TaqMan实时荧光RT-PCR快速检测H5亚型禽流感病毒

根据GenBank中100个H5亚型禽流感病毒分离株的HA基因核苷酸保守序列设计引物和TaqMan探针,对荧光定量RT-PCR反应体系和条件进行优化,并对该方法进行评价.结果表明:该方法对H5N1亚型和H5N2亚型禽流感病毒灭活抗原均有阳性扩增,对H7、H9亚型禽流感病毒、健康鸡、鸭组织及其他家禽常见病原RNA无扩增;敏感度高,最低检测限为21个拷贝质粒DNA;可重复性好,批内变异系数及批间变异系数分别为2.01%和4.93%;检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4 h.     

RT—PCR快速诊断鸽新城疫

2008年11月成都市某种鸽场5120只种鸽发生急性疾病并出现大批死亡。临床表现有下痢和歪头缩颈等明显神经症状,剖检变化有全身性的黏膜和浆膜出血,并伴有呼吸道和消化道病变,经实验室细菌分离鉴定和RT—PCR检测,确诊为鸽新城疫。目前使用LaSota、V4等鸡新城疫疫苗进行免疫,可有效地控制该病在鸽群中的流行。     

乳鸽沙门氏菌性脑炎的诊断

四川某肉种鸽场500只30日龄乳鸽发生以腹泻和神经症状为特征的传染性疾病,经PCIK检测及细菌分离鉴定,初步确诊为沙门氏菌性脑炎,分离菌株的抗原结构式为4,5：i：-;药敏试验结果显示分离菌对环丙沙星、达氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星、氧氟沙星和恩诺沙星高度敏感。     

日粮添加木聚糖酶对肉鸡小肠葡萄糖吸收及其转运载体基因表达影响

156羽1日龄AA肉雏鸡随机分为对照组和试验组，对照组饲以小麦基础日粮，试验组在基础日粮中添加1000mg/kg木聚糖酶，试验期为30d。与对照组相比，试验组4周内平均日增重提高4.81％（P〈0．01），料重比下降5．00％（P〈0．05）；肠系膜静脉血清中葡萄糖的含量提高5．56％（P〈0．05）。采用半定量RT-PCR方法测定十二指肠和空肠黏膜SGLT1 （sodium／glucose cotransporter 1）和GLUT2（glucose transporter 2）mRNA的表达，发现木聚糖酶显著增加十二指肠SGLT1 mRNA的表达，增幅为33．30％（P〈0．05），试验组空肠SGLT1 mRNA的表达量比对照组增加8．21％，但差异不显著（P〉0．05）。木聚糖酶对十二指肠和空肠GLUT2 mRNA表达均无显著影响。提示木聚糖酶主要作用在小肠上段，通过上调SGLT1的表达而影响肉鸡小肠葡萄糖吸收。     

农业科技企业改制中存在的问题与对策

文章探讨了按照现代企业制度对农业科技企业改制所遇到的问题，提出了推进农业科技企业改制的若干措施。     

中草药复合预混料饲喂生长肥育猪的效果

随着养殖业的发展，各类饲料添加剂应运而生，且品种繁多。我们参照美国ＮＲＣ及我国瘦肉型猪的饲养标准，以氨基酸、维生素、微量元素加纯天然中草药等研制生产出了４％猪用复合预混合饲料。其既能满足猪不同生长发育阶段和生理要求对营养的需要，又具有促生长和保健作用...     

SYBR GreenI定量RT—PCR快速检测H5亚型禽流感病毒方法的建立

针对H5亚型禽流感H基因保守序列设计引物,建立基于sYBRGreenI检测模式的荧光定量RT—PCR（real—timeRT—PCR,RRT—PCR）,最低检测限为2．1×10^2拷贝质粒DNA,扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm=（79．5±0．3）℃,对H5N1亚型和H5N2亚型禽流感病毒灭活抗原均有阳性扩增,对H7、H9亚型禽流感病毒、健康鸡、鸭组织及其它家禽常见病原RNA无扩增,可重复性好,批内变异系数及批间变异系数分别为2．99％和5．12％;检测速度快,从样本处理到报告结果仅需5h。     

农业科技管理中的若干法律问题探究

农业科研院所已作为市场经济主体参与市场竞争,自然应遵循市场游戏规则,依法依规进行科技管理。由于种种原因,农业科技管理中还存在一些法律问题,探索和解决这些问题,有助于技术创新和实现科技成果的商品化、产业化。     

农业科技综合开发工作问题初探

文章从河南省“一二五”科技兴农示范工程的实施．对河南农业科技综合开发工作目前的现状和问题作了概括总结,并针对障碍科技兴农的因素,提出了当前科技兴农工作应采取的对策和措施。     

免疫鸡群新城疫强毒感染及其与HI抗体的相关性研究

为调查新城疫强毒(vNDV)在免疫鸡群中的感染情况及其与抗ND抗体效价的相关性,用自行建立的检测vNDV的荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)对采自川、渝两地36个免疫鸡群的360份肛门棉拭子进行检测,同时采血测定其血凝抑制抗体效价.结果共检出5个vNDV 阳性鸡群,每个阳性鸡群检出1例阳性样本,经病毒分离鉴定证实为NDV;36个受检鸡群HI抗体平均效价在4.5～10.1,标准偏差(SD)在0.70～3.19,变异系数在9.5%～44.3%.当SD大于2.0时,vNDV感染鸡群阳性率为50%,6(5/10),当CV大于32%6时,vNDV感染鸡群阳性率为62.5%(5/8);vNDV感染个体HI抗体效价分别为210、29,28,26,23;阳性样本RT-PCR产物经测序分析证实为vNDV F基因序列,发育进化分析显示,2株vNDV属基因Ⅶ型,3株属基因Ⅸ型.研究结果表明,RRT-PCR适合vNDV感染及传播的监测和分子流行病学调查;免疫鸡群是否感染vNDV可能与个体HI抗体水平高低无关,而与群体HI抗体离散度有关,SD和CV值有助于判定鸡群感染vNDV的风险.