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鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株的出现给该病的防控带来了新的困难,有效鉴别IBDV超强毒株对IBD的防控有着积极意义.根据IBDV VP4基因的保守序列,设计了一对通用引物RPa/RPb,特异性扩增IBDV VP4基因720 bp的目的片段.根据超强毒株和经典毒株VP4基因序列的差异,分别合成了FAM标记的超强毒荧光探针和JOE标记的经典毒荧光探针,建立了实时荧光RT-PCR鉴别IBDV超强毒株与经典疫苗毒株的方法.检测超强毒和经典毒的敏感性分别可达420和320个拷贝数.建立的实时荧光RT-PCR方法敏感性高、特异性强,可用于临床样品中IBDV超强毒和经典毒的鉴别诊断. 相似文献
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根据GenBank中鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)A片段保守区域设计、合成了一对特异性引物(RP1/RP3),以期建立特异、灵敏的IBDVRT-PCR检测方法。结果显示RP1/RP3具有良好的特异性和重复性;将之与基于OIE推荐引物(L2/U2)建立的RT-PCR检测方法进行比较,发现基于引物RP1/RP3检测IBDV的灵敏度明显高于L2/U2,特别是当待检样品中的IBDV的含量低时,会避免因使用L2/U2导致出现漏检的现象。结论:以RP1/RP3作为引物建立的IBDVRT-PCR检测方法灵敏性高、特异性强,可用于IBDV的检疫、诊断和监测。 相似文献
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为快速检测鸡传染性法氏囊病毒,使用纯化的鸡抗IBDV多克隆抗体和鼠抗IBDV单克隆抗体,建立了抗原捕获ELISA检测鸡传染性法氏囊病毒的方法.使用建立的方法可以检测到1:160倍稀释的IBDV疫苗及阳性法氏囊组织中的病毒.检测禽流感、新城疫、鸡传染性支气管炎病毒及沙门氏菌、葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、肺炎球菌等结果均为阴性.检测IB-DV超强毒和疫苗毒人工感染鸡的法氏囊、脾、肝及临床样品78份,检出阳性24份,与RT-PCR检测结果相符率为96%(75/78).说明建立的方法敏感、特异,可用于法氏囊病的诊断和监测. 相似文献
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