超表达OsPR1A增强了Xa21介导的水稻对白叶枯病的抗性反应

【背景】前期研究发现,水稻病程相关蛋白质OsPR1A的表达受上游抗病基因Xa21调控,接菌后早期启动Xa21介导的OsPR1A较高水平表达对水稻抵抗白叶枯病菌至关重要。同时OsPR1A也受到水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo）的诱导表达。对于OsPR1A的研究绝大部分是作为抗性反应发生的标志基因佐证其他基因或途径在抗性中的作用,缺乏直接的证据证实OsPR1A本身的生物学功能。【目的】通过获得OsPR1a-OX超表达转基因植株,调查其表型及农艺性状,并明确OsPR1A蛋白质表达与抗性的关系,为鉴定OsPR1A功能提供依据。【方法】通过农杆菌介导法,将构建的OsPR1a-OX转化载体转入到水稻受体4021中,利用PCR和免疫印迹（western blot,WB）技术分别在基因水平和蛋白质水平上筛选并鉴定OsPR1A超表达阳性纯合株系。在成熟期,调查OsPR1A超表达转基因植株的表型及农艺性状（株高、穗长、分蘖数、结实率和籽粒大小等）。在31℃条件下,将生长2周的水稻幼苗TP309、4021和OsPR1A超表达转基因植株接种水稻白叶枯病菌,并在接菌0、2、4、6、8、10和12 d时测量病斑长度。在接菌0、4和6 d时,收集TP309、4021和OsPR1A超表达转基因植株的水稻叶片,提取蛋白质,利用WB技术检测OsPR1A的表达特征。【结果】构建了OsPR1a-OX转化载体,并转入到受体4021中,筛选并鉴定到2个OsPR1A超表达转基因纯合株系（#704和#709）。调查了OsPR1A超表达转基因植株在成熟期的表型及农艺性状,与对照4021相比,#704和#709的株高较矮、穗长较短、分蘖数减少、结实率降低,但籽粒稍大,可能与结实率低有关。在31℃条件下,OsPR1A超表达转基因植株的病斑长度与对照4021相比明显缩短,结果具有显著性差异（P<0.05）。在接菌0、4和6 d的材料中,超表达转基因植株#704和#709中OsPR1A始终有较高水平的表达丰度,从而提高了对白叶枯病菌的抗性。【结论】采用农杆菌介导法,获得OsPR1A超表达转基因植株;超表达OsPR1A影响到水稻的正常发育过程;超表达OsPR1A后增强了Xa21介导的水稻对白叶枯病的抗性。     

我国喀斯特断陷盆地石漠化区植物群落构建机制研究

喀斯特断陷盆地是我国石漠化综合治理8大喀斯特类型中治理成效最低、治理难度最大的区域，面临石漠化严重、干旱频发、植被恢复难等突出问题。文中针对水分是影响喀斯特断陷盆地石漠化治理与植被恢复成效最关键的限制因素，综合分析了国内外水分梯度差异与植物群落构建机制研究动态与发展趋势；提出利用日趋成熟的水分脆弱性评价方法，通过建立基于耦合暴露度、敏感性及适应性的水资源脆弱性评价指标体系，以满足遥感影像分辨率和植物群落调查样地大小的评价单元进行水分脆弱性评估；在建立物种库—功能性状—生境特征数据库的基础上，提出基于功能性状差异进行喀斯特断陷盆地植物群落机制构建的研究方案。提出的研究方案有望解决喀斯特断陷盆地石漠化区水分梯度特征与分布格局、自然植物群落组配规律及其生境特征、水分梯度与生境要素对植物群落特征及功能性状组成的影响规律等关键科学问题，可为不同脆弱生态区植被恢复群落构建机制研究提供重要参考和借鉴。     

马铃薯AP2/ERF转录因子的克隆及植物表达载体构建

AP2/ERF基因家族转录因子普遍存在于植物中,参与植物体内的各种生物学过程,包括植物的生长发育、生物和非生物胁迫响应等。前期转录组测序的结果发现马铃薯‘加湘1号’一个AP2/ERF家族基因(PGSC0003DMG400012154)在接种晚疫病菌(Phytophthora infestans)24 h后被显著激活。从接种P.infestans 24 h的‘加湘1号’的总RNA中通过RT-PCR获得了该基因CDS序列为885 bp,BLAST分析显示该基因编码一个295个氨基酸残基的蛋白,并且含有1个AP2/ERF结构域,是AP2/ERF转录因子家族中的ERF亚家族的一员。本研究将该基因与XcmⅠ酶切的表达载体pCXSN连接,转化大肠杆菌,通过测序挑选插入正确克隆酶切验证,并成功转化农杆菌。本研究结果为进一步研究该基因的功能提供了帮助。     

