小麦钾离子通道蛋白基因TaPC1介导植株抵御低钾逆境功能研究

  【目的】  钾离子通道 (potassium channel, PC) 蛋白通过介导离子跨膜转运，增强低钾胁迫下植株对钾素的吸收和利用能力。本研究以采用RNAseq鉴定小麦应答低钾基因获得的PC家族基因TaPC1为对象，对该基因分子特征、应答低钾表达模式及其介导植株抵御低钾逆境的能力进行研究。  【方法】  采用生物信息学工具分析TaPC1分子特征，采用溶液培养法培养丰钾 (K₂O 6 mmol/L )、低钾 (K₂O 0.06 mmol/L) 处理小麦和转化株系幼苗，采用 DNA 重组技术构建TaPC1亚细胞定位和表达质粒，利用农杆菌介导法遗传转化烟草。采用常规植株形态、生理和qPCR方法测定植株生长、生理指标和基因表达。  【结果】  TaPC1与植物种属PC家族基因具有较高的同源性，该基因编码蛋白具有植物种属PC蛋白跨膜域保守特征，翻译蛋白经内质网分选后定位于细胞质膜。低钾 (0.06 mmol/L) 处理下，根、叶中TaPC1表达增强；将低钾处理植株转入丰钾 (6 mmol/L) 营养液进行恢复处理后，根、叶中该基因表达下调，表明TaPC1呈低钾应答表达模式。基因遗传转化结果表明，与野生型 (WT) 对照相比，低钾处理下，超表达TaPC1烟草株系植株干物质积累量增多，细胞活性氧累积量减少，细胞保护酶 (SOD、CAT和POD) 活性提高，丙二醛含量降低。基因表达分析表明，低钾处理下，转化株系内细胞保护酶编码基因NtSOD1、NtCAT1;1、NtPOD1;2及NtPOD1;6的转录本丰度较野生型 (WT) 显著增多，表明上述基因通过增强表达，在改善转化株系低钾处理下细胞活性氧稳态中发挥重要作用。此外，与WT相比，低钾处理下转化株系的钾累积量显著增多，光合碳同化能力增强。  【结论】  TaPC1呈低钾胁迫增强表达模式，上调表达该基因能显著增强植株钾素吸收，有效维持低钾逆境下的细胞活性氧稳态特征，在改善植株光合物质生产和抵御低钾逆境能力中发挥重要作用。     

非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达

为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因,进行克隆和序列分析,结果表明:该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96.6%～99.2%和97.9%～99.4%之间,与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93.2%～93.6%和96.4%～97.5%之间;在N基因系统发育进化树上,非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群,而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株。N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62 ku,主要以包涵体的形式存在;用western blot分析,重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应;以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。     

大力发展农民专业合作社

近几年来,农民专业合作社虽然发展较快,但在发展中还存在许多困难和问题,如规模小、覆盖面不广、内部运作机制不规范、扶持力度不够、法律地位不明确等,发展农业合作社,使其在发展农村经济中发挥重要作用,应采取以下措施。1.典型引导,示范带动由于农民专业合作社是农业进入新阶段后,     

做强果树产业 服务广大社员

发展农民专业合作经济组织,是当前"三农"工作的一项重要任务。办好各类的农民专业合作社是让农民增收致富,加快新农村建设的重要组成部分。联丰果业专业合作社成立于2008年2月,现有成员122人,经营果树面积3900亩,果树株树30万株,主栽品种有苹果、梨。2011年,合作社生     

茼蒿大棚优质高效栽培技术

茼蒿为1年生草本植物,以幼苗或陆续采摘的嫩茎、叶供食。茼蒿适应性强,生育期短,容易栽培。在伊春市棚室可四季栽培生产,播后40~50天即可采收。因此,可保证市场周年供应和调剂餐桌蔬菜品种。伊春市保护地栽培主要是利用大棚在早春与黄瓜、番茄间作,即副行栽培。1品种选择应选择     

