6株牛支原体分离株对鸡胚和小鼠的致病性研究

为通过复制不同牛支原体(Mycoplasma bovis)感染模型,筛选出毒力较强的M.bovis分离株,本研究采用等浓度的6株M.bovis分离株(W70、1738、677、Q1、Q3、JX02)感染7日龄健康鸡胚和6周龄～8周龄SPF级BALB/c小鼠,观察并比较各组受试动物死亡情况及病理剖检变化,取死亡鸡胚尿囊液或卵黄液,以及小鼠肺组织进行病原学分离培养和PCR鉴定.实验结果表明:各感染组BALB/c小鼠虽然出现一定程度的体重增长抑制,但小鼠并无任何临床呼吸道症状和病理剖检变化,并且病原学分离培养及PCR鉴定结果也均为阴性.在鸡胚感染试验中,6株M.bovis分离株对鸡胚表现出较好的感染性和致死性.感染组鸡胚致死率与对照组比较差异极显著(p＜0.01),而6个分离株间鸡胚致死率也表现出显著差异(p＜0.01).其中,以W70株感染后鸡胚死亡率最高,达63.3％;677株感染后死亡率最低,仅为20％,鸡胚死亡情况大多发生在感染后一周内,而后期仅有零星死亡.综合上述实验结果,初步筛选出W70株、1738株、Q1株、Q3株为毒力相对较强的分离株;与此同时,BALB/c小鼠的建模还需进一步研究.     

牛支原体生物学特性及其膜蛋白的研究进展

牛支原体(Mycoplasma bovis,Mb)是引起牛肺炎、关节炎、乳房炎和中耳炎等众多疾病的主要病原之一,牛支原体引起的疾病在欧美地区广泛蔓延并造成巨大的经济损失。中国2008年首次报道在犊牛肺炎中分离到牛支原体,目前国内对牛支原体的认识还很欠缺,现对牛支原体生物学特性及其膜蛋白进行简要综述,以期为牛支原体病的防控与治疗提供一定的参考依据。     

中药质量标准的研究进展

中药是中医防病、治病的物质基础，其真伪、优劣直接关系到中医临床用药的安全、有效。中药的质量标准研究与制定是中药科学化、标准化、国际化的重要内容，一直受到国家的重视。近年来，借助于现代生命科学、化学、分析科学的进步，中药的研究水平和质量标准水平都有了明显的提高，这一进步在《中国药典》（2005年版）中得到了集中的体现。然而，我们必须看到，要实现中药科学化、标准化、国际化这一目标，仍然需要长期不懈的努力。中药质量标准水平的提高成为中药现代化的“瓶颈”。     

中药质量标准的研究进展

中药是中医防病,治病的物质基础,其真伪、优劣直接关系到中医临床用药的安全、有效.中药的质量标准研究与制定是中药科学化、标准化、国际化的重要内容,一直受到国家的重视.近年来,借助于现代生命科学、化学、分析科学的进步,中药的研究水平和质量标准水平都有了明显的提高,这一进步在<中国药典>(2005年版)中得到了集中的体现.     

免疫佐剂 CpG—DNA的研究进展

特异性免疫即是含有PAMP的反应物与天然免疫细胞上的PRR相结合,激活天然免疫应答,从而活化抗感染途径,并最终发挥获得性免疫应答的一系列反应过程。CpG—DNA作为一种在进化中高度保守的PAMP,它可以模拟感染过程,克服新型疫苗PAMP不足的缺陷,从而诱导强烈的免疫应答。CpG—DNA可以直接激活B淋巴细胞、单核／巨噬细胞和树突状细胞,上调免疫刺激分子的表达,调节免疫反应,诱导IL-12、IL-1和TNF-等多种细胞因子的分泌,此外,它还能间接刺激NK细胞、T淋巴细胞。由于其独特的优点,CpG—DNA在畜牧兽医临床中显示其极强的使用价值和广阔的应用前景。     

调配芸豆发酵饮料的研制

以乳酸菌发酵芸豆后的成熟醪液为原料,研究制作芸豆发酵饮料的加工工艺。在单因素基础上,通过正交试验确定最优的复合甜味剂配比为山梨糖醇0.30%,木糖醇3.2%,甜菊糖苷0.028%;调制芸豆发酵饮料的最佳配比为杏仁1.5%,复合甜味剂0.08%,蔗糖酯0.02%,稳定剂0.06%。     

三种大豆分离蛋白的比较研究和物化特性相关性分析

对3种不同大豆分离蛋白的基本化学组成、游离巯基、二硫键和表面疏水性进行了测定;对3种不同大豆分离蛋白的粘度、乳化性和凝胶性进行了分析;采用SPSS软件对物化特性与大豆分离蛋白的基本化学组成、游离巯基、二硫键和表面疏水性的相关性进行了分析,确定了大豆分离蛋白的粘度、乳化性和凝胶性与蛋白质含量、二硫键、游离巯基含量的相关性。     

青岛市海洋生态旅游资源开发研究

指出了随着蓝色经济的提出,海洋资源的可持续利用越来越受到重视。青岛市作为中国重要的经济中心城市和沿海开放城市,拥有丰富的海洋旅游资源,发展海洋生态旅游是实现海洋资源可持续利用的重要途径。在分析青岛海洋生态旅游资源基础上,针对青岛市海洋生态旅游资源开发的现状,分析了其存在的问题,提出了相应的保障措施,为青岛市开展海洋生态旅游提供参考。     

牛支原体膜蛋白6种提取方法的比较研究

为筛选最佳牛支原体(mycoplasma bovis,Mb)膜蛋白的提取工艺,本试验以牛支原体W70株为代表,分别比较了4种浓度的TritonX-100 、TritonX-114、TritonX-100和TritonX-114;3种浓度碘化钾(KI)复合提取;反复冻融和超声裂解等6种Mb膜蛋白提取工艺和参数.各方法所获膜蛋白经SDS-PAGE和Bradford定量分析表明:不同方法的提取物中蛋白多肽和蛋白浓度各异;其中以3％ TritonX-114和0.4％TritonX-100结合0.6 MKI两法提取的蛋白条带清晰度较好,蛋白浓度及蛋白收集率较高,蛋白多肽条数24～28条,蛋白相对分子质量分别在170 000～12 200和167 000～11 400之间;超声裂解及反复冻融法提取效果一般;而1.8 MKI法效果最差.研究发现3％TritonX-114或0.4 ％TritonX-100结合0.6 MKI是Mb膜蛋白较优的提取方法.     

牛支原体不同分离株全菌蛋白免疫印迹分析

为比较牛支原体（Mycoplasma bovis,M.bovis）不同分离株间全菌蛋白组成的差异,找到其具有免疫原性的蛋白片段,试验采用裂解液法提取分离自全国不同地区6株M.bovis分离株（W70株、1738株、Q3株、Q1株、JX02株、677株）的全菌蛋白,并利用自制抗血清对所获蛋白进行SDS-PAGE和免疫印迹分析。结果显示,6株分离株全菌蛋白条带数量、清晰度存在差异,其中W70株、1738株、Q3株和Q1株的蛋白条带数量及清晰度均优于JX02株和677株,蛋白质分子质量范围在23.2～130.8 ku之间;6株分离株均显现2条大小为55和43 ku的免疫杂交条带。综上所述,M.bovis不同分离株全菌蛋白组成存在差异,55和43 ku是其主要的免疫原性蛋白之一,该试验结果为M.bovis病血清学诊断、分子诊断技术及疫苗的研制提供理论依据。