐步过渡到转化体特异性序列的检测方法.本研究针对转基因玉米Bt176的外源基因3'端与玉米基因组DNA相接区序列设计具有转化体特异性的引物和荧光探针.利用实时荧光定量PCR,以已知Bt176含量样品为标准样品建立内外源基因标准曲线,利用该标准曲线对多个玉米样品Bt176玉米成分含量进行检测,结果显示该方法检测结果准确,检测特异性强,Bt176玉米检测极限浓度达到0.001 ng/μL.同时该方法操作简单,适合转基因样品大批量检测.     

多重引物SSR技术鉴定玉米杂交种子纯度的研究

采用热碱法提取玉米种子DNA,并且运用多重引物(3对SSR引物)PCR对其进行SSR扩增,进行种子纯度鉴定。结果表明:①利用热碱法可以实现玉米种子的DNA快速提取,同时降低了检测成本;②利用三重引物PCR技术降低了检测结果的误差,提高了检测结果的准确性。因此,将这两种技术结合起来,将极大地推动SSR技术在玉米种子纯度鉴定中的推广和应用。     

北京市杂交玉米种子质量现状问题及对策

<正> 随着我市种植业结构战略调整的不断深入,全市粮田面积逐年缩减。玉米播种面积已由2002年的8.7万公顷调减到2003年的5.7万公顷。但是玉米种子被誉为种业中的黄金产业,种子的经营企业和经营量在不断增加。北京市怀柔、密云和延庆3个山区县的玉米制种基地常年稳定在2000公顷左     

玉米品种酯酶同工酶酶谱纯度与田间品种纯度的相关研究

本文用酯酶同工酶电泳技术对北京市生产上的11个玉米杂交品种进行酯酶同工酶酶谱纯度测定,同时将被测定的杂交品种进行田间品种纯度检验。其酶谱纯度和品种纯度二者的回归方程Y=1.1288 0.9162x,相关系数γ=0.9094,对γ进行t测验结果为t=6.559>3.250。表明室内测定和室外检验结果之间存在着极显著的正相关关系。通过室内酶谱纯度测定结果,即可相应的对查出田间的品种纯度。     

AFLP标记技术在玉米种子真实性及品种纯度鉴定中的应用

本文利用AFLP方法对在农业生产上大面积推广使用的4个玉米杂交组合及其8个亲本共12个材料进行了分析研究，得到了清晰的DNA扩增指纹图谱。在AFLP分析当中，共采用了10个EcoRI 3／MseI 3引物组合，每个引物组合扩增出的条带数在62～95条之间，平均为85．3条。并从这10个引物组合中筛选出一个引物组合，能够用来对供试4个玉米杂交种进行真实性及品种纯度鉴定。从而证明了AFLP技术在玉米种子真实性及品种纯度鉴定中的可行性。该项技术应用于玉米种子真实性及品种纯度鉴定在国内尚属首次。其具有稳定性重复性好，检测分辨率高等优点．很适合于玉米种子真实性及品种纯度鉴定。是今后种子真实性及品种纯度鉴定的发展方向，应加大其研究力度。     

大豆加工产品中转基因成分的定量检测

根据转基因大豆的内源基因Lectin和外源基因CaMV35S的序列设计特异引物和探针,利用这些引物和探针,采用先定性后定量的方法对6份大豆加工产品转基因成分进行了定量检测.结果显示有两份样品含有转基因成分,其转基因成分含量分别为1.4%和0.4%.     

杂交玉米种子纯度SSR技术鉴定结果的分析

根据SSR位点共显性的特点筛选双亲互补的多态性引物，进而利用多态性引物对24份玉米杂交种样品进行纯度鉴定。同时对这些样品进行田间纯度种植鉴定，分析两种方法鉴定结果的一致性。结果显示，SSR分子标记鉴定的结果与田间种植鉴定结果差异不显著，可以替代田间种植鉴定进行玉米杂交种纯度鉴定。     

应用SSR技术对西瓜种子进行品种纯度鉴定的研究

本试验以4个西瓜杂交种和8个亲本为试验材料，建立了西瓜单粒干种子DNA快速提取方法，筛选出了能够区分4个杂交种与双亲，并具有互补带型的SSR引物，建立了适于SSR分子标记检测西瓜种子品种纯度的反应体系。试验结果证明，这套检测技术体系可用于西瓜杂交种品种纯度室内快速鉴定，从而为SSR分子标记技术在西瓜种子纯度鉴定中的应用和推广打下了坚实的基础。