PRK基因原核表达质粒的构建

以拟南芥cDNA为模板,扩增出PRK基因,构建重组质粒pET-28a(+)-PRK转化大肠杆菌DH5α。经PCR鉴定和酶切鉴定筛选出阳性克隆,将阳性克隆的质粒转化到大肠杆菌表达载体BL21中,构建PRK基因原核表达载体。测序结果表明pET-28a(+)-PRK载体构建成功。     

GAPB基因原核表达载体的构建

以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a（＋）载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）。结果表明：成功构建了原核表达载体PET28a（＋）-GAPB,为后续的G...     

GAPC2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

研究采用PCR法以拟南芥cDNA为模板扩增GAPC2基因片段,克隆至原核表达载体PET28a（＋）上,经0．25、0．5mMIPTG分别在37℃和20℃诱导后,再使用SDS-PAGE电泳检测融合蛋白的表达水平。结果表明：原核表达载体PET28a（＋）-GAPC2构建正确,并且能在大肠杆菌BL21中成功表达,其融合蛋白分子量为37KD。     

GAPB基因原核表达载体的构建

以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功构建了原核表达载体PET28a(+)-GAPB,为后续的GAPB融合蛋白的表达以及纯化奠定了基础。     

不同桂花品种耐荫性研究

为探讨不同桂花品种的耐荫性,测定了不同强度的遮荫处理（30%,60%和90%）对3个桂花品种生理指标的影响。结果表明,在30%遮荫处理下,3个桂花品种间叶片相对含水量、POD活性差异不显著,比叶重、相对电导率、可溶性蛋白差异显著,九龙桂、早秋红的叶绿素a/b差异不显著;60%遮荫处理下,3个桂花品种间叶片相对含水量差异不显著,比叶重差异显著,九龙桂、早秋红的叶片相对电导率及可溶性蛋白差异不显著,九龙桂、淡妆的POD活性及叶绿素a/b差异不显著;90%遮荫处理下,3个桂花品种间叶片相对含水量、相对电导率差异不显著,叶绿素a/b、POD活性差异显著,淡妆、早秋红的叶片比叶重差异不显著,九龙桂、淡妆的可溶性蛋白差异不显著。通过对3个桂花品种的综合评价可知,在90%遮荫处理下,耐荫强弱顺序为：九龙桂＞早秋红＞淡妆。     

60Co γ射线辐照对转基因和非转基因烟草抗氧化酶活性的影响

以转pprI基因烟草植株为材料,研究了60Co γ射线辐照后转pprI基因烟草抗氧化酶活性及其基因转录水平的变化.结果表明,经0、100、200、300、400和500Gy60Co γ射线辐照后,转基因和非转基因烟草的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)3种抗氧化酶活性及其相应酶基因转录...     

棉花遗传转化过程中外植体对卡那霉素敏感性的研究

文章研究了以下胚轴为转化的外植体材料，根癌农杆菌介导的棉花遗传转化过程中，下胚轴、胚性愈伤组织（EC）、体细胞胚胎（胚状体）三种外植体不同的生长阶段，对卡那霉素（Kan）的敏感性差异。结果表明：体细胞胚胎（胚状体）对卡那霉素（Kan）最为敏感，下胚轴次之，胚性愈伤组织（EC）则最不敏感。     

NaCl胁迫对转IrrE基因烟草抗氧化酶活性的影响

文章主要研究了转IrrE基因烟草幼苗对NaCl胁迫的耐受性应答情况。结果表明,在200mmol/LNaCl胁迫下,其中野生型烟草随着胁迫时间的延长,POD、SOD、CAT三种抗氧化酶活性和可溶性蛋白的含量逐渐升高,处理24h后达到一个峰值,然后又逐渐降低,叶片的相对含水量一直逐渐降低,而转IrrE基因烟草幼苗三种抗氧化酶活性和可溶性蛋白持续上升,相对含水量先有所降低然后逐渐升高,5个生理指标均高于野生型烟草。因此,IrrE基因作为一种转录因子可能调控了盐胁迫相关基因的表达,从而提高了植物对NaCl胁迫的耐受能力。     

用根癌农杆菌介导EPSPS基因遗传转化拟南芥的研究

研究通过花序浸染法,NEPSPS因导入拟南芥（Arabidopsis thaliana）Col（Columbia）生态型植株中,通过卡那霉素对种子的抗性筛选及常规PCR对再生植株进行阳性鉴定。初步证明,EPSPS基因已经成功转化拟南芥,经过反复筛选,获得转基因纯系植株。     

PRK基因原核表达质粒的构建

以拟南芥cDNA为模板,扩增出PRK基因,构建重组质粒pET-28a（＋）-PRK转化大肠杆菌DH5α。经PCR鉴定和酶切鉴定筛选出阳性克隆,将阳性克隆的质粒转化到大肠杆菌表达载体BL21中,构建PRK基因原核表达载体。测序结果表明pET-28a（＋）-PRK载体构建成功。