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分别以NDV F48E9和La Sota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8 h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mRNA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因.主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9~10 bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定.对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列.结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500 bp以内的条带,经测序后显示经NDV F48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 2有47 %同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关. 相似文献
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本研究采用体外发酵技术探讨产朊假丝酵母添加水平对奶牛瘤胃发酵参数及日粮营养物质消化率的影响。分别取添加产朊假丝酵母(0、3.3×106、1.65×107、3.3×107、1.65×108、3.3×108CFU/mL)的6个试验组日粮2 g,在体外混合30 mL瘤胃液和60 mL磷酸缓冲液,在39℃厌氧培养24 h。结果表明:产朊假丝酵母所有添加水平均对pH以及干物质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、纤维素和半纤维素的消化率没有显著影响(P>0.05);1.65×108、3.3×108CFU/mL添加水平较其他水平显著提高累积产气量(P<0.05);3.3×107、1.65×108、3.3×108CFU/mL添加水平较空白组显著提高了瘤胃氨态氮、总挥发性脂肪酸和丙酸的浓度(P<0.05),降低了乙酸及乙酸:丙酸值。试验表明,产朊假丝酵母在改善奶牛能量负平衡上具有良好的应用前景。 相似文献
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采用体外发酵技术探讨含酵母日粮的体外瘤胃动力学及瘤胃消化动力学.1.5 g/kg酵母添加到日粮(玉米秸秆50%+混合精料50%)中,在体外混合来于荷斯坦牛瘤胃液和磷酸缓冲液(1∶2)共90 mL,在39℃分别厌氧培养2、4、8、12、18和24 h.结果表明:1)瘤胃动力学:瘤胃pH随时间呈线性下降,其中8~12 h下降幅度最大;氨态氮质量浓度在4~18 h显著下降;瘤胃总挥发性脂肪酸(TVFA)量在前8 h有增加的趋势,12 h较8 h显著提高,12 h后TVFA没有显著提高;乙酸随时问有下降的趋势;丙酸4 h后显著上升;丁酸4 h后显著下降;异丁酸18 h后显著下降;戊酸12 h后显著上升;异戊酸随时间没有显著性变化.2)瘤胃消化动力学:产气量发酵后6 h增速较快,10 h达到高峰,14 h后以较快速度下降.日粮干物质、粗蛋白、中性洗涤纤维和半纤维素的消化率前8 h增速缓慢,8~12 h期间有较大的增速,但酸性洗涤纤维和纤维素消化率在12 h后开始表现出较大的增速.考虑到体外发酵技术和体内真实发酵有滞后时间,1.5 g/kg酵母日粮进入瘤胃6~10 h后有较大的降解速率,纤维素和酸性洗涤纤维在瘤胃降解主要集中在10 h后. 相似文献
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天津某规模猪场发生妊娠母猪流产、产死胎及部分仔猪发病的情况,为确诊病原,分别对流产胎儿的组织和母猪血清进行了实验室检测。流产胎儿的组织经PCR或RT-PCR检测,猪伪狂犬病毒(PRV)为阳性,猪圆环病毒(PCV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为阴性。经猪伪狂犬病毒野毒株实时荧光PCR检测胎儿组织为阳性,检测母猪血清中猪伪狂犬gE抗体为阳性;用病毒的分离培养试验分离到了猪伪狂犬病毒,根据临床症状、抗原抗体检测及病毒的分离培养试验确诊该猪场存在猪伪狂犬病毒野毒感染。 相似文献
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研究采用体外发酵技术,探讨活性干酵母添加水平对奶牛瘤胃发酵参数及日粮营养素消化率的影响,以明确较为合理的添加水平.6个酵母水平(0、0.5、1、1.5、2和2.5 g/kg)分别添加到日粮(玉米秸秆50%+混合精料50%)中,用90 mL来自荷斯坦奶牛瘤胃液和磷酸缓冲液(1:2)体外混合,在39℃厌氧培养24 h.结果表明:1.5 g/kg添加水平较对照组显著提高累积产气量和体外干物质消化率;1.5和2 g/kg添加水平较对照组显著提高粗蛋白消化率;酵母添加对中性洗涤纤维消化率、半纤维素的消化率、瘤胃总挥发性脂肪酸量、氨态氮质量浓度和pH没有影响(P>0.05);2.5 g/kg添加水平较1.5 g/kg添加水平显著降低酸性洗涤纤维消化率和纤维素消化率.酵母添加较对照组显著提高瘤胃丙酸含量及丙酸/乙酸比例. 相似文献
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丙酸杆菌对奶牛体外瘤胃发酵及日粮营养物质消化率的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本文采用体外法探讨丙酸杆菌不同添加剂量对瘤胃发酵及日粮营养物质消化率的影响。5个添加水平(0、3.0×104、3×105、3×106、3.0×107cfu/mL)分别添加到1.5 g(干物质)日粮(玉米秸秆50%+混合精料50%)中,在体外混合荷斯坦奶牛瘤胃液和磷酸缓冲液(1∶2)共90 mL,在39℃厌氧培养24 h。结果表明:丙酸杆菌对瘤胃pH、瘤胃氨态氮浓度、体外干物质、粗蛋白、酸性洗涤纤维、纤维素和半纤维素消化率影响不显著,但有降低中性洗涤纤维消化率的趋势;3×105、3×106cfu/mL有降低产气量的趋势;显著提高瘤胃总挥发性脂肪酸量、乙酸、丙酸和丁酸浓度,并显著降低乙酸∶丙酸值。结果显示奶牛日粮中添加丙酸杆菌能提高瘤胃总挥发性脂肪酸、丙酸、丁酸量,降低乙酸∶丙酸比值,但有降低中性洗涤纤维消化率的趋势,因此丙酸杆菌在转变奶牛瘤胃发酵向丙酸型发酵上具有良好应用潜力。 相似文献
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