基于甘肃省陇西县对县域畜牧业构建环境平衡状态的研究

为找准畜牧业与环境保护工作之间的平衡点,构筑一个切实可行的互惠共赢的包容发展体系,本文以甘肃省陇西县为例,通过对当前畜牧业发展现状、环境污染情况及畜牧业与环境的关系分析研究,就如何全方位建立畜牧业生态系统做一论证。结果表明:1)畜禽排产污总量和环境承载力的辩证关系是县级行政区域相关宏观政策制定的基础",水-土-草-畜"的平衡统一是畜牧业可持续发展的先决条件;2)畜牧业应在环境保护临界点的安全范围内调整发展方向;3)畜牧业要依据当地地理环境、外围承载能力适时调整畜种、饲养量,配套防污治污硬件设施,软环境上增加输入力度,达到减排的目的。该研究结果可为县级行政区域协调畜牧和环保提供有力的理论参考和行政依据。     

白屈菜CmFAD2基因的克隆及植物转化载体构建

通过对白屈菜低温应答过程的转录组分析发现膜脂不饱和化相关基因的表达在一定过程中发生变化,脂肪酸去饱和酶基因FAD2在随温度的变化趋势为正"V"型,且表达量变化显著。利用NCBI等在线软件对序列进行相关生物学信息分析,并对白屈菜FAD家族成员FAD2基因的完整开放阅读框(ORF)进行克隆,并命名为CmFAD2。选用克隆载体pMD-19-T,转化大肠杆菌DH5α,测序验证序列正确性及完整性。将目的基因与植物表达载体pRI-201-AN连接构建重组DNA pRI-201-AN-Cm FAD2,电击法转化农杆菌LBA4404,利用菌液PCR法验证成功。该基因可作为药用植物抗寒品种创制的候选基因。     

新型农业投融资体制存在的问题及构建策略

我国是农业大国,但农业技术与发达国家相比较为落后,农业投融资体制仍不够完善,农业发展缺乏合理、稳定的资金支持。本文重点阐述了目前我国农业投融资存在的问题,探究了新型农业投融资体制构建策略和实践意义,以期为推动我国农业和农村经济健康发展提供参考。     

对中职《动物微生物及检验》课程项目化教学模式的构建与实践

随着养殖经济的不断发展,动物微生物检验技术是推动畜牧业积极发展的重要因素之一,畜牧业也特别需要高素质的动物微生物检验技术的专业人才。要培养高素质的社会需要的动物微生物检验专业人才,在现在中职院校的《动物微生物及检验》课程的教学中,教师要采用新的教学模式进行课程教学,通过项目化教学技术和创新型的项目化教学模式,来提高课程的教学效率。因此,对动物微生物课程教学模式进行改革和探索势在必行,本文阐述了对中职《动物微生物及检验》课程项目化教学模式的构建与实践的过程。     

江苏新型农村科技服务体系构建的路径与对策分析

农村科技服务体系对于发展现代农业、推进农村振兴具有重要意义,但目前江苏传统的农村科技服务体系还存在着诸多与新形势不相适应之处,亟须构建一种适合江苏农村地区的新型科技服务体系,为今后农村科技服务工作的开展提供方法参考及数据支持.以江苏省连云港、盐城等13个地级市为研究区,分析问卷对象对科技推广服务、科技物化成果服务、资金支持及科技服务人员的满意度,从而揭示出江苏传统农村科技服务体系存在的问题.通过研究得出构建新型农村科技服务体系的五大路径有政府主导型、农村科技服务组织主导型、农业科研机构参与型、农村科技中介组织发挥独特作用型及农业企业提供服务型,并提出相应的六大对策建议为积极培育扶持新型农村科技服务体系的服务主体、重视新型农村科技服务体系的先进适用技术源头供给、完善新型农村科技服务体系的运营与管理、探索新型农村科技服务体系的高效服务模式、优化新型农村科技服务体系的投入机制及强化新型农村科技服务体系的人才支撑.     

微生物进化树构建方法

进化树的构建是当代生命科学技术中最为重要的技术之一,可以分析未知微生物和已知微生物的亲疏关系,从而进一步获取微生物进化关系的重要证据。本文对微生物进化树的构建进行了研究,阐述了进化树的原理,梳理了相关的理论,同时全面地介绍了最常用的构建进化树的软件及其功能,详细地介绍了微生物进化树的构建方法,以期为更便捷地开展后续研究提供参考。