The GABA a agonist muscimol enhances locomotor activity, but does not alter the behavioural effects of CRH in juvenile spring chinook salmon (Oncorhynchus tshawytscha)†

The present study investigated the effects of manipulating the GABAergic system on locomotor activity in juvenile spring chinook salmon, Oncorhynchus tshawytscha. In addition, we evaluated whether the GABAergic system is important for mediating the behavioural effects of corticotropin-releasing hormone (CRH). An intracerebroventricular (ICV) injection of the GABA_a agonist muscimol caused an acute and dose dependent increase in locomotor activity in juvenile spring chinook salmon. ICV injections of the GABA_a antagonist bicuculline prevented the increase in activity when administered concurrently with muscimol. The GABA_b agonist baclofen had no effect on locomotor activity in this study. Furthermore, we found no evidence that the locomotor response to exogenous CRH was altered by the concurrent administration of muscimol or bicuculline. These results provide evidence to support the hypothesis that endogenous GABA within the central nervous system is involved in the control of locomotor activity in fish. The data also suggest that there is no interaction between the GABAergic system and CRH with regards to the control of locomotor activity in this species.     

氨酪酸对离体蟾蜍心脏活动的影响

采用常规离体蟾蜍心脏灌流法 ,通过生理记录仪经张力换能器系统描记心脏活动 ,探讨氨酪酸(GABA)对离体蟾蜍心脏活动的影响 ;结果表明 ,GABA明显增强了蟾蜍离体心脏收缩和舒张活动 ,并在一定范围内存在剂量依赖性 ;GABAA 受体阻断剂印防己毒素和GABAB 受体激动剂巴氯酚对心脏的收缩和舒张均有抑制作用 ;GABA能够加强肾上腺素对离体蟾蜍心脏的增强作用 ,而逆转乙酰胆碱的抑制作用 ;在酚妥拉明存在的条件下 ,GABA的正性肌力作用受到抑制 ;而在普萘洛尔和阿托品分别存在的条件下 ,GABA能够逆转普萘洛尔对离体蟾蜍心脏的抑制作用 ,而加强阿托品对离体蟾蜍心脏的增强作用 ;以上这些药品对心率均无明显影响。GABA对离体蟾蜍心脏的增强作用是通过GABAA 受体正性肌力作用和GABAB 受体负性肌力作用共同调节的 ,在生理状态下 ,以GABAA 受体作用为主 ,GABA的正性肌力作用可能是通过肾上腺素能系统中的α1 受体介导来完成的 ,而与胆碱能系统可能无关     

GABA对小鼠离体十二指肠活动影响的研究

采用常规麦氏浴槽灌流法 ,研究了外源性γ -氨基丁酸 (GABA)及其类似物对离体小鼠十二指肠活动的影响 ,结果显示 :GABA明显抑制了离体小鼠十二指肠的自发活动 ,并明显存在剂量依赖性。GABAA 受体阻断剂印防己毒素和GABAB 受体激动剂巴氯芬均明显模拟此效应 ,增强阿托品对十二指肠的抑制作用 ,并逆转酚妥拉明对小鼠离体十二指肠的增强作用 ,所有的药物对肠段的活动频率均无影响。这些结果表明GABA对小鼠离体十二指肠的抑制作用是由GABAA 受体正性作用与GABAB 受体负性作用共同调节的 ,在生理状态下 ,以GABAB 受体的作用为主。GABAB 受体的这种作用可能是通过肠胆碱能系统介导来完成 ,也可能是独立的GABA能系统和 (或 )非胆碱能系统来完成 ,而与肾上腺素能系统无关     

