响应面试验优化霍山石斛原球茎增殖培养基

为可持续开发霍山石斛资源，采用响应面法优化霍山石斛原球茎增殖培养基。在单因素试验基础上，根据Box Behnken试验设计原理，采用三因素三水平的响应面分析法，以增殖率为响应值进行回归分析。结果表明，萘乙酸（简称NAA）及6 苄氨基嘌呤（简称6 BA）浓度对增殖率影响最为显著，6 BA与马铃薯两者间交互作用显著，适宜的NAA、6 BA及马铃薯浓度分别为0.05 mg·L-1、0.70 mg·L-1和185 g·L-1，此时增殖率为2 989.82%±205.55%，与模型预测值基本符合。响应面法优化霍山石斛原球茎增殖培养基切实可行。     

铁皮石斛PRC2复合体成员的鉴定及对胁迫响应的表达分析

为了探讨PRC2复合体在铁皮石斛生长发育和胁迫响应中的功能,通过生物信息学方法筛选了铁皮石斛PRC2核心成员DcCLF、DcSWN、DcEMF2、DcFIE和DcMSI1,借助酵母双杂交技术分析了它们之间的互作关系,利用半定量PCR分析了PRC2核心成员的组织表达谱,通过荧光定量PCR检测了它们对非生物胁迫(低温、高温、脱水)和病害胁迫(齐整小核菌、灰葡萄孢霉菌)的响应情况。结果表明,铁皮石斛PRC2复合体包含5个成员:E(z)同源基因DcCLF和DcSWN、Su(z)12基因DcEMF2、ESC基因DcFIE、p55基因DcMSI1,且这5个成员间的互作关系基本符合模式植物的互作模式,也存在物种特异性,表明PRC2复合体在进化中既有保守性也有特殊性。PRC2核心成员在铁皮石斛根、茎、叶、花蕾、成花中均有表达,但不同基因的表达存在组织差异性。同时,PRC2成员响应不同的环境和病害胁迫:DcCLF受低温、高温和脱水等各种环境胁迫的显著诱导;DcMSI1和DcEMF2在齐整小核菌侵染下表达明显上调,而DcSWN在灰葡萄孢霉菌侵染下受诱导程度最大。铁皮石斛PRC2复合体在生长发育和胁迫应答中发挥重要作用,可为分子辅助育种提供关键靶标基因。     

微波真空干燥对铁皮石斛品质特性影响的研究

本研究以新鲜铁皮石斛为原料,采用微波真空干燥方法干燥,通过测定铁皮石斛的多糖含量、色泽、多酚氧化酶（PPO）、水分分布状态、组成氨基酸以及多酚的DPPH?和?OH清除率,研究微波真空干燥对铁皮石斛品质特性的影响。结果表明：相比于新鲜样品,当微波强度为9 W/g,干燥后样品的多糖含量最高可达52.21%;氨基酸分析仪分析结果表明,微波真空干燥后铁皮石斛的总游离氨基酸和风味氨基酸含量显著提高。在微波强度9 、12 、15 W/g下,微波真空干燥的铁皮石斛的PPO活性分别在干燥16、12、6 min后不再存在,表明微波真空干燥能够在较短时间内钝化铁皮石斛的PPO活性,且微波强度越大时间越短。干燥过程的非酶促褐变主要由Maillard反应引起。低场核磁共振结果表明,自由水驰豫时间T₂₃和A₂₃均显著降低。自由基清除能力研究结果表明,铁皮石斛多酚仍具有较强的羟基自由基清除能力。通过观察干燥后样品的微观结构发现,随着微波功率密度的增大,样品孔状结构受到更严重破坏,微波强度越大,铁皮石斛的复水特性越好。     

2种多胺对铁皮石斛瓶内开花的影响

以铁皮石斛无根组培苗为试验材料,研究不同浓度的外源腐胺（Put）和精胺（Spm）对铁皮石斛瓶内开花的影响。结果表明：培养基中添加适量的Put和Spm可提高开花率。当Put浓度为0.4 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为30.47%;Spm浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为22.26%;Put浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛始花期最短,为83.33 d,观赏期最长,为43.33 d。Put浓度为0.4 mg/L时,植株可溶性糖和可溶性蛋白含量最高;对照处理下植株全N含量达最高;Spm浓度为0.6 mg/L时,植株C/N比达最大。Put浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗碳氮化合物的积累,可提高铁皮石斛的开花率;Put浓度为0.2 mg/L时,能使花期提前,延长观赏期。Spm浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗株高增长和生根,促进铁皮石斛组培苗的营养生长。     

