海藻酸钙固定木霉分生孢子高效降解敌敌畏研究

成功建立了高效降解敌敌畏的海藻酸钙交联固定木霉AMT-28分生孢子体系.与固定化的菌丝或自由悬浮的菌丝相比,固定不同浓度分生孢子小球的敌敌畏降解能力均有显著提高,其中以每100 mL海藻酸钠-硅藻土悬液固定107个分生孢子小球的效果最佳.同时,孢子固定化小球在敌敌畏降解过程中保持了较高的储存稳定性和良好的重复使用性能.因此,此项技术必将在敌敌畏水污染处理方面得到广泛的应用.     

GFP标记的短小芽胞杆菌（Bacillus pumilus）转座突变株的构建初探

以水稻叶面附生菌短小芽孢杆菌(B.pumilus)为研究对象,通过构建pMOD-egfp-Tetr转座复合体,采用电击转化法对短小芽孢杆菌DX01菌株进行了Tn5转座插入诱变,获得了大量的转化子。对转化子进行了遗传稳定性分析和分子鉴定,并且在荧光显微镜下观察到了强烈的绿色荧光,研究结果表明外源DNA已经成功整合进细菌的基因组中,gfp基因在短小芽孢杆菌中实现了组成型表达。     

纤维素酶高产菌株桧状青霉9-3的诱变选育及产酶条件研究

本文以桧状青霉9-3为出发菌株,采用硫酸二乙酯（DES）诱变,通过筛选得到一株酶活力高且遗传稳定性良好的菌株H16,其滤纸酶活力、β-葡萄糖苷酶酶活力与蛋白产量均较出发菌株相比均提高了4倍左右。并通过对发酵培养基以及发酵条件的优化,确定了最佳的产酶条件为：微晶纤维素浓度为2%,玉米浆干粉浓度为1.5%,发酵温度为30℃,初始pH为5.5,装液量为30 mL/250 mL,发酵周期为5 d。在优化的条件下,该菌株的纤维素酶和蛋白产量均进一步提高25%左右。     

鸟粪石沉淀法改善微藻氨絮凝的后续培养

为高效回收氨絮凝后的氨氮并改善其后续培养,研究了鸟粪石沉淀法回收氨氮问题并比较了后续培养中不同营养组分补加对微藻生长的影响。结果表明,鸟粪石沉淀法可解决微藻氨絮凝的氨氮回收问题,回收率达98.8%;N1和N5组的营养添加组合最适合Nannochlropsis oculata的后续培养,N1组微藻的生物量产率、蛋白质含量、类胡萝卜素含量上分别是对照组的1.0、2.1、6.0倍,N5组微藻的生物量产率、蛋白质含量、类胡萝卜素含量上分别是对照组的1.4、1.6、4.7倍。后续培养的藻液仍可利用氨絮凝法沉降采收,其絮凝率在10min内达到90%以上。因此,鸟粪石沉淀法能有效地改善微藻氨絮凝的后续培养。     

响应面法优化土芽孢杆菌XS2产生物乳化剂的研究

[目的]采用响应面法对土芽孢杆菌XS2产生物乳化剂的发酵培养基进行优化研究。[方法]利用单因素试验确定影响土芽孢杆菌XS2产生物乳化剂的主要培养基成分,再采用响应面分析法和Design-Expert 7.0软件建立响应曲面模型,来优化土芽孢杆菌XS2产生物乳化剂的发酵培养基。[结果]葡萄糖、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾为影响土芽孢杆菌XS2产生物乳化剂的主要因素,土芽孢杆菌XS2产生物乳化剂的最佳发酵培养基为：葡萄糖68 g/L,硝酸钠2 g/L,磷酸二氢钾5.03 g/L,磷酸氢二钾1.36 g/L,硫酸镁结晶0.2 g/L,硫酸亚铁0.02 g/L,氯化钙0.01 g/L,微量元素液2 ml。在此条件下,生物乳化剂乳化活性的实测值（67.0%）与预测值（66.7%）较为接近,比优化前提高了27%。[结论]响应面法适用于土芽孢杆菌XS2产生物乳化剂发酵培养基的优化,优化结果与实际情况吻合较好。     

沙雷氏蛋白酶MP及其抑制剂LupI的复合物纯化及结晶

沙雷氏蛋白酶属于锌金属蛋白酶M10B亚家族，是一些细菌性疾病的关键致病因子。专一性沙雷氏蛋白酶抑制剂在体外可靶向抑制沙雷氏蛋白酶，从而减弱产沙雷氏蛋白酶的细菌病原体的活性，成为疾病治疗的新思路。沙雷氏蛋白酶MP和其抑制剂LupI均来源于海洋微生物Flavobacterium sp. YS-80-122，本研究分别纯化了蛋白酶MP、抑制剂LupI及MP-LupI的复合物，对MP-LupI复合物进行结晶条件筛选，成功在2种条件下获得MP-LupI复合物晶体，并经X-射线衍射收集到分辨率达2 Å的高质量衍射数据，其晶胞空间为P1 21 1，晶胞参数为a=51.66 Å、b=51.85 Å、c=102.14 Å、α=γ=90°、β=97.68°。     

微生物菌剂“中科院菌株壹号”在盘山县水稻上的施用效果

为进一步验证微生物菌剂"中科院菌株壹号"的大田应用效果,为其在水稻生产上大面积推广应用提供科学依据,在盘锦市盘山县进行水稻减肥增效示范试验。结果表明:与传统施肥处理相比,施用微生物菌剂优化肥料处理的株高、穗长和单株穗数分别增加12厘米、长1.4厘米、多4穗,产量增加8.1%,节省成本38.8元/亩,减少化肥用量47.42%。施用微生物菌剂优化肥料可以减肥增效并提高水稻产量。     

波卓霉素生物合成基因簇的异源表达及产量提高

波卓霉素是从波卓链霉菌(Streptomyces bottropensis)中分离得到的,具有抗革兰氏阳性菌及支原体的生物活性,尤其重要的是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和抗万古霉素肠球菌有抑菌活性。试验通过构建基因组文库,PCR筛选获得包含完整波卓霉素合成基因簇的柯斯质粒4E11,通过接合转移的方法把4E11转化至天蓝色链霉菌M145中,对获得的异源表达株M145/4E11进行发酵,通过提取纯化和HPLC-MS检测,表明M145/4E11发酵液中产生了波卓霉素;试验并通过Red/ET重组系统,以红霉素启动子(ermE*P1)替换了波卓霉素生物合成簇抗性基因btmA和前提肽合成基因btmD的启动子,成功实现异源表达株M145/4E11波卓霉素的产量提高。     

枯草芽孢杆菌B6的特性及其对哺乳期母猪生产性能的影响

文章旨在报道一株极具益生菌开发潜力的枯草芽孢杆菌B6,通过实验确定了该菌株高产功能性果聚糖的最佳碳源为蔗糖,果聚糖作为B.subtilis B6的主要功能性代谢产物,其胞外产量在100 g/l以上,经实验验证,该菌株产生的果聚糖具有很强的抗氧化作用,10 mg/ml果聚糖的DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率分别为80%和71%以上,铁还原能力达到43.26 mmol/g FeSO4当量。B.subtilis B6显示了活菌数高,菌种性能强,生产成本低等优良的应用特性。哺乳期母猪的饲喂效果显示B.subtilis B6液体菌剂可使仔猪平均窝重提高28.8%,平均断奶窝重提高18%,显著提高母猪及仔猪免疫力。综上,菌株B.subtilis B6作为特效益生菌在饲料添加剂领域将具有很大的开发潜能和市场价值。