北京检验检疫局缩短禽流感病毒检测时间

北京检验检疫局主持提出的荧光RT -PCR检测禽流感病毒系列方法 ,14日通过国家标准化管理委员会审定 ,这意味着我国禽流感检测方法有了新的国家标准。目前我国普遍采用的禽流感检测方法是鸡胚病毒分离法。这种方法虽然精确 ,但耗时过长 ,从提取样品到最终出具结果 ,最少需要21天时间。这种方法已不能适应我国口岸快速通关放行的需要 ,给出口企业带来种种不便 ,也不能满足我国加入世贸组织后国内消费者对禽肉安全性的需求。从2002年起 ,北京检验检疫局与深圳匹基公司合作 ,开始探索禽流感快速检测技术。14日通过审定的新方法 ,是利用分子生…     

宁夏玉泉营地区葡萄卷叶病田间自然发病调查及检测

对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究。结果表明：在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状；欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高，且程度严重；具有欧血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均有表现卷叶病的品种，但发病率、严重度低于欧亚种。欧亚种中，以鲜食品种为主的东方品种比以酿酒品种为主的西欧和黑海品种卷叶病发病率低。检测结果表明不同酿酒品种带毒率有差异。     

滨海低位池塘天然海水养虾的病毒病预防

自上世纪90年代暴发对虾病毒病以来，养虾业被迫离开该病的高发区——滨海低位地带，向内陆和高地发展，同时养虾用水也从天然海水改向盐场卤水兑淡水，地下盐水兑淡水，甚至调整离子组成以后的纯淡水。这一趋势因常会影响地下水和淡水的资源、该地段的环境质量以及内陆土地的合理使用，而有很大的生态方面和     

苹果退绿叶斑病毒组织印迹的免疫法检测与定位

用组织培养技术将富士苹果茎尖外植体建立在ＭＳ培养基中,形成试管苗。取４—６周龄的茎与愈伤组织,徒手切取约１ｍｍ厚的横切面,印迹在硝化纤维膜上。印迹组织经封闭后,与ＣＬＳＶ碱性磷酸酶标抗体反应。对反应结果进行显色。感染ＣＬＳＶ的印迹组织呈紫色反应,正常组织无显色反应。结果表明,该方法十分容易检测印迹组织中的ＣＬＳＶ。带毒愈伤组织较茎的显色反应敏感,显色反应时间仅为茎的一半（１５ｍｉｎ）。ＣＬＳＶ在愈伤组织中有两种分布情况：一是所有组织均有显色反应;二是呈不均匀分布。ＣＬＳＶ在茎组织中有三种分布情况：第一,除髓部外,表皮、皮层及维管系统中均有分布;第二,不均匀分布,ＣＬＳＶ集中分布于表度组织中,在皮层及韧皮部仅有少量分布;第三,“嵌合”分布,即同一种组织中部分组织带毒,部分为正常组织。     

果树病毒检测方法研究进展

综述了苹果、樱桃、李等果树病毒检测的新进展，同时对各种病毒检测方法的优缺点进行了比较。     

圆点印迹法检测葡萄斑点病毒技术研究

采用圆点印迹法检测GFkV，结果表明：Tris-HCl和PBS在提取GFkV时效果相同，在带毒葡萄植株中韧皮部的GFkV含量较高。     

马铃薯茎尖脱毒方法优化及病毒检测

为优化马铃薯茎尖脱毒方法,得到无毒壮苗,研究生长素及L-半胱胺酸盐酸盐、培养基和马铃薯芽灭菌时间对28个马铃薯品种(系)组培苗形成的影响,比较不同p H的MS培养基上苗的生长情况,并用RT-PCR方法进行病毒检测。结果表明,28个马铃薯品种(系)中,有的很快长出愈伤组织并形成幼苗,有的不能成苗。含有萘乙酸(NAA)的MS培养基愈伤组织出愈速度快且大、成苗慢、成苗率低,但是苗较壮。含有吲哚乙酸(IAA)的MS培养基多数不形成或形成很小的愈伤组织,成苗快、成苗率较高,但苗较弱。L-半胱胺酸盐酸盐能减轻愈伤组织褐变,提高成苗率。试管分装培养基115℃条件下最佳灭菌时间是20min。采用升汞对较小的马铃薯芽灭菌5~7min效果最好,对较大的芽灭菌9~10min效果最好。苗生长的MS培养基最佳p H为5.8。采用RT-PCR检测到试管苗马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯Y病毒(PVY)和马铃薯卷叶病毒(PLRV)的带毒率分别为18%、12%和5%。     

甜瓜黄斑病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

为建立检测甜瓜黄斑病毒(melon yellow spot virus, MYSV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法。基于MYSV核衣壳蛋白基因保守序列设计qPCR特异性引物对,针对引物退火温度、引物浓度、特异性和敏感性进行系列优化。结果显示,优化后的qPCR方法最适退火温度为61.3℃,最适引物浓度为0.65μmol·L^-1,特异性强,灵敏度高,比PCR高100倍。以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建的qPCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7。实验样品验证表明建立的qPCR方法可用于MYSV的定量检测。     

脱毒种苗在农业上的应用

在种植业生产中,有些植物品种特别是以无性繁殖为主要方式的植物品种,因在自然环境中长期经受各种植物病毒病的重复传染而导致光合作用的明显降低,生产势变弱,品种变劣,种性退化,产量降低.为解决这一难题,科学工作者经过努力,研究出脱毒种苗,克服了病毒病的危害,恢复了植物固有的优良性状.