齿瓣石斛栽培基质筛选及其栽培方式研究

通过对齿瓣石斛栽培基质和栽培方式的对比试验研究,结果表明:(1)不同栽培基质中,树皮:苔藓(1:1)中新枝数最多,树皮中枝条生长最好,树皮:锯末:羊粪(5:3:2)中产量最高;(2)不同栽培方式中直立捆绑产量最高.因此在齿瓣石斛生产中宜选择树皮基质和直立捆绑栽培方式.     

铁皮石斛优良共生菌的抗旱机理

为阐明细胞膜保护酶在菌根提高铁皮石斛抗旱能力过程中的作用,采用模拟自然干旱胁迫的方法,对胁迫过程中菌根化铁皮石斛细胞膜保护酶的活性变化进行研究。结果表明:铁皮石斛菌根真菌(JSAFC003、JSAFC004)能够在一定程度上提高植株的抗旱能力,SOD、POD活性与植株抗旱能力呈正相关,MDA含量与植株抗旱能力呈负相关,表明细胞膜保护酶的调节作用在菌根提高铁皮石斛抗旱能力过程中发挥了一定作用。     

铁皮石斛林下培育技术研究

分析了铁皮石斛的培育技术,采用选优繁殖、扦插等技术,其苗木生长迅速。结果显示：铁皮石斛用1年、2年生的嫩枝扦插,在立春季节扦插培育较适宜,幼苗生长良好。用植物激素处理扦插,植物激素能促进铁皮石斛扦插穗条生根、萌芽、抽稍,苗木生长快。尤其植物细胞分裂素又能对铁皮石斛扦插穗条抽芽产生较大的良好生长效果。     

石斛兰色素的提取及稳定性研究

对石斛兰色素提取的最佳方法以及稳定性的研究结果表明：石斛兰色素的最大吸收波长为545nm;提取最佳条件组合为：提取温度50℃,提取时间2h,提取浓度50%乙醇溶液,料液比为1∶5;色素在pH值为4左右较稳定,碳水化合物对色素有保护作用,金属离子Fe2＋、有机酸、氧化剂H2O2和还原剂Na2SO3均对色素有破坏作用。     

铁皮石斛茎段丛生芽诱导研究

通过对铁皮石斛组培过程的外植体消毒方法,以及不同培养基、培养基添加物的筛选试验,结果表明:多种消毒剂配合使用并进行二次消毒的效果最好;基础培养基以1/2MS较好;1/2 MS+5.0mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA是最适合丛芽分化的诱导培养基;在培养基中添加香蕉10%+洋芋10%生根多,瓶苗长势好。     

华石斛原生境条件下人工播种的初步探讨

由于人为的采挖和原生境的破坏,华石斛野生资源受到严重威胁。因此,保护华石斛野生资源及其生境,加快野生植株的繁殖显得非常重要。该研究以华石斛种子为材料,分别于7月和9月,播种于不同的附生宿主树种(毛绵杜鹃,竹叶松,碎叶蒲桃,大叶布拉栎和大果马蹄荷),并监测其种子萌发的状况。研究结果表明:(1)华石斛种子对附生树种有一定的选择性。人工播种的毛绵杜鹃上均有原球茎萌发,萌发率达到100%,平均每株树萌发14.71个原球茎。竹叶松和碎叶蒲桃上的原球茎数增加的差异不明显,对照大叶布拉栎和大果马蹄荷则没有原球茎萌发。(2)播种时间影响华石斛种子萌发与原球茎的形成。7月份播种的毛绵杜鹃和竹叶松,原球茎萌发数较多;9月份播种的碎叶蒲桃上萌发的原球茎远远高于毛绵杜鹃和竹叶松上,达到为4.5个/株。该实验结果暗示雨季可能是华石斛播种的最佳时期。此外,人工播种树上萌发的原球茎基本集中在华石斛植株上方30cm至下方40cm的范围内,这为今后播种位置的选择提供了依据。