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【目的】通过对猪(Sus Scrofa)金属硫蛋白1A(metallothionein-1A of S. Scrofa, SsMT-1A)和2A(Metallothionein-2A of S. Scrofa, SsMT-2A)的生物信息学分析、原核表达和纯化，研究它们与Zn(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)的结合特性。为饲料中添加Zn和Cu在促进猪生产性能的作用机制研究提供理论基础。【方法】首先，从NCBI中获得SsMT-1A和SsMT-2A的基因序列，利用ClustalX2和ExPASy分析两者的蛋白序列和结构差异，利用MEGA-X构建两者与其他物种MT蛋白分子的进化树。其次，构建pET-28a-SUMO-SsMT-1A/SsMT-2A原核表达载体，转化BL21(DE3)plysS，用IPTG诱导表达。利用Ni-NTA柱亲和层析和葡聚糖凝胶层析纯化重组蛋白。最后，利用大肠杆菌金属耐受性实验、圆二色光谱（circular dichroism, CD）、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser analytic ionization time of flight m... 相似文献
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