茶皂素在化学农药乳油剂中增效作用研究

经室内毒力测定及田间药效试验研究结果表明：茶皂素对20%灭多威乳油杀灭菜青虫增效6.33倍,对2.5%三氟氯氰菊酯乳油杀灭菜缢管蚜增效14.83倍,对5%尼索朗乳油杀灭桔全爪螨卵增效61.8倍,对20%哒螨灵(WP)杀灭桔全爪螨成螨增效18.67倍。茶皂素与上述化学农药原药复方乳油的田间杀虫效果均稳定保持在90%以上,与常规对照农药效果经DMRT法显著性分析,在5%水平上无显著差异;而且可以降低化学农药原药有效成分用量50%～75%。对于减少化学农药污染环境,开发我国及世界极其丰富的茶皂素资源,具有极显著的社会、生态和经济效益。     

柑橘全爪螨不同品系谷胱甘肽S-转移酶基因表达差异分析

为了明确谷胱甘肽S-转移酶（glutathion S-transferases, GSTs）基因与柑橘全爪螨抗性的关系，通过BLAST搜索，对柑橘全爪螨转录组数据库的GST基因进行鉴定，应用MEGA4.0.1软件对GST基因进行同源与进化分析，进一步采用RPKM法对柑橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系GST基因进行表达差异分析。从柑橘全爪螨转录组中获得了30条GST基因，其中11条基因属于Delta家族，10条属于Mu家族，2条属于Omega家族，6条属于Kappa家族，1条属于Zeta家族。基因表达差异分析发现，抗性与敏感品系当中有25条GST基因表达量存在差异，抗性品系中有9条GST基因发生了上调，16条发生了下调，其中上调倍数最高的是GSTd6[log2 Ratio(RS/SS)= 1.0505]，由此推断，GST基因的上调可能不是柑橘全爪螨对噻螨酮产生抗性的重要原因。     

柑橘全爪螨代谢抗性相关基因表达差异分析

【目的】为了明确谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因、羧酸酯酶(CarE)基因,过氧化氢酶(CAT)基因在柑橘全爪螨Panonychus citri抗性中的作用,【方法】在室内用噻螨酮对柑橘全爪螨进行抗性选育,进一步构建抗/敏品系数字基因表达谱,采用RPKM法对柑橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系3种代谢抗性相关基因进行表达差异分析。【结果】经过20代抗性选育,获得了柑橘全爪螨噻螨酮抗性品系,与敏感品系比较,柑橘全爪螨对噻螨酮的抗性倍数达到3 532.12倍。基因差异性分析发现,抗性品系中有11条GST基因、17条CarE基因和6条CAT基因表达上调;14条GST基因、24条CarE基因和3条CAT基因表达下调。上调倍数最高的GST基因、CarE基因和CAT基因分别为Unigene31530[log2 ratio(RS/SS)=1.05]、Unigene23121[log2 ratio(RS/SS)=2.05]和Unigene31477[log2 ratio(RS/SS)=10.04]。进一步对Unigene31477进行荧光定量PCR分析发现,抗性和敏感品系基因表达水平没有显著差异。【结论】根据柑橘全爪螨抗/敏性品系基因表达差异推断,GST、CarE和CAT基因可能与柑橘全爪螨对噻螨酮产生的抗性没有密切关系。     

橘全爪螨不同品系γ氨基丁酸受体基因差异性分析

【目的】为明确γ氨基丁酸受体基因与橘全爪螨抗性的关系,【方法】通过BLAST搜索,对GABA受体基因进行鉴定;进一步通过序列比对和Sanger测序,对橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系GABA受体基因SNPs进行分析和真实性验证;采用RPKM法对橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系GABA受体基因进行表达差异分析。【结果】从橘全爪螨转录组中获得了19条GABA受体基因。通过敏感品系和抗性品系GABA受体基因序列比较和sanger测序发现Unigene11199_All有2个SNP位点。对GABA受体基因表达差异分析发现,相对于敏感品系,抗性品系中部分GABA受体基因表达量发生了不同程度的变化,抗性品系中有3条GABA受体基因表达上调,13条GABA受体基因表达下调,Unigene24440_All下调倍数最高[log2 Ratio(RS/SS)=-10.452479]。【结论】由此推断,橘全爪螨抗性产生可能是一个比较复杂的过程,而Unigene11199_All和Unigene24440_All可能是橘全爪螨对噻螨酮产生抗性的重要原因。