| SYBR GreenI定量RT—PCR快速检测H5亚型禽流感病毒方法的建立 |
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| 引用本文： | 马莉,汤承,李明义,岳华,张彬,张兆敏.SYBR GreenI定量RT—PCR快速检测H5亚型禽流感病毒方法的建立[J].中国家禽,2008,30(20). |
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| 作者姓名： | 马莉 汤承 李明义 岳华 张彬 张兆敏 |
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| 作者单位： | [1]西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041 [2]中国医学科学院成都输血研究所,四川成都610041 [3]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266032 |
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| 摘 要： | 针对H5亚型禽流感H基因保守序列设计引物，建立基于sYBRGreenI检测模式的荧光定量RT—PCR（real—timeRT—PCR，RRT—PCR），最低检测限为2．1×10^2拷贝质粒DNA，扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰，无引物二聚体，Tm=（79．5±0．3）℃，对H5N1亚型和H5N2亚型禽流感病毒灭活抗原均有阳性扩增，对H7、H9亚型禽流感病毒、健康鸡、鸭组织及其它家禽常见病原RNA无扩增，可重复性好，批内变异系数及批间变异系数分别为2．99％和5．12％；检测速度快，从样本处理到报告结果仅需5h。
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| 关 键 词： | H5亚型禽流感病毒 SYBR Green I 荧光定量反转录聚合酶链式反应 |
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