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Taq DNA聚合酶制备技术的优化 总被引:2,自引:0,他引:2
以酶蛋白表达量、酶活性和比活性为指标 ,从工程菌菌株、转化方法、诱导表达时间、诱导剂浓度 4个方面 ,对TaqDNA聚合酶制备技术进行了优化筛选。用JM 1 0 9菌株制备的总酶活力高于DH5α ,电击法的转化率高于热激法 ,用 1 0mmol/LIPTG诱导 1 2h ,酶蛋白表达量、酶活性和比活性均显著高于其他浓度和时间的处理。SDS PAGE电泳和PCR扩增结果表明 ,用优化技术制备的TaqDNA聚合酶 ,纯度、酶活力和特异性均达到分子生物学实验的要求 ,各项指标优于市售商品酶 相似文献
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AT-hook基因AHL27过量表达延迟拟南芥开花 总被引:1,自引:0,他引:1
拟南芥中有29个被称为AHL的蛋白质 (AT-hook motif nuclear localized protein),但是大多数AT-hook蛋白的功能未知,其中AHL27蛋白含有一个AT-hook基序和一个PPC结构域。AHL27在不同器官的mRNA表达和GUS 组织化学染色分析表明,AHL27主要在根和花中表达;GFP-AHL27亚细胞定位显示AHL27蛋白是一个核定位蛋白。AHL27基因的过量表达,可抑制开花基因FT的表达,同时促进FLC的表达,从而延迟拟南芥在长日和短日条件下的开花时间。研究表明,AHL27基因在拟南芥的生长发育中起重要作用。 相似文献
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AT-hook是一类新的DNA结合蛋白基序,与其他功能已知的DNA结合基序不同,AT-hook基序具有以精氨酸-甘氨酸-精氨酸-脯氨酸(RGRP)四个残基为中心的特征结构。AT-hook蛋白与DNA的特异结合是通过AT-hook基序的氨基酸残基与双链DNA小沟中富含AT碱基的区域相互作用完成的。AT-hook基序广泛存在于不同物种的DNA结合蛋白中,AT-hook蛋白在染色质结构组装和对目标基因转录活性的调控中起着重要的作用,进而影响生物的生长发育。 相似文献
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