植物乳杆菌(LP HMX-3)对仿刺参生长、消化、免疫和肠道菌群的影响

为探究植物乳杆菌LP HMX-3对仿刺参生长性能、消化酶活性、免疫能力和肠道菌群的影响,选择初始体重为(4.22±0.05)g的仿刺参,随机分为对照组(C组)和LP HMX-3添加组即10⁵ CFU/g的LL组和10⁷ CFU/g的LM组,进行为期8周的养殖实验。结果显示,(1)LP HMX-3显著提高了仿刺参的终体重、增重率以及特定生长率,且LL组的生长指标更优;(2)LL组的肠道淀粉酶和LM组的肠道脂肪酶活性显著高于C组,说明LP HMX-3可能提高仿刺参的消化利用率;(3)LL组和LM组体腔液的碱性磷酸酶和过氧化氢酶活性以及LM组的酸性磷酸酶活性均显著高于C组,此外,LL组和LM组体腔细胞Aj-p105和Aj-catalase表达量以及LM组的Aj-C3表达量显著高于C组,说明LP HMX-3可增强仿刺参的免疫力;(4)由16S r DNA V4区测序可知,α多样性指数显示,LP HMX-3显著提高了仿刺参肠道微生物丰富度和均匀度,但LL组和LM组差异不大;β多样性分析显示,LL组和LM组的微生物种群结构相似,但明显不同于C组;(5)在...     

皱纹盘鲍肽聚糖识别蛋白在免疫防御中的作用

本研究从皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)中鉴定并克隆了一种肽聚糖识别蛋白(PGRP),命名为HdPGRP。HdPGRP的cDNA全长为1467 bp,共编码354个氨基酸,其中含有1个信号肽(1~18氨基酸)、1个SH3b结构域(93~160氨基酸)、1个PGRP结构域(179~322氨基酸)和1个Ami_2结构域(191~332氨基酸)。此外,在HdPGRP序列中发现了4个保守的Zn2+结合位点(H209、Y255、H318和C330)以及5个保守的酰胺酶催化位点(H209、Y255、H318、T328和C330)。经多序列比对和系统发育树分析,表明HdPGRP属于短型PGRP家族成员。在健康鲍鱼中,hdpgrp主要在肝胰腺中表达,其次依次在血细胞、外套膜和鳃中。在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激后,血细胞中的hdpgrp表达量在72 h内呈现先上升后下降的趋势,在24 h表达量达到最高。SDS-PAGE结果显示,重组HdPGRP (rHdPGRP)的分子量为30 kDa。rHdPGRP表现为Zn2+依赖酰胺酶活性,可催化降解不溶性肽聚糖。此外,rHdPGRP对革兰氏阳性菌藤黄微球菌(Micrococcus luteus)具有显著的抑制作用,且这种抑制作用可能与其酰胺酶活性有关。本研究表明,HdPGRP在机体抵御入侵细菌等免疫防御中起重要作用。     

5-羟色胺诱导刺参幼虫附着变态

采用不同浓度的5-羟色胺（5-HT）溶液诱导刺参幼虫附着变态,处理不同时间后,计算附着变态率。结果表明：使用浓度为0．001、0．01、0．1和1mmol／L的5-HT溶液诱导刺参幼虫12和24小时均可不同程度地提高刺参幼虫附着变态率。以浓度为0．1mmol／L的5-HT溶液诱导刺参幼虫24小时效果最好,附着变态率提高12．8％。     

大竹蛏β-整合素基因SgβInt的特性分析和重组表达

整合素作为一种细胞粘附因子,在细胞粘附、迁移、增殖、凋亡和吞噬等过程中发挥重要作用。本研究利用分子克隆技术获得了大竹蛏(Solen grandis)β-整合素基因(SgβInt)的c DNA全长,分析了其编码氨基酸序列的进化特点,并以SWISS-MODEL预测了氨基酸序列的三级结构。SgβInt基因序列全长为1168 bp,5'和3'非编码区(UTR)分别为61 bp和18 bp,开放阅读框(ORF)为1089 bp,编码362个氨基酸,理论等电点约为4.98,分子量为30.0 kDa。通过荧光定量PCR法检测了SgβInt在健康大竹蛏各组织中以及大竹蛏受到脂多糖、肽聚糖和葡聚糖等微生物多糖刺激后的表达。结果显示,SgβInt在血细胞、鳃、肝胰腺、性腺、肌肉和外套膜等组织中均可表达,在鳃中的表达量最高;脂多糖、肽聚糖和葡聚糖都可以诱导SgβInt表达量上调,SgβInt的表达量分别在脂多糖和葡聚糖刺激后的3 h和48 h达到最高;肽聚糖刺激后SgβInt表达量上调幅度最大,在6 h时达到最高,证实SgβInt参与大竹蛏抵御外源微生物的免疫应答。利用基因重组技术构建了SgβInt的重组表达载体,为进一步分析软体动物整合素的功能、揭示大竹蛏先天性免疫机制奠定了基础。     

皱纹盘鲍稚鲍对海水酸化与溴氰菊酯复合胁迫的响应

为探究海水酸化与溴氰菊酯(DM)复合暴露对皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)稚鲍的毒性效应,采用3个pH(pH 8.1、pH 7.7和pH 7.4)和3个溴氰菊酯浓度(0、0.6和6 μg/L)对稚鲍进行复合胁迫,并对贝壳微观结构与硬度、组织中抗氧化酶活性以及应激、凋亡相关基因表达量进行了检测。结果显示,经过海水酸化与溴氰菊酯复合暴露31 d后稚鲍贝壳CaCO3晶体沉积困难,文石板片变小并形成分散的板层堆叠,文石板片之间孔隙增大,并且伴随着贝壳硬度的显著降低。同时,海水酸化与溴氰菊酯能够引起皱纹盘鲍稚鲍组织抗氧化酶活力的改变,其中稚鲍超氧化物歧化酶(SOD)活力随着pCO2与溴氰菊酯浓度的上升而持续降低,并且在海水酸化与溴氰菊酯复合暴露下稚鲍SOD活力明显低于单一暴露物,说明海水酸化与溴氰菊酯对稚鲍SOD活力的影响具有明显交互作用。而在相同pH暴露下,溴氰菊酯能够使稚鲍CAT与GST活力显著上升。此外,本研究还观察到了稚鲍组织中应激基因与凋亡相关基因表达量随着pCO2与溴氰菊酯浓度的上升均有提高,并且海水酸化与溴氰菊酯暴露在HSP70、HSP90、Caspase-3以及FADD等基因表达量上具有明显协同作用。综上所述,海水酸化与溴氰菊酯暴露能够对稚鲍产生明显毒害效应,并且在引起稚鲍组织氧化应激与细胞凋亡的反应中具有一定交互作用。