渤海湾地区‘大果水晶梨’黑星病的发生与防治

自从‘大果水晶梨’引入渤海湾地区以后,梨黑星病的发生越来越严重。经过近10年的调查,总结分析该地区‘大果水晶梨’黑星病的为害症状、传播途径、发病关键期和防治要点,推动该地区‘大果水晶梨’黑星病的综合防治研究和抗病育种工作。     

鲜黄梨果实糖积累及山梨醇转化相关酶活性的变化

对鲜黄梨果实发育中糖积累及山梨醇转化相关酶活性的变化进行了研究。结果表明:果实发育前期以积累山梨醇和淀粉为主,后期以积累果糖为主。果实整个发育过程中,葡萄糖、果糖、蔗糖、可溶性总糖含量逐渐增加,山梨醇和淀粉含量先增加后降低。山梨醇脱氢酶和山梨醇氧化酶在果实发育早中期活性逐渐增高,后期活性降低,但较前期高,两者共同对山梨醇的转化起调控作用。     

中国砂梨7个自交不亲和新基因的分离与测序

S-RNase是配子体自交不亲和植物雌蕊的基因产物，它降解具有相同基因型的花粉mRNA或rRNA．导致植物的自交不亲和．借鉴日本梨S—RNase基因的分析方法．对中国砂梨5个品种的基因组DNA进行PCR—RFLP系统检测和DNA序列分析，从中发现了7个新的S—RNase等位基因，分别命名为S11-RNase、S12-RNase、S13-RNase、S14-RNase、S-15RNase、S16-RNase和S25-RNase基因，其部分序列已登录到GenBank．     

‘晚大新高梨’树体及果实生长发育特性研究

为深入系统研究‘晚大新高梨’树体及果实生长发育特性,对其幼龄期树干、枝梢生长进行了田间观测,并对生长结果期果台叶、果实及其内含营养成分动态变化进行了测定分析。结果表明:‘晚大新高梨’幼龄期树体生长快,枝条生长势强,幼树干周膨大率前期高后期低,前期达142%,后期降为120%左右;生长结果期1年生长枝生长快、发育好,花芽率平均高达63.15%,结实能力与2、3年枝基本相同。果台叶在盛花后30~150 d,SPAD值逐渐增大,变化范围在39.6~48.8;叶中P、K、Mg含量逐渐降低,Ca含量逐渐升高,变幅分别为0.058%~0.124%、1.07%~1.48%、0.250%~0.332%、1.10%~2.37%,N含量相对稳定,在2.08%~2.85%。果实在年生长发育过程中,纵、横径生长动态曲线为“W”型,呈“快-慢-快”的趋势;水分日相对变化率与生长动态曲线相似,果实生长快时,水分相对变化率也高;果实中无机成分含量(鲜重)在幼果期即盛花后45d前变化快,其中K变化最大,幼果期含量高达1.092 g/100 g,成熟时降为1.035 g/100 g;果实中总糖变化呈逐渐积累趋势,在成熟采摘时达最高值10.15 g/100 g;有机酸含量呈“降-升-降”变化,成熟时含量最低。果实最佳采收期在盛花后150~160 d。     

降低苍溪梨外植体组培褐变途径的研究

以苍溪梨为试材进行降低梨外植体组培褐变研究。结果表明,苍溪梨适宜在MS＋1．0mg/LBA 0.02mg/LNAA上生长分化,将外植体在0．002mol/L的8－羟基奎啉溶液中作不同时间的处理,20min处理更有利于防止褐变同时不阻抑梨芽生长,成活率高达90％,2h处理时成活率降低为0。从3月到10月用相同的培养基进行培养,4月下旬采集的材料的褐变率最高,5月份以后外植体组培褐变率逐渐降低,10月份降低为0。通过不同的褐变抑制剂预处理（从田间产样到接种前的褐变抑制剂浸泡）试验表明,在田间将采集的梨外植体进行低温处理,接种前作20min8－羟基奎啉和苯甲酸钠（浓度分别为0．002mol/L和0．2mol/L)浸泡处理对降低褐变和提高成活率均有较为理想的效果。     

