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鉴定强启动子可为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)代谢工程育种及重组蛋白生产提供高效的基因表达调控元件,但谷氨酸棒杆菌内源性强启动子的鉴定鲜有报道。本试验进行谷氨酸棒杆菌ATCC13032菌株细胞全蛋白二维电泳并对高表达蛋白质斑点进行质谱分析,选取分子量大小约为30 kDa、等电点约为4.6的斑点作为研究对象,分析其所对应蛋白编码基因的启动子。启动子预测结果表明,谷氨酸棒杆菌Cgl0864基因启动子P0864转录活性强。将强启动子Ptac-M和启动子P0864分别插入启动子探测载体pDXW-11,转化ATCC13032菌株感受态细胞,获得工程菌株C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M和C. glutamicum/pDXW-11-P0864。氯霉素耐受性试验结果显示,菌株C.glutamicum/pDXW-11-Ptac-M和C.glutamicum/pDXW-11-P0864的氯霉素耐受性分别为30和40μg/mL;报告蛋白CAT氯霉素酰基转移酶活性检测结果显示,C.glutamicum/pDXW-11-Ptac-M和C.glutamicum/pDXW-11-P0864菌株细胞抽提物上清液CAT蛋白氯霉素酰基转移酶比活力分别为4.50和6.12 U/mg;氯霉素乙酰基转移酶基因cat转录水平的荧光定量PCR试验检测结果显示,cat基因在启动子P0864的控制下,其转录水平是在Ptac-M控制下转录水平的1.84倍。以上结果表明,谷氨酸棒杆菌Cgl0864基因启动子P0864是强启动子。 相似文献
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[目的]分析二倍体野生种草莓的核型,为探讨草莓的起源、进化及遗传育种研究提供依据。[方法]对草莓属(Fragaria)植物4个二倍体种森林草莓(F.vesca L.)、纤细草莓(F.gracilis A.Los.)、黄毛草莓(F.nilgerrensis Schidl)和五叶草莓(F.pentaphylla A.Los.)进行了核型分析。[结果]纤细草莓的核型为2n=2x=14=10m+2sm+2m*,属1B类型;黄毛草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型;五叶草莓为2n=2x=14=12m+2sm,属1A类型;森林草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型。[结论]草莓二倍体及品种核型对称性为:黄毛草莓〉森林草莓〉五叶草莓〉纤细草莓,供试草莓种的亲缘进化顺序可能为黄毛草莓、森林草莓、五叶草莓、纤细草莓。 相似文献
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草莓属植物染色体核型分析 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]分析二倍体野生种草莓的核型,为探讨草莓的起源、进化及遗传育种研究提供依据。[方法]对草莓属(Fragaria)植物4个二倍体种森林草莓(F.vescaL.)、纤细草莓(F.gracilis A.Los.)、黄毛草莓(F.nilgerrensis Schidl)和五叶草莓(F.pentaphylla A.Los.)进行了核型分析。[结果]纤细草莓的核型为2n=2x=14=10m+2sm+2m*,属1B类型;黄毛草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型;五叶草莓为2n=2x=14=12m+2sm,属1A类型;森林草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型。[结论]草莓二倍体及品种核型对称性为:黄毛草莓〉森林草莓〉五叶草莓〉纤细草莓,供试草莓种的新缘进化顺序可能为黄毛草莓、森林草莓、五叶草莓、纤细草莓。 相似文献
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