山药染色体制片技术的优化

山药(Dioscorea opposite Thunb.)为药食兼用的常见蔬菜,而其染色体的研究相对滞后。以根尖为试验材料,分别考察不同的取材方式、预处理试剂、预处理方法以及解离方式对山药染色体制片效果的影响,筛选优化制片的关键技术,以期为今后细胞学研究打下基础。结果表明:室内基质培养块茎(或零余子)的方式获取的根尖中中期分裂相个数最多,且染色体分散良好的中期分裂相占的比例最高;适合于山药核型分析的预处理试剂为8-羟基喹啉同秋水仙素的混合液、8-羟基喹啉溶液,其中8-羟基喹啉溶液预处理后染色体缢痕更清晰,为最好的预处理试剂;预处理方法以低温4℃下2 mmol/L的8-羟基喹啉预处理2 h最好;采用酸解加酶解的方式解离效果明显好于单用酸解的方式,并且得到的制片中染色体形态清晰,96.3%的中期细胞的染色体分布于同一个水平面上。     

5个节旋藻样品基因组DNA含量的测定

本文以鄂尔多斯高原碱湖钝顶节旋藻A1、鄂尔多斯节旋藻A2、方胞节旋藻A3、引进的非洲Chad湖钝顶节旋藻A4和墨西哥Texcoco湖极大节旋藻A5为实验材料,采用CTAB-溶菌酶法提取其基因组DNA,紫外分光光度法测定DNA含量。结果表明：5个节旋藻样品的DNA含量在3.1184mg/g DW~19.9076mg/g DW范围内,含量高低排列是A4〉A2〉A1〉A5〉A3,不同样品DNA含量存在较大的差异。     

内蒙古中东部地区亚洲小车蝗3个种群的遗传多样性分析

为研究亚洲小车蝗不同地域自然种群的遗传变异及其分化,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对内蒙古中东部地区3个种群的亚洲小车蝗(Oedaleus decorus asiaticus Bei-Bienko)进行了遗传多样性分析.用21个随机引物对亚洲小车蝗3个种群扩增出的总位点数为252,总多态位点百分率为91.67...     

加拿大披碱草和老芒麦及其杂种F1,F2的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA技术(RAPD)对加拿大披碱草和老芒麦及其杂种F1,F2做了比较分析。旨在用分子标记方法探索亲本加拿大披碱草与老芒麦及其远缘杂种后代的遗传关系,为后期育种提供理论依据。结果表明:两亲本加拿大披碱草和老芒麦之间的亲缘关系较近,杂种F1主要表现为互补双亲的RAPD扩增带,同时还丢失了双亲部分的RAPD扩增带,杂种F1的多态性条带有偏向母本遗传的倾向;F1是真正的杂种;F2的多态性条带表明:F2与父母本的遗传距离相差不大,略偏向母本。亲本与杂种F1,F2的RAPD扩增带表型均具有一定的差异,RAPD遗传标记可用于杂种鉴定和目标性状植株的检测。     

浅黄根须腹菌γ-actin基因的克隆及表达分析

以油松的优良外生菌根真菌即浅黄根须腹菌为对象,用简并 PCR 法和 RACE 技术分离其γ－肌动蛋白基因( Rl-act)的全长 cDNA序列。该全长序列为1339 bp,包含一个1128 bp 的开放阅读框( ORF),编码375个氨基酸,5'端非翻译区(5'UTR)95 bp,3'UTR长度116 bp。Port Param 软件在线分析结果表明,该cDNA所编码的蛋白质理论等电点为5.01,相对分子质量为94.929 kD,具有真菌γ-actin 基因3个保守特征序列。Blast同源性检索结果表明,Rl-act序列与12种担子菌 actin 序列同源性均在97%以上,与同为外生菌根真菌的双色蜡蘑actin的亲缘关系最近。Rl-act基因在不同碳源及磷水平培养条件下表达量基本一致,验证了该基因作为分子内标的可靠性。