梨果实发育过程中钙调素水平的动态研究

以贮藏性有明显差异的黄花梨和湘南梨为试材，研究果实发育过程中钙调素(CaM)含量的变化。结果表明：梨果实生长曲线为非典型的S型，湘南梨果肉CaM在果实发育前期含量较高，果实迅速膨大期CaM降至果实发育的波谷，果实采收前CaM出现峰值，采收时又下降。在果实迅速膨大期前，黄花梨果肉整体水平低于湘南梨，果实膨大期降到波谷，成熟前迅速升到峰值。梨种子发育曲线为典型的S型，盛花后50d左右，种子即将进入迅速生长期，CaM含量出现峰值，2个品种峰值差异大。     

云南红皮梨bHLH转录因子的生物信息学分析

具有碱性-螺旋-转角-螺旋结构的一大类基因被称为bHLH家族基因,其成员主要有c-MYC、MADL、MAX、MIXL和删r基因;bHLH转录因子在细胞的增殖、分化和凋亡方面起着重要作用;对植物的生长发育、营养吸收、生物合成和信号转导等方面同样有着重要作用。在果肉、叶片和外果皮中,CsMYC2的表达与CHS、UFGT及ANS表达相关联,因此CsMYC2参与花色苷的生物合成调控,但是该基因在云南红皮梨花色苷合成调控中起着什么样的作用尚不清楚。利用生物信息学方法对云南红皮梨（RedPyruspyrifdia）bHLH基因进行分析,对不同植物间bHLH基因氨基酸序列的同源性比对,并且对该基因编码的蛋白质的理化性质、结构和功能等进行预测和分析。结果表明：该蛋白属于亲水性蛋白,其二级结构中的主要结构元件是仅一螺旋和无规则卷曲,并散布于整个蛋白。这一结果为研究红皮梨bHLH基因的结构、功能以及红皮梨的着色机制奠定了一定的基础。     

砂梨扩展蛋白基因cDNA克隆及全序列分析

设计植物EXP扩展蛋白简并引物,以砂梨果实cDNA为模板,克隆得到EXP基因cDNA片段,该片段长465 bp。根据该片段序列,分别设计2条5’和3’末端扩增的特异引物,利用RACE技术,获得了该片段的5’端和3’端序列。用DNAMAN5.22软件对3个序列进行拼接和分析,获得了该基因的cDNA全长,命名为Pyp-EXP。该cDNA全长为1 395 bp,5’端起始密码子ATG始于72 bp,3’端终止子TAG止于830 bp,Ploy+(A)从1 363～1 395 bp。该基因已在GenBank基因数据库注册,注册号为EF602031。Pyp-EXP核苷酸序列有一个759 bp完整的开放阅读框,编码区与西洋梨、苹果、湖北海棠、桃的同源性分别为96%,96%,94%和86%;该cDNA推导编码252个氨基酸,含有1个组氨酸(His_Phe_Asp,HFD)功能域,与西洋梨、苹果、湖北海棠、桃中相应序列同源性分别为98%,97%,95%和93%。该基因的克隆为研究扩展蛋白的时空表达及其在果实发育和成熟过程中的作用奠定了基础。     

检测砂梨潜隐病毒的IC-RT-PCR和TC-RT-PCR的研究

以砂梨为试材,在生物学和血清学检测的基础上,采用免疫捕作RT-PCR穴IC-RT-PCR雪和试管捕作RT-PCR穴TC-RT-PCR雪技术,对苹果褪绿叶斑病毒(Applechloroticleafspotvirus,ACLSV)和苹果茎沟病毒(Applestemgroovingvirus,ASGV)进行了检测分析。结果表明,TC/IC-RT-PCR均能有效检测梨粗提液中的ACLSV和ASGV,分别获得了大小约358bp和499bp的目标扩增片段;但IC-RT-PCR检测ACLSV的效果受到病毒分离株间血清学关系影响。与传统的RT-PCR相比,IC/TC-RT-PCR不仅灵敏度更高,而且不需提取总RNA,可以简化操作程序和减少苯酚、氯仿类有机试剂对人体的伤害和对环境的污染,适合于大量梨样品的病毒快速灵敏检测。