高度重视马铃薯金线虫的入境检验

马铃薯金线虫原产于南美洲的安地斯山脉 ,与马铃薯共同进化 ,19世纪初爱尔兰发生马铃薯饥荒后 ,欧洲开始大量引进优良、抗病的马铃薯新品种 ,马铃薯金线虫的孢囊随土壤粘附在马铃薯种薯上 ,一同传入欧洲 ,再从欧洲传到世界其他地区。马铃薯金线虫在我国尚无分布 ,马铃薯金线虫是《中华人民共和国进境植物危险性病虫杂草名录》中规定的一类危险性有害生物 ,并且是中俄 (中方提出 )、中罗、中南、中匈、中蒙植检植保双边协定规定的检疫性线虫病害。1　分类地位线虫纲 (Nematoda) ,垫刃目 (Tylenchida) ,异皮线虫科 (Heteroderidae) ,球孢囊…     

降低柴油机排放的匹配试验与燃烧过程分析

为同时降低柴油机的Nox和碳烟排放,对不同孔径的喷油器、不同柱塞直径的喷油泵,不同供油提前角的燃烧过程进行了分析,对喷油泵、增压器、喷油器以及供油提前角等参数进行优化匹配.结果表明:在原机供油提前角的基础上,采用推迟供油、较小孔径的喷油器、大柱塞直径的喷油泵,改善燃油混合过程,减少燃烧预混期的燃油量,降低最高燃烧温度,缩短后燃.经过综合匹配,柴油机的Nox和碳烟排放分别降低了19.8%和26.9%.     

奇可力抗疲劳作用的实验研究

试验研究了喂服奇可力对小鼠游泳时间、爬杆时间、血乳酸、尿素氮、肝糖原含量和肌糖原含量的影响结果表明：奇可力能增强小鼠游泳耐力，延长爬杆时间，降低血乳酸、血中尿素氮含量，提高肝糖原含量和肌糖原含量，具有抗疲劳作用。     

靶向VP1和VP2双拷贝shRNA重组表达质粒抑制传染性法氏囊病病毒复制的研究

为抑制传染性法氏囊病病毒(IBDV)的复制,本研究构建了靶向IBDV VP1和VP2基因的鸡双向U6启动子(chU6)双拷贝shRNA重组表达质粒pchU6-shRNA12,将其转染鸡胚成纤维细胞(CEF),再接种IBDV,72 h后,未出现细胞病变(CPE),病毒滴度小于101 TCID50/0.1mL;而转染空质粒和未转染两个对照组均出现明显的CPE,病毒滴度均达到108.75 TCID50/0.1 mL.此外,将pchU6-shRNA12与IBDV混合,接种于10日龄SPF鸡胚尿囊腔,96 h后,鸡胚发育正常,病毒滴度小于101 ELD5,0/0.1 mL,实时荧光定量RT-PCR检测VP1和VP2基因,比单纯接种IBDV组分别降低92％和95％;而含有空质粒和不含质粒两个对照组鸡胚则全部死亡,病毒滴度均达到107.00 ELD50/0.1mL.本研究结果表明,chU6启动子在双拷贝shRNA表达质粒pchU6-shRNA12中能高效驱动双拷贝shRNA的转录,生成的siRNA在CEF(in vitro)和鸡胚体内(in vivo)均能有效抑制IBDV的复制.     

降低柴油机排放的多因素匹配试验研究

以增压器、喷油器、喷油泵以及供油提前角为试验因素，以降低NOx和PM排放为研究目标，采用单纯形法的多因素试验法，进行了柴油机低排放匹配试验。结果表明：单纯形法可以优选柴油机多因素的匹配方案。多因素匹配结果为：选用进气压力和过量空气系数较大的增压器，适当的增大喷孔孔径，选用柱塞直径较大的喷油泵，适当的调整供油提前角，可使柴油机的NOx和PM排放分别降低了19.8%和26.9%。