芍药甘草汤联合西药治疗卒中后肌痉挛的疗效研究

目的 研究芍药甘草汤联合西药治疗卒中后肌痉挛的疗效。方法 选取我院近年78例卒中后肌痉挛患者为研究对象,按随机数字表法分为观察组与对照组,两组均采取主被动训练的基础干预,对照组口服巴氯芬,观察组另加用芍药甘草汤治疗,两组均持续治疗1月,比较两组治疗前、后改良Ashworth肌张力分级情况,并检测治疗前、治疗后1周、治疗后1月脑内神经递质指标表达,包括肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）、γ-氨基丁酸（GABA）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、天门冬氨酸（ASP）差异。结果 治疗后两组均有向低级别偏移趋势,与治疗前比较差异有统计学意义（P<0.05）,组间比较观察组肌张力分级分布与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;观察组治疗后1周NE、Asp、Glu显著高于对照组（P<0.05或P<0.01）;观察组治疗后1月5-HT、NE、Asp、Glu均显著高于对照组（P<0.05或P<0.01）,Gly、GABA显著低于对照组（P<0.01）。结论 芍药甘草汤联合西药治疗卒中后肌痉挛具有满意疗效,其疗效机制与调控脑内神经递质水平有关。     

固相萃取-液相色谱串联质谱法测定猪尿中的巴氯芬

为了建立用固相萃取-液相色谱串联质谱法测定动物尿液中巴氯芬药物残留的检测方法,试验采用叔丁醇-叔丁基甲醚对猪尿样品进行提取,提取液经混合型阳离子固相萃取小柱（MCX）净化、富集后,以液相色谱串联质谱测定,外标法定量。结果表明,该方法检出限为0.2 ng/mL,定量限为0.8 ng/mL,巴氯芬在0.8~20 ng/mL的添加浓度范围内线性良好,线性相关系数大于0.9997,在低、中、高（0.8、1.6、5.0 ng/mL）三个浓度的添加水平回收率在80%~120%之间,批内、批间精密度均小于10%。该方法灵敏度高,定性、定量准确,可用于猪尿中巴氯芬药物残留的定性、定量检测。     

巴氯芬人工抗原的合成及其鼠源多克隆抗体的制备

【目的】合成巴氯芬（baclofen,BA）人工抗原并制备其多克隆抗体,为巴氯芬免疫学快速检测方法的建立奠定基础。【方法】采用碳二亚胺（EDC）法将BA分别与牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白（OVA）偶联,合成免疫抗原BA-BSA和包被抗原BA-OVA,通过紫外扫描和SDS PAGE凝胶电泳鉴定其偶联效果。将免疫抗原BA-BSA免疫BALB/c小鼠,利用间接ELISA、间接竞争ELISA及交叉反应试验分别对所获多克隆抗体的效价、敏感性、特异性等免疫学特性进行鉴定。【结果】紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳结果表明人工抗原偶联效果良好。ELISA结果表明,多克隆抗体的效价达到1∶256 00,半数抑制浓度（IC₅₀）为22.33 ng/mL,且与巴氯芬结构类似物及其他瘦肉精类药物（γ-氨基丁酸、氯丙那林、可乐定、赛庚啶、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺）交叉反应率均小于0.3%,具有良好的敏感性和特异性。【结论】成功合成了巴氯芬人工抗原,并制备了免疫学特性良好的巴氯芬鼠源多克隆抗体。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛羊可食性组织中巴氯芬残留量

建立超高效液相色谱-串联质谱测定牛羊可食性组织中巴氯芬残留量的分析方法。取均质后的动物组织经80%(V/V)乙腈甲酸溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,高速离心分层后合并提取液,取适量乙腈层溶液经prime HLB直过式固相萃取柱净化后,以40℃氮气吹干。残渣以15%乙腈甲酸溶液复溶后以反相C₁₈为固定相,0.1%甲酸与0.1%甲酸乙腈为流动相,采用梯度洗脱程序进行分离,以串联质谱进行同位素内标法定性定量分析。巴氯芬在0.5～50μg/kg范围内线性关系良好(r=0.9994),方法的最低检出限为0.25μg/kg,最低定量限为0.50μg/kg,添加回收率在89.09%～109.52%内,批内批间变异系数(CV)小于10%。该方法具有较好的准确度与精密度,适用于牛羊可食性组织中巴氯芬残留量的测定。