灰葡萄孢PKA编码基因在病菌生长发育和致病过程中的功能

为明确灰葡萄孢cAMP信号途径中蛋白激酶A的催化亚基基因pka1、pka2和调节亚基基因pkaR在病菌生长、发育和致病过程中的功能,本研究构建了灰葡萄孢pka1、pka2和pkaR基因的RNAi突变体,以野生型菌株BC22为对照,对pka1、pka2和pkaR基因的RNAi突变体的表型和致病力进行分析,发现pka1基因的RNAi突变体的生长速率明显减慢、菌丝细胞变短、分生孢子产量增加、致病力减弱,菌落颜色、形态以及穿透寄主组织的能力与野生型没有明显差别;pka2基因RNAi突变体的菌丝较野生型明显变细,分生孢子产量降低,生长速率、致病力和穿透寄主组织的能力与野生型没有明显差别;pkaR基因RNAi突变体的菌丝变细,生长速率减慢,分生孢子产量降低,致病力减弱,穿透寄主组织的能力与野生型没有明显差别。结果表明:灰葡萄孢pka1基因正调控病菌的生长、菌丝发育和致病力,负调控分生孢子的形成;pka2基因正调控病菌的菌丝发育和分生孢子的形成;pkaR基因正调控病菌的生长、菌丝发育、分生孢子的形成和病菌的致病力。     

灰葡萄孢BcKMO基因的原核表达分析

为构建灰葡萄孢犬尿氨酸单加氧酶(Bc KMO)基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的Bc KMO蛋白。以灰葡萄孢野生型BC22为试材,通过反转录PCR扩增Bc KMO基因,回收Bc KMO基因片段克隆到p MD19-T载体中,测序正确后,酶切p MD19-T-Bc KMO和带有GST标签蛋白的p GEX4T-1质粒,将目的片段进行连接,构建Bc KMO基因的原核表达载体p GEX4T-1-Bc KMO-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的原核载体转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与GST标签蛋白融合的Bc KMO蛋白,大小约71 k Da。SDS-PAGE分析表明,该蛋白在0.2 mmol/L IPTG诱导12 h时高效表达;Western Blot结果发现目的蛋白能与GST特异性抗体起特异性反应,表明Bc KMO基因的体外诱导表达成功。     

草莓细胞悬浮培养条件优化及植株再生的研究

以不同基因型草莓花药为试材,建立草莓细胞悬浮系,研究结果表明:悬浮培养初期的褐化程度和褐化恢复的快慢可作为判别建成稳定悬浮细胞系的一个重要指标,并采用分步培养法获得了明旭的植株再生。     

草莓未减数配子形成的细胞学研究

 以自然产生 2n配子的二倍体新疆草莓为材料 ,采用常规压片的方法 ,观察了 2n花粉形成的细胞学过程。结果表明 ,草莓 2n花粉的形成主要是由于减数分裂过程中 ,中期Ⅱ两个纺锤体的定向发生改变所致 ,即由正常的十字形改变为平行形和八字形 ,进而导致二分体和三分体的形成。每个二分体将产生 2个 2n花粉 ,每个三分体将产生 1个 2n花粉和 2个n花粉。此外 ,还发现有极少量的 4n花粉 ,可能是四分孢子粘连、融合为一体的结果     

黄顶菊对几种作物生长影响的作用机理初步研究

在室内土壤盆栽条件下,探讨了黄顶菊对附近生长的萝卜、玉米、黄瓜和小麦植株生长的影响,结果发现,黄顶菊对供试4种作物种子的萌发以及株高和鲜重增长都有明显的抑制作用,其中对黄瓜、萝卜的抑制作用更强。研究还发现,生长在黄顶菊附近的萝卜、玉米、黄瓜和小麦根系活力明显低于对照,叶片的可溶性蛋白、叶绿素含量以及SOD、POD、CAT活力均低于对照,而丙二醛含量高于对照。结果预示黄顶菊可能通过根系分泌物对附近的作物施加影响。     

草莓属植物染色体核型分析

[目的]分析二倍体野生种草莓的核型,为探讨草莓的起源、进化及遗传育种研究提供依据。[方法]对草莓属（Fragaria）植物4个二倍体种森林草莓（F.vesca L.）、纤细草莓（F.gracilis A.Los.）、黄毛草莓（F.nilgerrensis Schidl）和五叶草莓（F.pentaphylla A.Los.）进行了核型分析。[结果]纤细草莓的核型为2n=2x=14=10m＋2sm＋2m＊,属1B类型;黄毛草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型;五叶草莓为2n=2x=14=12m＋2sm,属1A类型;森林草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型。[结论]草莓二倍体及品种核型对称性为：黄毛草莓〉森林草莓〉五叶草莓〉纤细草莓,供试草莓种的亲缘进化顺序可能为黄毛草莓、森林草莓、五叶草莓、纤细草莓。     

外来入侵植物黄顶菊的危害与防控

外来入侵植物黄顶菊对本地植物危害大,挤占原有生物生长空间,产生化感物质抑制农作物生长,破坏生物多样性,甚至还有可能产生更具侵染力的杂交后代,对生态环境和经济发展造成危害。对黄顶菊进行适时有效的综合防除非常必要,可通过萌发期清除、苗期化学防除、生长期人工铲除、秋冬早春防除加以控制。     

草莓属植物染色体核型分析

[目的]分析二倍体野生种草莓的核型,为探讨草莓的起源、进化及遗传育种研究提供依据。[方法]对草莓属（Fragaria）植物4个二倍体种森林草莓（F.vescaL.）、纤细草莓（F.gracilis A.Los.）、黄毛草莓（F.nilgerrensis Schidl）和五叶草莓（F.pentaphylla A.Los.）进行了核型分析。[结果]纤细草莓的核型为2n=2x=14=10m＋2sm＋2m＊,属1B类型;黄毛草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型;五叶草莓为2n=2x=14=12m＋2sm,属1A类型;森林草莓为2n=2x=14=14m,属1A类型。[结论]草莓二倍体及品种核型对称性为：黄毛草莓〉森林草莓〉五叶草莓〉纤细草莓,供试草莓种的新缘进化顺序可能为黄毛草莓、森林草莓、五叶草莓、纤细草莓。     

油桃设施栽培配套技术

油桃因其果面光滑无毛，外观艳丽夺人，兼具桃、杏、李的混合芳香，倍受人们的欢迎，并逐渐成为一种主要的鲜食类型。果品生产中早产、丰产、优质是竞争的主要因素，设施栽培实现了油桃的淡季供应，取得了较大的经济效益和社会效益，具有较大的潜力和广阔的应用前景，是发展高效农业的一条新途径。     

灰葡萄孢致病力增强突变体BCt98的突变基因分析

为获得灰葡萄孢的致病相关基因并研究其基因功能,筛选灰葡萄孢的T-DNA插入突变体库,获得了一株致病力增强的突变体BCt98。利用PCR和Southern Blotting技术,对突变体BCt98进行鉴定。利用TAIL-PCR技术结合生物信息学方法,确定了突变体BCt98中T-DNA插入位点位于BC1G_07014.1基因的第3个外显子上。利用RT-PCR技术,确定了突变体BCt98的突变基因为BC1G_07014.1。突变体BCt98生长速度较快,菌落颜色较浅,菌丝较为致密,不产生分生孢子和菌核,且胞壁降解酶(PMG、PG和Cx)及毒素活性较野生型明显增强。表明BC1G_07014.1基因在灰葡萄孢生长、发育和致病力调控方面发挥重要作用,且参与调控病菌的胞壁降解酶活性和毒素活性。