转基因枳橙中GA20ox1与rol基因互作关系的研究

为分析转rol ABC基因枳橙GA20ox1基因与rol基因表达的互作关系,进一步阐释其矮化性状形成的分子机制。以转rol基因枳橙实生苗为试验材料,研究其对赤霉素的敏感反应,用荧光定量RT-PCR分析GA20ox1基因和rol基因的表达,并检测幼芽中POD酶活性和植物内源激素含量的变化。结果表明转rol基因枳橙既不属于GA缺陷型,也不属于GA不敏感型,喷施GA3能促进其茎伸长生长,但恢复不到野生型水平,幼芽中IAA（P<0.01）、GA1和GA4（P<0.05）显著降低,POD酶活性显著提高（P<0.01）。转rol基因枳橙幼芽中GA20ox1基因mRNA水平相比对照显著下调（P<0.01）。B、D系与野生型嫩茎中无明显差异,B、D系老叶中明显降低,E系中嫩茎和老叶中均明显增加。B、D和E系嫩叶中GA20ox1基因转录表达均较野生型高。在幼芽、嫩茎中,rol C基因与GA20ox1表达负相关。rol基因通过在幼芽中的高表达下调了GA20ox1基因转录表达,进而抑制了活性GAs在幼芽中的合成,顶端分生组织较低量的活性GAs限制植物茎伸长,在转rol ABC基因枳橙矮化性状建成中发挥重要作用。     

一种正在驯化利用的珍贵野生水果-木通

木通是原产我国长江流域及其周围地区的一种野生水果，主要有三叶木通、白木通及木通三个种类（亚种）。木通具有果实较大、早结丰产、风味品质优异、适应性强等诸多优良性状，但存在果皮较厚、种子偏多、可食部分较少等问题。木通又是一种传统中药，具有清热利尿、通经活血、消除色斑、败毒抗癌等多种药用功能。木通可用作鲜食果品、食品加工、护肤品以及药物开发。为此，我们正全面开展木通驯化利用研究，包括品种选育、栽培技术、贮藏保鲜技术、加工技术及相关的基础性研究。为便于木通的商业化开发，已注册了“和欢果”和“Joyfruit”的中、英文商品名。     

大果灵在翠玉猕猴桃上应用效果的评价

以翠玉猕猴桃为试材,系统地研究了大果灵对果实发育、果实品质、贮藏性及枝蔓生长与花芽形成的影响。结果表明,喷施大果灵可使单果重增加约12%,但却显著降低可溶性固形物含量和风味品质,极大地加速贮藏过程中果实软化和腐烂速度,并导致果实变宽和畸形。同时,施用大果灵的植株新梢基部异常膨大,节间缩短,大量基部芽当年萌发,并使翌年新梢上花量大幅度减少。鉴于大果灵对翠玉猕猴桃的严重负面作用,生产上不宜使用。     

夏季遮阴调控高温强光对猕猴桃生长与结果的影响

野生猕猴桃多分布于海拔较高的森林中,喜气候环境温和湿润.在人工栽培时,生态环境发生了较大的改变.在我国广大的猕猴桃产区,从6月底至9月初普遍存在持续高温天气,最高气温可达40 ℃,对猕猴桃生长和果实发育常造成较大的危害.其表现：一是严重落叶落果,落果率通常在20%左右,在某些年份,落果率可达70%以上;二是降低果实品质和贮藏性能.高温季节如遇上干旱则问题更为严重,甚至出现大面积植株死亡的现象.可以说,夏季高温强光的危害是制约我国猕猴桃发展的重要因素之一.     

转话TERF1糖橙耐旱性研究

对转TEBF1糖橙及其对照在干旱胁迫下的研究表明,随胁迫程度的加深,对照叶片出现萎蔫,光合作用能力下降,在重度胁迫（sRwc=10％）下,叶片脱落,生长趋于停止,叶绿素含量下降达50．0％。而转基因植株仅嫩叶轻度萎蔫,叶绿素含量下降25．9％;转基因植株脯氨酸（Pro）累积量增加明显,丙二醛（MDA）含量低于同期对照,保护性酶（CAT、POD、SOD）活力均强于同期对照植株。试验结果表明：转基因株系对干旱的抗性强于对照植株,其中转基因5号株系（TS）对干旱抗性最强。     

Ptcor8表达与枳生理落叶及温度的关系

将干径粗度相近的2年生枳实生容器苗60株从田间移入温室(20～25℃),以田间10株为对照.从2008年11月14日至2009年1月3日,每10d从温室随机搬出3株置于田间,研究枳叶片中Ptcor8的表达与枳生理落叶及环境温度的关系.结果表明,温室里的枳冬季不落叶;从温室搬至田间的枳,随着搬出温室时间的延后,其落叶期推迟;12月中旬后搬出温室的枳,即使经历冬季低温也不落叶.在落叶和未落叶的枳叶片中,均能检测到Ptcor8的表达,qPCR结果表明,Ptcor8的表达与枳的生理落叶无关,其表达量的明显增加与骤然降温和持续低温有关,与低温关系密切.     

红花檵木花叶芽变生物学特性

对红花檵木'密枝攻红'及其3份花叶芽变材料,通过病毒学初步鉴定、叶片解剖、叶片色素含量和光合特性差异分析,研究其花叶现象和部分植物学特性.结果表明:1)'密枝玫红'及其3份花叶芽变材料的组织浸提液接种的黄豆、黄瓜、辣椒、番茄及红花檵木均生长良好,无病毒浸染症状;透射电镜观察没有看到病毒颗粒;2)3份花叶芽变材料可以通过扦插繁殖保持芽变特性,在湖南地区可露地栽培,抗病虫能力强;3)叶片厚度、上表皮细胞厚度和下表皮细胞厚度在4份供试材料之间差异显著;4)叶片的类胡萝卜素和花色素苷含量在3份花叶芽变材料之间差异显著,且花叶芽变材料的净光合速率高于母株;5)3份花叶芽变材料不仅在叶色方面明显区别于母株,在花色方面也有不同,这些新类型的出现丰富了红花檵木现有种质资源的叶色、花色类型,特别是2号芽变材料的花朵出现明显的红色和乳白色的嵌合,有可能成为新的优良品种资源.     

转基因甜橙定量PCR分析体系的建立

以转pthA-nls基因甜橙45d叶龄叶片、枳橙的根、茎、叶不同器官以及非转基因枳、枸橼、温州蜜柑、沙田柚的45d叶龄叶片为试材,采用SYBR Green Ⅰ荧光染料法,检验不同柑橘类型以及枳橙不同器官中β-actin基因表达的稳定性,并以β-actin基因内参基因对pthA-nls庙基因在转pthA—nls基因甜橙中的表达量进行分析。结果表明：β-actin基因在柑橘的不同类型及同一类型的不同组织中表达均较恒定,可作为内参基因用于柑橘基因的定量PCR分析;同时,试验还应用建立的方法体系分析转dthA-nls基因甜橙,基本明确各转基因株系中目的基因表达水平。     

枳橙CPMAX2基因的克隆、载体构建及其表达研究

转rolABC基因枳橙莲座状分枝、矮化性状突出。为探索其侧枝生长的植物激素调控机制,通过RT-PCR法从枳橙中克隆到独脚金内酯信号转导关键元件CPMAX2基因,分析了该基因在转rolABC基因枳橙腋生嫩叶中的转录表达,构建了CPMAX2植物过表达载体。研究表明：CPMAX2与甜橙中同源基因一致性为99.66%,编码694个氨基酸,具有一个典型的F-box蛋白结构域和两个LRR重复区,与甜橙MAX2氨基酸序列一致性为99.14%。CPMAX2在转rolABC基因枳橙3个株系腋生嫩叶中的转录表达均比野生型显著下调。试验表明CPMAX2在转rolABC基因枳橙莲座型分枝生长中扮演重要角色。     

农杆菌介导phyB基因转化枳壳研究

以枳壳(Poncirus trifoliate (L. ) Raf.)实生苗上胚轴为试材,利用农杆菌介导法将光敏色素基因phyB导入其中,建立了枳壳实生苗的遗传转化体系,共获得27株抗性植株,PCR检测结果表明其中有5株扩增出phyB基因的特异目的带;RT-PCR分析结果表明 phyB基因在phyB3,phyB4株系枳壳基因组中能表达;Li-6400光合测定仪对转基因枳壳进行的光合特性测定结果显示,转基因枳壳光合效率高于对照;转phyB基因枳壳植株在形态上与对照也存在差异,表现出植株矮化、节间缩短、叶面积变小.